содержание .. 55 56 57 58 ..
ГОСУДАРСТВЕННАЯ ФАРМАКОПЕЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ (ПЕРВОЕ ИЗДАНИЕ, 2006 год) - часть 57
ТЕСТ «ПРОВЕРКА ПРИГОДНОСТИ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЙ СИСТЕМЫ»
Ниже приводятся некоторые особенности, которые необходимо учитывать
для данного теста.
Отношение Сигнал/Шум. Обычно определяют для сигналов, равных или не-
сколько больших, чем предел обнаружения и предел количественного определе-
ния.
Степень разделения. Определяют для пика анализируемого вещества и бли-
жайшего пика примеси или для пика анализируемого вещества и пика внутреннего
стандарта. Если коэффициент асимметрии отличается от принятого диапазона (0,8-
1,2), целесообразно нормировать его пределы (2.2.28). Это особенно важно для тех
случаев, когда используются набивные колонки или пик нормируемой примеси элюи-
руется непосредственно за пиком основного вещества. Там, где возможно, подтвер-
ждают выполнение испытания с использованием колонок подобного типа.
Метод анализа равновесной паровой фазы. Этот метод применяют для ана-
лиза легколетучих веществ. Необходимо показать, что выбранные температура и
время предварительного нагрева сосудов с анализируемым образцом обеспечива-
ют установление равновесия. Валидация метода заключается в проведении по-
вторных анализов образца. При этом после каждого введения пробы газовая фаза
в сосуде замещается и сосуды снова уравновешиваются перед новым вводом газо-
вой фазы. По полученным данным строят график зависимости логарифмов площа-
дей пиков анализируемого вещества от числа экстракций и рассчитывают его ха-
рактеристики. Близость коэффициента корреляции полученной зависимости к 1,0
свидетельствует о правильности выбора условий испытаний. Эффекты влияния
матрицы можно устранить при использовании метода стандартных добавок.
КОЛИЧЕСТЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
Специфичность. Как описано для жидкостной хроматографии.
Тест «Проверка пригодности системы». Как описано для жидкостной хрома-
тографии.
6. Определение воды полумикрометодом (2.5.12)
Для подтверждения корректности использования йодсернистых реактивов, ко-
торые отличаются по составу от йодсернистого реактива Р (например, реактив Кар-
ла Фишера), следует провести валидацию одним из приведенных ниже методов.
6.1. Метод добавок
Определяют содержание воды (mH2O, мг) в субстанции в соответствии с мето-
дикой, указанной в частной статье. Определение проводят не менее пяти разов. За-
тем к испытуемому образцу прибавляют, избегая попадания атмосферной влаги, под-
ходящий объем стандартизированного раствора воды в метаноле Р и определяют
содержание воды (mi, мг). Определение проводят не менее пяти раз для разных объ-
емов стандартизированного раствора в принятом диапазоне употребления методики.
Методом наименьших квадратов рассчитывают параметры линейной зависимо-
сти найденного содержания воды от количества прибавленной воды: тангенс угла на-
клона (b), точку пересечения с осью ординат (а) и точку пересечения экстраполиро-
ванной калибровочной прямой с осью абсцисс (d).
Значение тангенса угла наклона b должен находиться в пределах от 0,975 до
1,025 (±2,5%). Относительные отклонения е1 и е2, в процентах, рассчитывают по фор-
мулам:
a
-
m
d
-
m
H2O
H2O
e
=
¥100%
e
=
¥100%
1
1
mHO
mHO
2
2
е1 и е2 не могут превышать +2.5%.
Для каждого из определений рассчитывают найденное количество в процентах
от прибавленного количества. Среднее значение пяти определений должно быть от
97,5% до 102,5%.
6.2. Сравнение с арбитражным методом
Определяют содержание воды полумикрометодом и другим подходящим вали-
дированным методом, например, методом газовой хроматографии (2.2.28), методом
термогравиметрического анализа (2.2.34) и др.
Средния значения, полученные полумикрометодом и арбитражным методом, не
должны отличаться статистически значительно.
5.4. ОСТАТОЧНЫЕ КОЛИЧЕСТВА ОРГАНИЧЕСКИХ
РАСТВОРИТЕЛЕЙ
Регламентация содержания остаточных растворителей в
субстанциях, вспомогательных веществах и готовых
лекарственных средствах
Данная общая фармакопейная статья устанавливает предельное
содержание растворителей, которое может присутствовать в субстанциях,
вспомогательных веществах и готовых лекарственных средствах в
результате
производственного
процесса.
Данная
статья
не
распространяется на зарегистрированные лекарственные средства.
Фармакопея применяет одни и те же принципы, описанные в ней к
существующим субстанциям, вспомогательным веществам и готовым
лекарственным средствам, независимо от того, являются они или нет
объектом Фармакопеи. Все субстанции, вспомогательные материалы и
готовые лекарственные средства должны проверяться на содержание тех
растворителей, которые могут в них присутствовать.
Если при производстве разрешено использование растворителя класса 1,
то его предельное содержание должно устанавливаться в частной
фармакопейной статье.
Обычно частные статьи не включают тесты по контролю остаточных
растворителей, относящихся к классу 2, так как применяемые растворители
могут меняться в зависимости от производителя. Компетентные
уполномоченные органы должны быть информированы о растворителях,
используемых в производстве. Эта информация должна приводиться в
досье, которое подается для регистрации.
Если используются растворители
класса
3, то для контроля их
содержания можно применять тест «Потеря в массе при высушивании» или
тест, указанный в частной статье. Если для растворителей класса
3
обосновано и разрешено предельное содержание более
0,5%, то тест,
указанный в частной статье, является обязательным. В этом случае
расчеты ведутся с перерасчетом на безводное и свободное от остаточных
растворителей вещество. Во всех случаях компетентные органы должны
быть проинформированы об используемых растворителях класса 3.
Для контроля остаточных растворителей класса 1 или 2 (или класса 3 с
содержанием более
0,5%) следует использовать, по возможности,
методику, приведенную в частной статье 2.4.24. В ином случае следует
применять подходящую валидированную методику.
5.4.1. ВВЕДЕНИЕ
Целью данной статьи является рекомендация приемлемых для
безопасности больного количеств остаточных растворителей в
лекарственных средствах. В статье рекомендуется использование менее
токсичных растворителей, и описываются токсикологически обоснованные
предельные содержания некоторых из них.
Остаточные растворители в лекарственных средствах определяются
согласно данному руководству как летучие органические вещества,
используемые или образующиеся при производстве субстанций,
вспомогательных веществ или готовых лекарственных средств. Эти
растворители полностью не удаляются в применяемом технологическом
процессе. Выбор подходящего растворителя для синтеза субстанции может
увеличить ее выход или обусловить такие характеристики, как
кристаллическая форма, чистота и растворимость. Таким образом,
растворитель иногда может быть критическим параметром в процессе
синтеза. Данное руководство не распространяется на растворители,
используемые в качестве вспомогательных веществ или относящиеся по
составу к сольватам. Напротив, содержание растворителей в таких
препаратах должно обосновываться и определяться.
Поскольку остаточные растворители не имеют терапевтического
действия, адекватного действию лекарственного вещества, они должны
удаляться до такой степени, чтобы удовлетворять требованиям
спецификации, надлежащей производственной практики (GMP) или другим
требованиям к качеству. Лекарственные средства не должны содержать
остаточные растворители выше
нормы, установленной данными по
безопасности. Следует избегать использования при производстве
субстанций, вспомогательных веществ и готовых лекарственных средств
растворителей, имеющих высокую токсичность (класс 1, Табл. 1), если их
применение не может быть достаточно обоснованным с точки зрения
оценки
«риск-польза». Содержание некоторых растворителей, имеющих
меньшую токсичность (класс 2, Табл. 2), должно быть ограничено, чтобы
исключить потенциальный побочный эффект. Идеально на практике должны
использоваться менее токсичные растворители (класс 3, Табл. 3). Полный
список растворителей, включенных в данное руководство, представлен в
Приложении 1. Данный перечень не является исчерпывающим, он может
дополняться другими используемыми растворителями. Рекомендуемые
предельные содержания остаточных растворителей классов 1 и 2, а также
классификация растворителей может изменяться по мере появления новых
данных относительно их безопасности. Обоснование безопасности
применения на рынке нового лекарственного средства, содержащего новый
растворитель, отсутствующий в перечне растворителей
(Приложение
1),
может строиться на концепции данного руководства.
5.4.2. ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
Область применения статьи - остаточные растворители в лекарственных
субстанциях, вспомогательных веществах и лекарственных средствах. Определение
остаточных растворителей необходимо проводить, если известно, что процесс
производства или очистки приводит к их появлению. Следует определять те
растворители, которые используются или производятся в процессе изготовления или
очистки лекарственных субстанций, вспомогательных веществ или лекарственных
средств. Для определения содержания остаточных растворителей возможно как
проведение испытания лекарственного средства, так и использование совокупного
метода расчета, исходя из информации об их содержании во входящих
ингредиентах, использованных в процессе производства лекарственного средства.
Если на основании результатов вычисления, концентрация остаточных
растворителей не превышает предела, рекомендуемого в настоящей статье, нет
необходимости проводить испытания готового лекарственного средства на
содержание остаточных растворителей. Однако, если расчетная концентрация выше
рекомендуемого предела, лекарственное средство должно быть проверено, чтобы
установить, способствует ли процесс изготовления уменьшению уровня данного
растворителя до приемлемого количества. Испытание готового лекарственного
средства также необходимо проводить, если растворитель используется в процессе
его производства.
Данная статья не относится ни к потенциально новым лекарственным
субстанциям, вспомогательным веществам и лекарственным средствам,
находящимся на стадии клинических испытаний, ни к зарегистрированным
лекарственным средствам.
Статья применима ко всем дозированным формам и способам применения. В
некоторых случаях, таких как: краткосрочное (30 дней или меньше) или местное
применение, могут быть приемлемы более высокие уровни остаточных
растворителей. Оценка таких уровней должна проводиться в каждом конкретном
случае.
Дополнительную информацию по остаточным растворителям см. в
Приложении 2.
5.4.3. ОБЩИЕ ПОЛОЖЕНИЯ
5.4.3.1. КЛАССИФИКАЦИЯ ОСТАТОЧНЫХ РАСТВОРИТЕЛЕЙ ПО СТЕПЕНИ РИСКА
Международная программа по химической безопасности для описания
пределов воздействия токсических химических реагентов использует термин
«максимально допустимое ежедневное потребление» (TDI или ДЕП), а Всемирная
организация здравоохранения
(ВОЗ) и другие национальные и международные
организации здравоохранения и институты используют термин
«приемлемое
ежедневное потребление» (ADI или ПЕП). С целью избежания путаницы, в данной
статье определен новый термин «допустимая (разрешенная) суточная доза» (PDE
или ДСД)
- это максимально приемлемое суточное потребление остаточного
растворителя в лекарственном средстве.
Остаточные растворители, которым дает оценку данная статья, перечислены
в Приложении 1 общими названиями и структурными формулами. Они оценивались
по степени возможного риска для здоровья человека и разделены на 3 класса:
Класс 1: Растворители, использование которых нужно избегать. Известные
канцерогены для человека; предполагаемые канцерогены для человека;
растворители, опасные для окружающей среды.
Класс
2: Растворители, использование которых нужно ограничивать. Не
генотоксичные канцерогены для животных или растворители, которые могут вызвать
другие необратимые эффекты, такие как нейротоксичность или тератогенность.
Растворители, подозреваемые в другой существенной, но обратимой токсичности.
Класс 3: Малотоксичные растворители. Растворители с низким потенциалом
токсичности для человека; для них не требуется установливать предельное
содержание, обусловленное информацией о риске для здоровья человека.
Растворители Класса 3 имеют ДСД от 50 мг/день и выше.
5.4.3.2. МЕТОДЫ УСТАНОВЛЕНИЯ ПРЕДЕЛЬНОГО СОДЕРЖАНИЯ
В Приложении 3 представлен метод для установления предельной суточной
дозы остаточных растворителей.
5.4.3.3.
ПОДХОДЫ УСТАНОВЛЕНИЯ ПРЕДЕЛЬНОГО СОДЕРЖАНИЯ
РАСТВОРИТЕЛЕЙ КЛАССА 2
Для установления предельного содержания растворителей класса 2 могут
использоваться два подхода.
Подход 1: Используют предельные концентрации в ppm из Табл. 2., которые
были рассчитаны с помощью уравнения (1), исходя из предположения, что суточное
потребление препарата составляет 10 г.
1000×
ДСД
Концентрация
(ppm)
=
,
(1)
Доза
где:
ДСД (допустимая суточная доза) выражается в мг/ день (сутки);
Доза - в г/день (сутки).
Эти предельные содержания остаточных растворителей рассматриваются как
приемлемые для всех субстанций, вспомогательных веществ и лекарственных
средств. Поэтому этот метод может быть использован, если суточная доза
неизвестна или не установлена. Если содержание остаточных растворителей во
всех вспомогательных веществах и лекарственных субстанциях, которые входят в
состав готового лекарственного средства, удовлетворяет пределам, приведенным в
Табл. 2, то все эти компоненты можно использовать в любой пропорции. Если
суточная доза лекарственного средства не превышает 10 г, никакие дальнейшие
вычисления не требуются. Определение предельного содержания остаточных
растворителей в лекарственных средствах, которые принимаются в дозах,
превышающих 10 г, должно проводиться с использованием Подхода 2.
Подход 2. Нет необходимости, чтобы содержание остаточных растворителей в
каждом компоненте лекарственного средства соответствовало пределам,
регламентированным с использованием Подхода 1.
Определить
предельное содержание остаточного растворителя в
лекарственном средстве, можно по формуле
(1), используя ДСД
(мг/ сутки),
приведенное в Табл.
2, и известное значение максимальной суточной дозы
лекарственного средства. Такие пределы являются приемлемыми при условии, что
показано снижение содержания остаточного растворителя до минимума, который
достигается практически. Пределы должны быть реалистичными в отношении
аналитической точности, производственной возможности, разумного изменения
производственного процесса, и пределы должны соответствовать современным
производственным стандартам.
Подход
2 предусматривает суммирование количеств остаточного
растворителя, присутствующего в каждом из компонентов готового лекарственного
средства. Суммарное содержание растворителя в сутки должно быть меньше, чем
ДСД.
Рассмотрим использование Подхода 1 и Подхода 2 для расчета предельного
содержания ацетонитрила в лекарственном средстве. ДСД для ацетонитрила - 4,1
мг/сутки. Таким образом, его предельное содержание с использованием Подхода 1
-
410 ppm. Максимально потребляемая масса лекарственного средства в сутки -
5,0 г. Лекарственное средство содержит два вспомогательных вещества. Состав
лекарственного средства и расчетное предельное содержание ацетонитрила
приведены в таблице:
Компонент
Количество
Содержание
Суточное
в составе, г
ацетонитрила,
воздействие, мг
ppm
Лекарственная субстанция
0,3
800
0,24
Вспомогательное вещество 1
0,9
400
0,36
Вспомогательное вещество 2
3,8
800
3,04
Лекарственное средство
5,0
728
3,64
Концентрация ацетонитрила во вспомогательном веществе 1 удовлетворяет
предельному значению, установленному с использованием Подхода
1, но его
концентрация в лекарственной субстанции, вспомогательном веществе
2 и
лекарственном средстве не удовлетворяет. Тем не менее, содержание
ацетонитрила в готовом лекарственном средстве, установленное с использованием
Подхода 2, не превышает предела 4,1 мг/сутки и, следовательно, соответствует
рекомендациям данного руководства.
Рассмотрим другой пример для ацетонитрила в качестве остаточного
растворителя. Максимальная потребляемая масса лекарственного средства в сутки
- 5,0 г, и лекарственное средство содержит два вспомогательных вещества. Состав
лекарственного средства и расчетное максимальное содержание ацетонитрила
приведены в следующей таблице:
Компонент
Количество в
Содержание
Суточное
составе, г
ацетонитрила,
воздействие,
ppm
мг
Лекарственная субстанция
0,3
800
0,24
Вспомогательное вещество 1
0,9
2000
1,80
Вспомогательное вещество 2
3,8
800
3,04
Лекарственное средство
5,0
1016
5,08
В данном случае, концентрация ацетонитрила в лекарственном средстве не
удовлетворяет предельному значению ни с использованием Подхода 1 ни Подхода
2. Производитель может провести испытания лекарственного средства, чтобы
определить, снижает ли процесс производства содержание ацетонитрила. Если же
содержание ацетонитрила не уменьшается в процессе производства до допустимого
предела, производитель должен предпринять другие шаги для уменьшения
концентрации ацетонитрила в лекарственном средстве. Если все предпринятые
меры не приведут к уменьшению содержания остаточного растворителя, в
исключительных случаях производитель может подготовить резюме о предпринятых
усилиях, направленных на уменьшение содержания растворителя до норм данного
руководства, и провести анализ выгоды риска, чтобы получить разрешение на
использование препарата, содержащего более высокий уровень остаточного
растворителя.
5.4.3.4. АНАЛИТИЧЕСКИЕ МЕТОДИКИ
Остаточные растворители, как правило, определяются с использованием
хроматографических методов, в частности газовой хроматографии. Для
определения содержания остаточных растворителей могут использоваться любые
подходящие методики, описанные в Фармакопеях. Иначе говоря, производители
должны быть свободны в выборе наиболее подходящей валидированной
аналитической методики для конкретного применения. Если присутствуют только
растворители Класса
3, могут быть использованы неспецифические методы
контроля, такие как, например, потеря в массе при высушивании.
Валидация
(проверка правильности) методов контроля остаточных
растворителей должна соответствовать руководствам ICH:
«Валидация
аналитических методик» и «Валидация аналитических методик ГФ РБ».
5.4.3.5. ИНФОРМАЦИЯ О СОДЕРЖАНИИ ОСТАТОЧНЫХ РАСТВОРИТЕЛЕЙ
Производителям лекарственных средств необходима надежная информация о
содержании остаточных растворителей во вспомогательных веществах или
лекарственных субстанциях. Информация о содержании остаточных растворителей,
которая может передаваться производителям лекарственных средств поставщиками
субстанций или вспомогательных веществ может быть представлена в следующих
вариантах:
1. Вероятно присутствуют остаточные растворители только класса 3. Тест
"Потеря в массе при высушивании" - менее 0,5 %;
2. Вероятно присутствуют остаточные растворители только класса
2;
содержание каждого из них не превышает предельной концентрации в ррm,
указанной в таблице 2; указывают наименование каждого из них.
3. Вероятно присутствуют остаточные растворители класса 2 и 3, содержание
каждого из растворителей класса 2 не превышает предельной концентрации в
ррm, указанной в таблице 2; а содержание растворителей класса 3 - менее 0,5 %.
Если существует вероятность присутствия растворителей класса
1, то
каждый из них должен быть идентифицирован и определен количественно.
«Вероятно присутствуют» - относится к растворителям, используемым на
заключительном этапе производства и тем, которые используются на ранних
стадиях производства и полностью не удаляются утвержденным (валидированным)
процессом.
Если присутствуют остаточные растворители класса 2 выше предельной
концентрации по Методу 1, и остаточные растворители класса 3 превышают 0,5 %,
то каждый из них должен быть идентифицирован и определен количественно.
5.4.4. ПРЕДЕЛЬНЫЕ СОДЕРЖАНИЯ ОСТАТОЧНЫХ РАСТВОРИТЕЛЕЙ
5.4.4.1. РАСТВОРИТЕЛИ, ИСПОЛЬЗОВАНИЕ КОТОРЫХ НУЖНО ИЗБЕГАТЬ
Растворители Класса
1 не должны использоваться в производстве
фармацевтических субстанций, вспомогательных веществ и лекарственных средств
из-за их высокой токсичности и вредного воздействия на окружающую среду.
Однако, если их использование неизбежно для производства лекарственного
средства, которое имеет сильно выраженный терапевтический эффект, их
количества должны быть ограничены в соответствии с Табл.1, если иное не
обосновано.
1,1,1-тирхлорэтан включен в Табл.
1, потому что он опасен для
окружающей среды. Установленный предел в 1500 ppm основан на обзоре данных о
безопасности.
Таблица 1
Растворители Класса
1 в лекарственных средствах
(растворители,
применения которых нужно избегать).
Растворитель
Концентрационный
Влияние
предел (ppm)
Бензол
2
канцероген
Четыреххлористый углерод
4
токсичен и опасен для
окружающей среды
1,2-дихлорэтан
5
токсичен
1,1-дихлорэтен
8
токсичен
1,1,1-трихлорэтан
1500
опасен
для
окружающей среды
5.4.4.2. РАСТВОРИТЕЛИ, ИСПОЛЬЗОВАНИЕ КОТОРЫХ НУЖНО ОГРАНИЧИВАТЬ
Содержание растворителей, приведенных в Табл. 2, должно быть ограничено
в лекарственных средствах в связи с их токсичностью. Данные ДСД даны с
точностью до 0,1 мг/сутки, а концентрации - с точностью до 10 ppm. Установленные
значения не отражают необходимую аналитическую точность определения.
Точность должна быть определена как часть валидации (проверки правильности)
методики.
Таблица 2
Растворители класса 2 в лекарственных средствах
Растворитель
ДСД (мг/день)
Концентрационный
предел (ррm)
2-метоксиэтанол
0,5
50
метилбутилкетон
0,5
50
нитрометан
0,5
50
хлороформ
0,6
60
1,1,2- трихлорэтен
0,8
80
диметоксиэтан
1,0
100
тетралин
1,0
100
2-этоксиэтанол
1,6
160
сульфолан
1,6
160
пиридин
2,0
200
формамид
2,2
220
гексан
2,9
290
хлорбензол
3,6
360
1,4-диоксан
3,8
380
ацетонитрил
4,1
410
дихлорметан
6,0
600
этиленгликоль
6,2
620
N,N-диметилформамид
8,8
880
толуол
8,9
890
N,N-диметилацетамид
10,9
1090
метилциклогексан
11,8
1180
1,2-дихлорэтен
18,7
1870
ксилол
21,7
2170
метанол
30,0
3000
циклогексан
38,8
3880
N- метилпирролидон
48,4
4840
5.4. 4.3.МАЛОТОКСИЧНЫЕ РАСТВОРИТЕЛИ
Растворители Класса 3 (представлены в Табл.3) могут можно отнести к менее
токсичным и обладающим меньшим риском для здоровья человека. Класс 3 не
включает растворители, известные как опасные для здоровья человека в
концентрациях, которые обычно допускаются в лекарственных средствах. Однако,
для многих растворителей Класса
3 не проводилось долгосрочное изучение
токсичности или канцерогенности. Доступные данные указывают на то, что они
менее токсичны в острых или краткосрочных испытаниях и дают отрицательный
результат в испытаниях на генотоксичность
(не проявляют генотоксичность).
Считается, что содержание этих остаточных растворителей равное 50 мг/сутки или
меньше
(соответствует
5000 ppm или
0,5% по Методу
1) приемлемы без
обоснования. Более высокие значения также могут быть приемлемы, при условии,
что они определяются возможностями производства, которое отвечает требованиям
надлежащей производственной практики (НПП).
Таблица 3
Растворители Класса
3,
которые должны быть ограничены
требованиями НПП или другими требованиями к качеству.
Анизол
Метилизобутилкетон
Ацетон
2-метил-1-пропанол
1-бутанол
Муравьиная кислота
2-бутанол
Пентан
Бутилацетат
1-пентанол
Трет-бутилметиловый эфир
1-пропанол
Гептан
2-пропанол
Диметилсульфоксид
Пропилацетат
Изобутилацетат
Тетрагидрофуран
Изопропилацетат
Уксусная кислота
Кумол
Этанол
Метилацетат
Этилацетат
3-метил-1-бутанол
Этиловый эфир
Метилэтилкетон
Этилформиат
5.4.4.4. РАСТВОРИТЕЛИ, ДЛЯ КОТОРЫХ ОТСУТСТВУЮТ НЕОБХОДИМЫЕ
ДАННЫЕ О ТОКСИЧНОСТИ
Растворители, представленные в Табл. 4 могут также представлять интерес
для производителей вспомогательных веществ, лекарственных субстанций или
лекарственных средств. Однако, для них отсутствуют обоснованные данные о
токсичности. Производители должны сами обосновывать остаточные содержания
этих растворителей в лекарственных средствах.
Таблица 4
Растворители, для которых отсутствуют обоснованные данные о
токсичности
1,1-диэтоксипропан
Метилизопропилкетон
1,1-диметоксиметан
Метилтетрагидрофуран
2,2-диметоксипропан
Петролейный эфир
Изооктан
Трихлоруксусная кислота
Изопропиловый эфир
Трифторуксусная кислота
ТЕРМИНЫ:
Генотоксичные канцерогены - канцерогены, которые вызывают появление
злокачественныз опухолей, воздействуя на гены или хромосомы.
Минимальный уровень, с которого наблюдается эффект
(МУНЭ)
-
минимальная доза (вещества) в испытании или серии испытаний, которая вызывает
биологически существенное увеличение в частоте или серьезности любых эффектов
у людей или животных.
Коэффициент корреляции- коэффициент, определенный в соответствии с
обоснованным заключением токсиколога и основанный на экстраполяции на
чекловека данных по безопасности, полученных при испытаниях на животных.
Нейротоксичность
- способность вещества оказывать неблагоприятное
воздействие на нервную систему.
Уровень, при котором не наблюдается эффект (УННЭ) - максимальная доза
вещества, при которой нет биологически существенных увеличений в частоте или
серьезности любых эффектов у людей или животных.
ДСД - разрешенная (допустимая) суточная доза - максимально приемлемое
суточное потребление остаточного растворителя в лекарственном средстве.
Обратимая токсичность
- возникновение вредных эффектов, которые
вызваны данным веществом и исчезают после прекращения действия вещества.
Предполагаемый канцероген человека
- вещество, для которого нет
эпидемиологической очевидности канцерогенеза, но есть положительные данные по
генотоксичности и очевидность канцерогенеза у грызунов.
Тератогенность - возникновение структурных уродств в развивающемся
зародыше, когда вещество принимается в период беременности.
Приложение 1. Список растворителей, включенных в руководящие указания
Растворитель
Другое название
Структура
Класс
Анизол
Метоксибензол,
Класс 3
O
метилфениловый эфир
CH3
Ацетон
Диметилкетон,
СН3СОСН3
Класс 3
2-пропанон
Ацетонитрил3
СН3СN
Класс 2
Бензол4
С6Н6
Класс 1
1-бутанол
Н-бутиловый спирт,
СН3(СН2)3ОН
Класс 3
пропилкарбинол
2-бутанол
Втор-бутиловый спирт,
СН3СН2СН(ОН)СН3
Класс 3
метилэтилкарбинол
Бутилацетат
Бутиловый
эфир
СН3СОО(СН2)3СН3
Класс 3
уксусной кислоты
трет-
2-метокси-2метилпропан
(СН3)3СОСН3
Класс 3
бутилметиловый
эфир
Гептан
Н-гептан
СН3(СН2)5СН3
Класс 3
Гексан29
Н-гексан
СН3(СН2)4СН3
Класс 2
N,N-
Диметиламид уксусной
СН3СОN(CH3)2
Класс 2
диметилацетамид
кислоты,
ДМА
Диметилсульфоксид
Метилсульфинилметан,
(СН3)2SO
Класс 3
Метилсульфоксид,
ДМСО
N,N-
Диметиламид уксусной
НСОN(СН3)2
Класс 2
диметилформамид
кислоты,
ДМФ
1,2- диметоксиэтан64
Диметиловый
эфир
H3COCH2CH2OCH3
Класс 2
этиленгликоля,
диметилцеллозольв
O
1,4-диоксан23
Диэтилендиоксид,
Класс 2
p-диоксан
O
Дихлорметан17
Метиленхлорид
СН2Сl2
Класс 2
1,2- дихлорэтан14
Этилендихлорид
СH2ClСH2Сl
Класс 1
1,1-дихлорэтен15
1,1-дихлорэтилен
H2C=CCl2
Класс 1
1,2-дихлорэтен16а
1,2-дихлорэтилен
СlHC=CHCl
Класс 2
Изобутилацетат
Изобутиловый
эфир
СН3СООСН2СН(СН3)2
Класс 3
уксусной кислоты
Изопропилацетат
Изопропиловый
эфир
СН3СООСН(СН3)2
Класс 3
уксусной кислоты
Ксилол*54
Диметилбензол
(СН3)2С6Н4
Класс 2
Кумол
Изопропилбензол,
Класс 3
СН(СН3)2
1-метилэтилбензол
Метанол34
Метиловый спирт
СН3ОН
Класс 2
Метилацетат
Метиловый
эфир
СН3СООСН3
Класс 3
уксусной кислоты
3-метил-1- бутанол
Изоамиловый спирт,
(СН3)2СНСН2СН2ОН
Класс 3
изопентанол
Метилбутилкетон30
2-гексанон
СН3(СН2)3СОСН3
Класс 2
Метилизобутил-
4-метил-2-пентанон
СН3СОСН2СН(СН3)2
Класс 3
кетон
MИБK
H3C
N- метилпирролидон
1-метил-2-пирролидон
Класс 2
N
O
2-метил-1-пропанол
Изобутиловый спирт
(СН3)2СНСН2ОН
Класс 3
Метилциклогексан62
Циклогексилметан
Класс 2
CH3
Метилэтилкетон
2-бутанол,
СН3СН2СОСН3
Класс 3
МЭК
2-метоксиэтанол
Метилцеллозольв
СН3ОСH2CH2OH
Класс 2
Муравьиная кислота
НСООН
Класс 3
Нитрометан63
СН3NO2
Класс 2
Пентан
Н-пентан
СН3(СН2)3СН3
Класс 3
1-пентанол
Амиловый спирт
СН3(СН2)3СН2ОН
Класс 3
Пиридин49
N
Класс 2
1-пропанол
Пропиловый спирт
СН3СН2СН2ОН
Класс 3
2-пропанол
Изопропиловый спирт
(СН3)2СНОН
Класс 3
Пропилацетат
Пропиловый
эфир
СН3СООСН2СН2СН3
Класс 3
уксусной кислоты
Сульфолан
Тетрагидротиофен-1,1-
Класс 2
диоксид
S
O O
Тетрагидрофуран
Тетраметиленоксид
Класс 3
O
Тетралин61
1,2,3,4-
Класс 2
тетрагидронафталин
Толуол51
Метилбензол
Класс 2
CH3
1,1,1-трихлорэтан52
Метилхлороформ
CH3CCl3
Класс 1
1,1,2- трихлорэтен53
Трихлорэтен
HСlC=CCl2
Класс 2
Уксусная кислота
Этановая кислота
СН3СООН
Класс 3
Формамид
Метанамид
НСОNH2
Класс 2
Cl
Хлорбензол58
Класс 2
Хлороформ11
Трихлорметан
СНСl3
Класс 2
Циклогексан13
Гексаметилен
Класс 2
Четыреххлористый
Тетрахлорметан
CCl4
Класс 1
углерод10
Этанол
Этиловый спирт
СН3СН2ОН
Класс 3
Этилацетат
Этиловый эфир уксусной
СН3СООСН2СН3
Класс 3
кислоты
Этиленгликоль
1,2-дигидроксиэтан,
НОСН2СН2ОН
Класс 2
1,2-этандиол
Этиловый эфир
Диэтиловый эфир,
СН3СН2ОСН2СН3
Класс 3
этоксиэтан,
1,1,-оксибисэтан,
серный эфир
Этилформиат
Этиловый
эфир
НСООСН2СН3
Класс 3
муравьиной кислоты
2-этоксиэтанол
Целлозоль
СН3СН2ОСН2СН2ОН
Класс 2
*- обычно 60% м-ксилола, 14% п-ксилола, 9% o-ксилола с 17% этилбензола.
Примечание: числовые
индексы растворителей
(цифры вверху)
соответствуют номерам пиков на типичных хроматограммах остаточных
растворителей
(рис.2.4.24.-1, рис.2.4.24.-2, рис.2.4.24.-3, рис.2.4.24.-4) в
разделе 2.4.24.
ПРИЛОЖЕНИЕ 2. ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ДАННЫЕ
А 2.1. ВЛИЯНИЕ ОРГАНИЧЕСКИХ ЛЕТУЧИХ РАСТВОРИТЕЛЕЙ НА ОКРУЖАЮЩУЮ
СРЕДУ
Некоторые из остаточных растворителей, часто используемых в
фармацевтическом производстве, внесены в перечень токсичных химических
соединений в монографиях
«Критерии здоровья окружающей среды» (ЕНС) и
«Объединенная система информации риска» (IRIS). Цели таких организаций, как
Международная программа по химической безопасности (IPSC), Управление по
охране окружающей среды США (USEPA), Управление лекарственных средств и
пищевых продуктов
(USFDA) включают определение предельного содержания
химических веществ. Основная их цель
- защита человеческого здоровья и
окружающей среды от возможного негативного влияния химических соединений в
результате длительного воздействия. Методы, используемые для оценки
максимальных, безопасных пределов воздействия, обычно основываются на
долгосрочных исследованиях. Когда данные долгосрочных испытаний недоступны,
могут быть использованы данные краткосрочных испытаний с модификацией
подхода, например, использование более высоких коэффициентов корреляции.
Подход, описанный в настоящей статье, относится прежде всего к
долгосрочным воздействиям или воздействиям на продолжительность жизни
популяции окружающей среды, в частности, воздуха,продовольствия, питьевой воды
и др.
А 2.2. ОСТАТОЧНЫЕ РАСТВОРИТЕЛИ В ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВАХ
Пределы воздействия в этой статье установлены в соответствии с
методологией и данными токсичности, приведенными в монографиях ECH и IRIS.
Однако, при установлении пределов воздействия должны быть приняты некоторые
допущения относительно остаточных растворителей, которые используются в
процессе синтеза и изготовления лекарственных средств, а именно:
1) Пациенты используют лекарственные средства для лечения болезней или
для профилактики с целью избежать инфекции или болезни.
2) Предположение о воздействии на продолжительность жизни пациента не
обязательно для большинства лекарственных средств, но может рассматриваться
как рабочая гипотеза, чтобы уменьшить риск для здоровья человека.
3) Остаточные растворители - неизбежные компоненты фармацевтического
производства и зачастую являются составной частью лекарственных средств.
4) Остаточные растворители не должны превышать рекомендуемые
концентрации, кроме исключительных обстоятельств.
5) Данные о токсикологических испытаниях, которые используются для
определения приемлемых концентраций остаточных растворителей, должны быть
зафиксированы с использованием соответствующих протоколов, описанных,
например, в документах OECD, EPA и FDA Red Book.
ПРИЛОЖЕНИЕ 3. МЕТОДЫ УСТАНОВЛЕНИЯ ДОПУСТИМОЙ СУТОЧНОЙ ДОЗЫ
Для оценки риска канцерогенных растворителей Класса 1 используют метод
Гейлора-Коделя (Gaylor, D.W. and Kodell, R.l.: Linear Interpolation algorithm for low
dose assessment of toxic substance. J. Environ. Pathology,
4,
305,
1980). Для
установления ДСД экстраполяцию с использованием математических моделей
следует применять только в тех случаях, когда есть достоверные данные о
канцерогенности. ДСД для растворителей Класса 1 также может определяться с
использованием высокого значения коэффициета корреляции (например, от 10000
до 100000) для уровня, при котором эффект не наблюдается. Обнаружение и
количественное определение этих растворителей следует проводить
валидированными аналитическими методиками.
Предельные содержания для растворителей Класса 2 в этом руководстве
были установлены путем вычисления значений ДСД согласно методикам
определения предельного содержания растворителей в лекарственных средствах
(Pharmacopeial Forum, ноябрь-декабрь 1989г.) и методам, принятым IPCS для оценки
риска химических веществ в отношении здоровья человека (Environmental Health
Criteria
170, ВОЗ, 1994). Эти методы подобны тем, которые используют USEPA
(IRIS),
USFDA
(Красная книга) и др. Метод описан ниже, чтобы пояснить
происхождение значений ДСД. Чтобы использовать значения ДСД, приведенные в
таблице Раздела
4 этого документа, нет необходимости производить эти
вычисления.
При экспериметах на животных значения ДСД рассчитывают исходя из уровня,
при котором эффект не наблюдается (УННЭ) или уровня, при котором наблюдается
самый низкий эффект (МУНЭ) по формуле:
УННЭ ×Масса тела
ДСД
=
,
F
1
×
F
2
×
F
3
×
F
4
×
F
5
Значение ДСД преимущественно получают на основании УННЭ. Если
значения УННЭ неизвестны, могут быть использованы значения МУНЭ.
Коэффициенты корреляции, предложенные здесь для экстраполяции на человека
данных, полученных на животных, это те же «коэффициенты неопределенности»,
которые использовались в монографии «Критерии здоровья окружающей среды»
(Environmental Health Criteria
170, ВОЗ, Женева,
1994) и
«коэффициенты
корреляции» или «коэффициенты безопасности» - в «Pharmacopeial Forum”. Во всех
расчетах принимается предположение о 100% системном воздействии независимо
от способа применения лекарств.
Коэффициенты корреляции:
F1 - коэффициент корреляции для расчета экстраполяции между видами
F1 = 5 при экстраполяции на человека данных, полученных при исследованиях
на крысах
F1
=
12 при экстраполяции на человека данных, полученных при
исследованиях на мышах
F1 = 2 при экстраполяции на человека данных, полученных при исследованиях
на собаках
F1
=
2,5 при экстраполяции на человека данных, полученных при
исследованиях на кроликах
F1 = 3 при экстраполяции на человека данных, полученных при исследованиях
на обезъянах
F1
=
10 при экстраполяции на человека данных, полученных при
исследованиях на других животных
F1 принимает во внимание отношение площади поверхности тела: к весу тела
соответствующих видов животных и человека. Площадь поверхности
рассчитывается следующим образом:
S = kM
0,67
,
где:
М - масса тела,
k - константа, принята равной 10.
Массы тела, используемые в уравнении, представлены в таблице А 3.1.
F2 = коэффициент 10 , учитывающий индивидуальную изменчивость . Для
всех органических растворителей, приведенных в данном руководстве,
коэффициент обычно принимают равным 10.
F3
= переменный коэффициент для расчета испытаний токсичности
кратковременных воздействий.
F3 = 1, для испытаний, которые длятся по меньшей мере в течение периода
равного половине продолжительности жизни животных
(1 год для грызунов и
кроликов; 7 лет для собак, котов и обезьян).
F3
=
1, для репродуктивных
(воспроизводительных) испытаний, которые
охватывают весь период органогенеза.
F3 = 2, для испытаний в течение 6 месяцев на грызунах, или 3,5 лет - не на
грызунах.
F3 = 5, для 3-х месячных испытаний на грызунах, или 2-х летних - на не
грызунах.
F3 = 10, для испытаний более короткой продолжительности.
Для всех промежуточных испытаний необходимо использовать более высокий
коэффициент (например, для 9-месячных испытаний на грызунах используется
коэффициент =2).
F4 = коэффициент, который может применяться при высокой токсичности
растворителя, например, негенотоксичной канцерогенности, нейротоксичности или
тератогенности. В испытаниях репродуктивной токсичности используются
следующие коэффициенты:
F4
=
1, для эмбриональной токсичности, связанной с материнской
токсичностью (интоксикацией)
F4 = 5, для эмбриональной токсичности (интоксикацией), не связанной с
материнской
F4 = 5, для тератогенного эффекта, связанного с материнской интоксикацией
F4
=
10, для тератогенного эффекта, не связанного с материнской
интоксикацией.
F5 = переменный коэффициент, который может применяться, если УННЭ
(уровень, не вызывающий эффекта) не был установлен. Когда доступны только
данные уровня МУНЭ
(уровень, вызывающий минимальный эффект) то, в
зависимости от уровня токсичности, может использоваться коэффициент вплоть до
10.
Допускается, что масса тела взрослого человека любого пола равна 50 кг.
Этот относительно низкий вес обеспечивает дополнительный коэффициент
безопасности стандартному весу человека 60 или 70 кг, который часто используется
в таких вычислениях. Известно, что многие взрослые пациенты весят менее 50 кг,
поэтому в этом случае при определении ДСД используются другие коэффициенты.
Если лекарственное средство, содержащее растворитель, предназначено длч
педиатрии, то необходимо сделать корректировку на более низкую массу тела.
Как пример применения этого уравнения, рассмотрим испытание токсичности
ацетонитрила на мышах, которое было описано в Pharmeuropa, т.9,
№1.
Дополнение. Апрель 1997, с. S24. Установлено, что значение УННЭ - 50,7 мг/кг ·
сутки. ДСД для ацетонитрила при этом рассчитывали следующим образом:
50,7мг×кг
-1
× сутки
-1
×50кг
ДСД
=
=
4,22мг/сутки
12×10×5
×
1
×
1
В этом примере
F1 = 12, учитывает экстраполяцию на человека данных, полученных при
исследованиях на мышах
F2 = 10, учитывает индивидуальную изменчивость
F3 = 5, так как продолжительность испытаний составила только 13 недель
F4 = 1, так как с серьезной токсичностью не сталкивались
F5 = 1, так как не был определен уровень, не вызывающий эффекта
Таблица А 3.1
Значения, использованные при расчетах в данном документе.
Вес крысы
330 г
Дыхательный объем мыши
43л/сутки
Вес беременной крысы
425 г
Дыхательный объем кролика
1440
л/сутки
Вес мыши
28 г
Дыхательный объем морской
430 л/сутки
свинки
Вес беременной мыши
30 г
Дыхательный
объем
28800
человека
л/сутки
Вес морской свинки
500 г
Дыхательный объем собаки
9000
л/сутки
Вес макаки-резус
2,5 кг
Дыхательный
объем
1150
обезьяны
л/сутки
Вес кролика (беременного или
4 кг
Потребление воды мышью
5 мл/сутки
нет)
Вес гончей собаки (бигль)
11,5 кг
Потребление воды крысой
30 мл/сутки
Дыхательный объем крысы
290л/
Потребление пищи крысой
30 г/сутки
сутки
Для перерасчета концентраций газов, используемых в дыхательных
(ингаляторных) испытаниях из ppm в мг/л или мг/м3 , использовали уравнение для
идеального газа: PV
= nRT. Рассмотрим в качестве примера испытание
репродуктивной токсичности крысы в результате вдыхания четыреххлористого
углерода (М.м. 153,84), описанное в Pharmeurope, т.9, №1, Дополнение, апрель
1997, стр. S9.
n
P
300×10
-6
атм
×
153840мг ×моль
-1
4
,
мг
=
=
=
=1,
89мг/
л
V
RT
0,082л×атм.×К
-1
×
моль
-1
×
298×К
24,45л
Для приведения к мг/м3 использовали соотношение 1000 л = 1 м3
Таблица А 3.2
Сокращения и обозначения
ICH
Международная конференция по гармонизации технических
возможностей по регистрации лекарственных средств для
людей
International Conference on Harmonisation of Technical
Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use
CPMP/ICH/283/95
Постановление о регламентации остаточных растворителей
Guidelines for residual solvents
IPCS
Международная программа по химической безопасности
International Program on Chenical Safety
GMP (НПП)
Надлежащая производственная практика
Good manufacturing practice
TDI
Ежедневная хорошо переносимая доза
Tolerable daily intake
ADI
Ежедневная допустимая доза
Acceptable daily intake
PDE (ДСД)
Допустимая суточная доза
Permitted daily exposure
LOEL (МУНЭ)
Минимальный уровень наблюдаемого эффекта
Lowest-observed effect level
NOEL (УННЭ)
Уровень не наблюдаемого эффекта
No-observent-effect level
EHC
«Критерий состояния окружающей среды»
«Environmental Health Criteria»
IRIS
Информационная система совокупного риска
Integrated Risk Information System
OECD
Организация по экономическому содружеству и развитию
Organization for Economic Cooperation and Development
US EPA
Управление охраны окружающей среды Соединенных Штатов
United States Environmental Protection Agency
US FDA
Управление продовольственных продуктов и лекарственных
средств Соединенных штатов
United States Food and Drug Administration
5.5. АЛКОГОЛЕМЕТРИЧЕСКИЕ ТАБЛИЦЫ
# Таблица 5.5.-1.
Соотношение между плотностью водно-спиртового раствора и содержание
этанола в растворе
Плотность
Содержание этанола в водно-спиртовом
Плотность
Содержание этанола в водно-спиртовом
ρ20
растворе
ρ20
растворе
в процентах
граммов
миллилитров
в процентах
граммов
миллилитров
по
по
в 100
в 100 г при
по
по
в 100
в 100 г при
массе
объему
мл при
взвешивании
массе
объему
мл при
взвешивании
200С
в воздухе
200С
в воздухе
0,99823
0,00
0,00
0,00
0,00
0,9878
6,00
52
94
62
80
12
16
13
16
6
13
67
6,05
77
0,9978
23
29
23
29
4
26
83
18
94
6
34
43
34
43
2
39
99
31
8,10
4
44
56
44
56
0
52
8,15
43
27
2
55
70
55
70
0,9868
65
32
57
44
0
66
83
66
83
6
78
48
69
61
0,9968
77
97
77
97
4
92
64
82
77
6
87
1,10
87
1,10
2
7,05
80
95
93
4
98
24
98
24
0
18
97
7,08
9,11
2
1,09
38
1,09
38
0,9858
32
9,13
21
27
0
20
51
19
51
6
45
30
34
45
0,9958
31
65
32
66
4
58
47
47
62
6
42
79
41
80
2
72
63
60
78
4
52
92
52
93
0
85
80
73
96
2
63
2,06
63
2,07
0,9848
99
97
87
10,13
0
74
20
74
21
6
8,12
10,13
8,00
30
0,9948
85
34
85
35
4
26
30
13
47
6
96
48
96
50
2
39
47
26
65
4
2,07
62
2,07
64
0
53
63
39
82
2
19
76
18
78
0,9838
67
80
52
99
0
29
90
29
92
6
80
97
66
11,17
0,9938
41
3,04
40
3,06
4
94
11,14
79
34
6
52
18
51
20
2
9,08
31
93
52
4
63
32
62
34
0
22
48
9,06
70
2
75
46
73
48
0,9828
35
65
19
87
0
86
60
84
63
6
49
82
33
12,04
0,9928
97
74
95
77
4
63
99
46
22
6
3,09
89
3,07
92
2
77
12,16
60
40
4
20
4,03
18
4,06
0
91
34
74
58
2
32
17
29
20
0,9818
10,05
51
87
75
0
44
32
41
36
6
19
68
10,01
93
0,9918
55
46
52
50
4
34
85
14
13,11
6
67
61
64
65
2
48
13,03
28
29
4
78
75
75
80
0
62
20
42
47
2
90
90
87
95
0,9808
76
38
56
66
0
4,02
5,05
99
5,10
6
91
55
69
83
0,9908
14
20
4,10
25
4
11,05
73
84
14,02
6
26
35
22
41
2
20
90
97
20
4
38
50
34
56
0
34
14,08
11,11
38
2
50
65
46
71
0,9798
49
26
25
57
0
62
80
58
87
6
64
44
40
76
0,9898
75
95
70
6,02
4
78
62
54
94
6
87
6,10
81
17
2
93
79
67
15,12
4
99
26
94
34
0
12,07
97
82
31
2
5,11
41
5,06
49
0,9788
22
15,15
96
50
0
24
57
19
65
6
37
34
12,11
69
0,9888
37
73
31
81
4
52
52
25
88
6
49
88
43
97
2
67
70
39
16,07
4
62
7,04
56
7,13
0
81
88
53
26
2
75
20
68
29
0,9778
96
16,06
68
44
0
87
36
81
46
6
13,11
25
83
66
Продолжение таблицы 5.5.-1.
Плотность
Содержание этанола в водно-спиртовом
Плотность
Содержание этанола в водно-спиртовом
ρ20
растворе
ρ20
растворе
в процентах
граммов
миллилитров
в процентах
граммов
миллилитров
по
по
в 100
в 100 г при
по
по
в 100
в 100 г при
массе
объему
мл при
взвешивании
массе
объему
мл при
взвешивании
200С
в воздухе
200С
в воздухе
4
27
43
97
83
4
65
51
92
47
2
42
61
13,11
17,01
2
80
68
21,06
65
0
57
80
26
21
0
94
85
19
83
0,9768
72
98
40
40
0,9658
22,09
27,03
33
28,02
6
87
17,17
55
60
6
23
20
47
20
4
14,02
35
69
79
4
37
37
60
38
2
18
54
84
99
2
52
54
74
56
0
33
73
99
18,19
0
66
71
87
75
0,9758
49
91
14,14
38
0,9648
81
88
22,00
93
6
64
18,10
29
58
6
95
28,05
14
29,12
4
80
29
44
78
4
23,09
22
27
29
2
96
48
59
97
2
23
38
40
47
0
15,11
67
74
19,17
0
38
55
53
65
0,9748
27
86
89
37
0,9638
52
72
67
83
6
43
19,05
15,04
57
6
66
88
79
30,00
4
58
24
19
77
4
80
29,05
93
18
2
74
43
34
97
2
94
21
23,05
36
0
90
62
49
20,16
0
24,08
38
19
54
0,9738
16,05
81
64
36
0,9628
22
54
32
71
6
21
20,00
79
56
6
36
71
45
90
4
37
19
94
76
4
50
87
58
31,07
2
52
37
16,08
95
2
64
30,03
70
24
0
68
56
23
21,15
0
78
19
83
42
0,9728
84
75
38
35
0,9618
92
35
95
60
6
99
93
52
54
6
25,05
52
24,09
78
4
17,15
21,12
67
74
4
19
68
21
95
2
30
31
82
94
2
32
84
34
32,12
0
45
49
96
22,13
0
46
31,00
47
30
0,9718
61
68
17,11
33
0,9608
59
16
59
48
6
76
86
25
52
6
73
31
71
63
4
92
22,05
40
72
4
86
47
84
81
2
18,07
23
55
91
2
26,00
63
96
98
0
22
41
69
23,10
0
13
78
25,08
33,14
0,9708
37
60
84
31
0,9598
26
94
21
31
6
52
78
98
50
6
39
32,09
33
48
4
67
96
18,12
69
4
52
24
45
64
2
83
23,14
26
88
2
65
39
56
81
0
98
32
41
24,07
0
78
54
68
96
0,9698
19,13
50
55
26
0,9588
92
69
80
34,13
6
28
68
69
45
6
27,04
84
92
29
4
43
86
83
64
4
17
99
26,04
46
2
58
24,04
97
83
2
30
33,14
16
62
0
73
22
19,12
25,02
0
43
29
27
79
0,9688
88
40
26
21
0,9578
55
44
39
95
6
20,03
57
39
40
6
68
59
51
35,11
4
18
75
53
59
4
81
73
62
26
2
33
93
68
77
2
94
88
74
43
0
47
25,11
82
96
0
28,06
34,03
86
59
0,9678
62
28
95
26,15
0,9568
19
17
97
75
6
77
46
20,09
34
6
31
31
27,08
90
4
92
64
24
53
4
43
45
19
36,06
2
21,07
81
37
72
2
56
60
31
22
0
21
99
51
91
0
68
74
42
37
0,9668
36
26,16
65
27,09
0,9558
80
88
53
53
6
50
34
79
28
6
93
35,02
64
68
содержание .. 55 56 57 58 ..