ГОСУДАРСТВЕННАЯ ФАРМАКОПЕЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ. Том III Контроль качества фармацевтических субстанций (2009 год) - часть 30

620

В.

 Просматривают хроматограммы, полу-

ченные в разделе «Количественное определе-
ние». Основной пик на хроматограмме испыту-
емого раствора по времени удерживания соот-
ветствует основному пику на хроматограмме 
раствора сравнения (а).

С.

 Тонкослойная хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор

. 50 мг испытуемо-

го образца растворяют в смеси из 

раствора ам-

миака концентрированного Р 

и

 метанола Р

 

(2:9,

 об/об

)

 

и доводят до объема 100 мл этой же 

смесью растворителей.

Раствор сравнения

. 50 мг 

ФСО фолиевой 

кислоты

 растворяют в смеси из 

раствора ам-

миака концентрированного Р 

и

 метанола Р

 

(2:9,

 об/об

)

 

и доводят до объема 100 мл этой же 

смесью растворителей.

Пластинка

: 

ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля G Р

.

Подвижная фаза

:

 раствор аммиака концен-

трированный Р — пропанол Р — 96 % спирт Р 

(20:20:60,

 об/об/об

).

Наносимый объем пробы

: 2 мкл.

Фронт подвижной фазы

: не менее 3/4 

высоты пластинки.

Высушивание

: на воздухе.

Проявление

: пластинку просматривают 

в ультрафиолетовом свете при длине волны 
365 нм.

Результаты

: на хроматограмме испытуе-

мого раствора обнаруживается пятно, соответ-
ствующее по расположению, флуоресценции 
и размеру основному пятну на хроматограмме 
раствора сравнения.

ИСПЫТАНИЯ

Сопутствующие примеси

. Жидкостная 

хроматография (

2.2.29

).

Испытуемый раствор

. 0,100 г испытуемо-

го образца растворяют в 5 мл раствора 28,6 г/л 

натрия карбоната Р

 и доводят подвижной фазой 

до объема 100,0 мл. 2,0 мл полученного раствора 
доводят подвижной фазой до объема 10,0 мл.

Раствор сравнения (а)

. 0,100 г 

ФСО фо-

лиевой кислоты 

растворяют в 5 мл раствора 

28,6 г/л 

натрия карбоната Р

 и доводят по-

движной фазой до объема 100,0 мл. 2,0 мл по-
лученного раствора доводят подвижной фазой 
до объема 10,0 мл.

Раствор сравнения (b)

. К 20 мг 

птероевой 

кислоты Р

 прибавляют 5 мл раствора 28,6 г/л 

натрия карбоната Р

, доводят подвижной фазой 

до объема 100,0 мл и перемешивают до полного 
растворения. 1,0 мл полученного раствора сме-
шивают с 1,0 мл раствора сравнения (а) и дово-
дят подвижной фазой до объема 100,0 мл.

Раствор сравнения (с)

. 2,0 мл испытуемого 

раствора доводят подвижной фазой до объема 
20,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят 
подвижной фазой до объема 20,0 мл.

Раствор сравнения (d)

. 10,0 мг 

N-(4-

аминобензоил)-L-глутаминовой кислоты Р

 

р

астворяют в 1 мл раствора 28,6 г/л 

натрия 

карбоната Р

 и доводят подвижной фазой до 

объема 100,0 мл. 1,0 мл полученного раствора 
доводят подвижной фазой до объема 100,0 мл.

Раствор сравнения (e).

 К 12,0 мг 

птероевой 

кислоты Р

 прибавляют 1 мл раствора 28,6 г/л 

натрия карбоната Р

, доводят подвижной фазой 

до объема 100,0 мл и перемешивают до полного 
растворения. 1,0 мл полученного раствора дово-
дят подвижной фазой до объема 100,0 мл.

Условия хроматографирования:

 

–

колонка

 длиной 0,25 м и внутренним диа-

метром 4,0 мм, заполненная сферическим 

сили-

кагелем октилсилильным для хроматографии

 

Р

 (размер частиц 5 мкм) с удельной площадью 

поверхности 350 м

2

/г, размером пор 10 нм и со-

держащим около 12,5 % углерода;

 

–

подвижная фаза

: 12 объемов 

метанола 

Р

 смешивают с 88 объемами раствора, содер-

жащего 11,16 г/л 

калия дигидрофосфата Р 

и 

5,50 г/л 

дикалия гидрофосфата Р

;

 

–

скорость подвижной фазы

: 0,6 мл/мин;

 

–

спектрофотометрический детектор

, 

длина волны 280 нм;

 

–

объем вводимой пробы

: по 5 мкл испыту-

емого раствора и растворов сравнения (b), (c), 
(d) и (е);

 

–

время хроматографирования

: 3-кратное 

время удерживания фолиевой кислоты.

Относительное удерживание

 (по отноше-

нию к фолиевой кислоте; время удерживания — 
около 8,5 мин): примесь А — около 0,5; примесь 
В — около 0,6; примесь С — около 0,9; примесь 
Е — около 1,27; примесь D — около 1,33; при-
месь F — около 2,2.

Пригодность хроматографической систе-

мы

: раствор сравнения (b):

 

–

разрешение

: не менее 4,0 между пиками 

фолиевой кислоты и примеси D.

Предельное содержание примесей

:

 

–

примесь А 

(не более 0,5 %): на хромато-

грамме испытуемого раствора площадь пика, 
соответствующего примеси А, не должна превы-
шать площадь основного пика на хроматограм-
ме раствора сравнения (d);

 

–

примесь D 

(не более 0,6 %): на хромато-

грамме испытуемого раствора площадь пика, 
соответствующего примеси D, не должна превы-
шать площадь основного пика на хроматограм-
ме раствора сравнения (е);

 

–

любая другая примесь

 (не более 0,5 %): 

на хроматограмме испытуемого раствора пло-
щадь любого пика, кроме основного и пиков 
примесей А и D, не должна превышать пло-
щадь основного пика на хроматограмме раст-
вора сравнения (с);

 

–

сумма

 

других примесей

 (не более 1,0 %): 

на хроматограмме испытуемого раствора сумма 
площадей всех пиков, кроме основного и пиков 
примесей А и D, не должна превышать 2-крат-
ную площадь основного пика на хроматограмме 
раствора сравнения (с).

621

Формальдегида 35 % раствор

На хроматограмме испытуемого раствора 

не учитывают пики с площадью менее 0,1 пло-
щади основного пика на хроматограмме раст-
вора сравнения (с) (0,05 %).

Вода

  (

2.5.12

). Не менее 5,0 % и не более 

8,5 %. Определение проводят из 0,150 г испыту-
емого образца.

Сульфатная зола

  (

2.4.14, метод А

). Не 

более 0,2 %. Определение проводят из 1,0 г ис-
пытуемого образца.

#

 

Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

#

 

Микробиологическая чистота 

(

2.6.12, 

2.6.13,

 

5.1.4

). Фолиевая кислота в условиях испы-

тания не обладает антимикробным действием.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Жидкостная хроматография (

2.2.29

), как ука-

зано в испытании «Сопутствующие примеси», со 
следующими изменениями.

Объем вводимой пробы

: по 5 мкл испытуе-

мого раствора и раствора сравнения (а).

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

ПРИМЕСИ

Специфицированные примеси

: 

А

, 

В

, 

С

, 

D

, 

E

, 

F

.

H

2

N

N

H

CO

2

H

O

H

CO

2

H

А. (2

S

)-2-[(4-Аминобензоил)амино]пентандио-

новая кислота (

N

-[(4-аминобензоил)-L-глутами-

новая кислота).

N

N

H

H

2

N

O

NH

2

NH

2

В. 2,5,6-Триаминопиридин-4(1

Н

)-он.

N

N

N

N

H

H

N

H

N

O

H

2

N

O

CO

2

H

CO

2

H

H

С. (2

S

)-2-[[4-[[(2-Амино-4-оксо-1,4-дигидро-

птеридин-7-ил)метил]амино]бензоил]амино]глу-
таровая кислота (изофолиевая кислота).

N

N

H

N

N

O

H

2

N

N

H

CO

2

H

D. 4-[[(2-Амино-4-оксо-1,4-дигидроптеридин-

6-ил)метил]амино]бензойная кислота (птерое-
вая кислота).

N

N

H

N

N

O

H

2

N

N

N

N

N

NH

O

NH

2

N

H

O

H

CO

2

H

CO

2

H

Е. (2

S

)-2-[[4-[Бис[(2-амино-4-оксо-1,4-дигидро-

птеридин-6-ил)метил]амино]бензоил]амино]глу-
таровая кислота.

N

N

H

N

N

O

H

2

N

Cl

F. 2-Амино-7-(хлорометил)птеридин-4(1

Н

)-он.

 ФОРМАЛЬДЕГИДА 35 % РАСТВОР 

Formaldehydi solutio (35 per centum)

FORMALDEHYDE SOLUTION (35 PER CENT)

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Формальдегида 35 % раствор содержит не 

менее 34,5 % (

м/м

) и не более 38,0 % (

м/м

) фор-

мальдегида (СН

2

О; 

М.м.

 30,03). Содержит мета-

нол в качестве стабилизатора.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Прозрачная бесцветная жидкость.
Смешивается с водой и с 96 % спиртом. 
При хранении может мутнеть.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А.

 1 мл раствора S, приготовленного как ука-

зано в разделе «Испытания», доводят 

водой Р

 до 

объема 10 мл. К 0,05 мл полученного раствора 
прибавляют 1 мл раствора 15 г/л 

хромотропо-

вой кислоты натриевой соли Р

, 2 мл 

воды Р

 и 

8 мл 

кислоты серной Р

. В течение 5 мин появля-

ется фиолетово-синее или фиолетово-красное 
окрашивание.

В.

 К 0,1 мл раствора S прибавляют 10 мл 

воды Р

, 2 мл приготовленного непосредственно 

перед использованием раствора 10 г/л 

фенилги-

дразина гидрохлорида Р

, 1 мл 

раствора калия 

феррицианида Р

 и 5 мл 

кислоты хлористово-

дородной Р

. Появляется интенсивное красное 

окрашивание.

С.

 0,5 мл испытуемого образца смешива-

ют в пробирке с 2 мл 

воды Р

 и 2 мл 

раствора 

серебра нитрата Р2

. К полученному раствору 

прибавляют 

раствор аммиака разведенный Р2 

до слабощелочной реакции и нагревают на во-
дяной бане. Образуется серый осадок или сере-
бряное зеркало.

622

D.

 Испытуемый образец выдерживает тре-

бования раздела «Количественное определе-
ние» по количественному содержанию СН

2

О.

ИСПЫТАНИЯ

Раствор S

. 10 мл испытуемого образца при 

необходимости фильтруют и доводят 

водой, сво-

бодной от углерода диоксида, Р

 до объема 

50 мл.

Цветность 

(

2.2.2, метод II

). Раствор S 

должен быть бесцветным.

Кислотность

. К 10 мл раствора S прибав-

ляют 1 мл 

раствора фенолфталеина Р

. При 

прибавлении не более 0,4 мл 

0,1 М раствора 

натрия гидроксида

 должно появиться красное 

окрашивание.

Метанол

. Не менее 9,0 % (

об/об

) и не более 

15,0 %  (

об/об

). Газовая хроматография (

2.2.28

).

Раствор внутреннего стандарта.

 10 мл 

этанола Р1

 доводят 

водой Р

 до объема 100 мл.

Испытуемый раствор.

 К 10,0 мл испытуе-

мого образца прибавляют 10,0 мл раствора вну-
треннего стандарта и доводят 

водой Р

 до объема 

100,0 мл.

Раствор сравнения

. К 1,0 мл 

метанола Р

 

прибавляют 10,0 мл раствора внутреннего стан-
дарта и доводят 

водой Р

 до объема 100,0 мл.

Условия хроматографирования:

 

–

колонка

 стеклянная длинной 1,5—2,0 м 

и диаметром 2—4 мм, заполненная 

сополиме-

ром этилвинилбензол-дивинилбензола Р

 (150—

180 мкм);

 

–

газ-носитель

: 

азот для хроматографии Р

;

 

–

скорость газа-носителя

: 30—40 мл/мин;

 

–

температура

: колонка — 120°С, блок 

ввода проб — 150°С, детектор — 150°С;

 

–

детектор

: пламенно-ионизационный;

 

–

объем вводимой пробы

: 1 мкл.

Пригодность хроматографической систе-

мы

: раствор сравнения:

 

–

разрешение

: не менее 2,0 между пиками 

метанола и этанола.

Сульфатная зола 

(

2.4.14, метод А

). Не 

более 0,1 %. Определение проводят из 1,0 г ис-
пытуемого образца.

# Остаточные количества органических 

растворителей.

 Испытуемый образец должен 

выдерживать требования статьи (

5.4

).

#

 

Микробиологическая чистота 

(

2.6.12, 

2.6.13,

 

5.1.4

). Формальдегида 35 

% раствор в 

условиях испытания обладает антимикробным 
действием. Посев на питательные среды № 1 и 
№ 3 проводят из разведения 1:100, на питатель-
ную среду № 2 — из разведения 1:50, на пита-
тельную среду № 8 — из разведения 1:20.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1,000 г испытуемого раствора помещают в 

мерную колбу вместимостью 100 мл, содержа-
щую 2,5 мл 

воды Р

 и 1 мл 

раствора натрия ги-

дроксида разведенного Р

, встряхивают и дово-

дят 

водой Р

 до объема 100,0 мл. К 10,0 мл по-

лученного раствора прибавляют 30,0 мл 

0,05 М 

раствора йода

, перемешивают и прибавляют 

10 мл 

раствора натрия гидроксида разведен-

ного Р

. Выдерживают в течение 15 мин, при-

бавляют 25 мл 

кислоты серной разведенной Р

, 

2 мл 

раствора крахмала Р

 и титруют 

0,1 М рас-

твором натрия тиосульфата

.

1 мл 

0,05 М раствора йода

 соответствует 

1,501 мг СН

2

О.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте при темпера-

туре от 15°С до 25°С.

 ФРАМИЦЕТИНА СУЛЬФАТ

Framycetini sulfas

FRAMYCETIN SULPHATE

O

O

O

O

NH

2

OH NH

2

O

HO

O

NH

2

OH

H

2

N

HO

NH

2

NH

2

HO

HO

HO

x

 H

2

SO

4

C

23

H

46

N

6

O

13

 · 

х

Н

2

SO

4

 

М.м. 615 (основание)

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Фрамицетина сульфат представляет собой 

2-дезокси-4-

О

-(2,6-диамино-2,6-дидезокси-α-D-

глюкопиранозил)-5-

О-

[3-

О

-(2,6-диамино-2,6-диде-

зокси-β-L-идопиранозил)-β-D-рибофуранозил]-
D-стрептамина сульфат (неомицин В). 

Субстанция продуцируется определенными 

штаммами 

Streptomyces fradiae

 или 

Streptomy-

ces decaris

 или получают другими способами.

Содержание

: не менее 630 МЕ/мг в пересче-

те на сухое вещество.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Белый или желтовато-белый порошок. Ги-

гроскопичен. 

Легкорастворим в воде, очень мало раство-

рим в 96 % спирте, практически нерастворим в 
ацетоне. 

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А. 

Просматривают хроматограммы, полу-

ченные в испытании «Сопутствующие примеси» 
или «# Примесь С».

Результаты

: 

 

– основной пик на хроматограмме испыту-

емого раствора по времени удерживания со-
ответствует основному пику на хроматограм-
ме раствора сравнения (а); # на хроматограм-
ме испытуемого раствора обнаруживается 
основное пятно, соответствующее основно-

623

Фрамицетина сульфат

му пятну на хроматограмме раствора сравне-
ния (а);

 

– выдерживает испытание на содержание 

примеси С.

В. 

Испытуемый образец дает реакцию (а) 

на сульфаты (

2.3.1

).

ИСПЫТАНИЯ 

рН

 (

2.3.3

). От 6,0 до 7,0. 0,1 г испытуемо-

го образца растворяют в 

воде, свободной от 

углерода диоксида, Р

 и доводят до объема 

10 мл этим же растворителем.

Удельное оптическое вращение

  (

2.2.7

). 

От +52,5 до +55,5 в пересчете на сухое веще-
ство. 1,00 г испытуемого образца растворяют 
в 

воде Р

 и доводят до объема 10,0 мл этим же 

растворителем.

Сопутствующие примеси

. Жидкостная 

хроматография

 

(

2.2.29

).

Испытуемый раствор. 

25,0 мг испытуемого 

образца растворяют в подвижной фазе и дово-
дят до объема 50,0 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (а). 

Содержимое кон-

тейнера с 

ФСО фрамицетина сульфатом

 

растворяют в подвижной фазе и доводят этим 
же растворителем до получения раствора с 
концентрацией 0,5 мг/мл.

Раствор сравнения (b). 

3,0 мл раствора 

сравнения (a) доводят подвижной фазой до 
объема 100,0 мл. 

Раствор сравнения (с). 

1,0 мл раствора 

сравнения (a) доводят подвижной фазой до 
объема 100,0 мл. 

Раствор сравнения (d). 

Содержимое кон-

тейнера 

ФСО неамина 

(соответствует 0,5 мг) 

растворяют в подвижной фазе и доводят до 
объема 100,0 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (е). 

10 мг 

ФСО нео-

мицина сульфата

 растворяют в подвижной 

фазе и доводят до объема 100,0 мл этим же 
растворителем.

Условия хроматографирвоания:

 

–

колонка

 длиной 0,25 м и внутренним ди-

аметром 4,6 мм, заполненная 

силикагелем 

октадецилсилильным, деактивированным 
по отношению к основаниям, для хромато-
графии Р 

с размером частиц 5 мкм;

 

–

температура

: 25°С;

 

–

подвижная фаза

: смешивают 20,0 мл 

кислоты трифторуксусной Р

, 6,0 мл 

раст-

вора натрия гидроксида, свободного от кар-
бонатов, Р 

и 500 мл 

воды Р

, выдерживают до 

установления равновесия, доводят 

водой Р

 

до объема 1000 мл и дегазируют;

 

–

скорость подвижной фазы

: 0,7 мл/мин;

 

–

постколоночный раствор

: 

раствор 

натрия гидроксида, свободного от карбо-
натов Р

, предварительно дегазированный и 

разведенный в 25 раз, который подают безым-
пульсным потоком в колоночный элюент с ис-
пользованием полимерного смешивающего 
змеевика объемом 375 мкл;

 

–

скорость постколоночного раствора

: 

0,5 мл/мин;

 

–

амперометрический детектор

, рабо-

тающий в импульсном режиме, с золотым 
рабочим электродом, хлорсеребряным элек-
тродом сравнения и вспомогательным элек-
тродом из нержавеющей стали, с потенци-
алами детектирования 0,00 В, окисления 
+0,80 В и восстановления -0,60 В соответ-
ственно, с импульсной продолжительностью 
в соответствии с используемым оборудова-
нием;

 

–

объем вводимой пробы

: 10 мкл;

 

–

время хроматографирования

: 1,5-крат-

ное время удерживания неомицина В.

Относительное удерживание

 (по от-

ношению к неомицину В; время удержива-
ния — около 10 мин): примесь А — около 
0,65; примесь С — около 0,9; примесь G — 
около 1,1.

Пригодность хроматографической сис-

темы

:

 

–

разрешение

: не менее 2,0 между 

пиками примеси С и неомицина В на хрома-
тограмме раствора сравнения (е); при необ-
ходимости изменяют содержание раствора 
натрия гидроксида, свободного от карбона-
тов, в подвижной фазе;

 

–

отношение сигнал/шум

: не менее 10 

для основного пика на хроматограмме раст-
вора сравнения (с).

Предельное содержание примесей

:

— 

примесь А

 (не более 1,0 %): на хро-

матограмме испытуемого раствора пло-
щадь пика, соответствующего примеси А, не 
должна превышать площадь основного пика 
на хроматограмме раствора сравнения (d) 
(при расчете учитывают содержание неами-
на в 

ФСО неамина

);

 

–

примесь С

 (не более 3,0 %): на хро-

матограмме испытуемого раствора пло-
щадь пика, соответствующего примеси С, не 
должна превышать площадь основного пика 
на хроматограмме раствора сравнения (b);

 

–

сумма других примесей

 (не более 

3,0 %): на хроматограмме испытуемого раст-
вора сумма площадей всех пиков, кроме 
основного и пиков примеси А и С, не должна 
превышать площадь основного пика на хро-
матограмме раствора сравнения (b).

На хроматограмме испытуемого раст-

вора не учитывают пики с площадью менее 
площади основного пика на хроматограмме 
раствора сравнения (с) (1,0 %).

# Испытания «Примесь А» и «Примесь 

С» используются в качестве альтернатив-
ных испытанию «Сопутствующие примеси».

# Примесь А

. Не более 1 %. Тонкослой-

ная хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор. 

0,250 г испытуе-

мого образца растворяют в 

воде Р

 и доводят 

до объема 10,0 мл этим же растворителем.

624

Раствор сравнения (а). 

0,5 мг 

ФСО неа-

мина

 растворяют в 2,0 мл 

воды Р

. 

Раствор сравнения (b). 

0,5 мл испытуе-

мого раствора смешивают с 0,5 мл раствора 
сравнения (а). 

Пластинка

: 

ТСХ пластинка со слоем си-

ликагеля Н Р.

Подвижная фаза

: м

етиленхлорид Р — 

раствор аммиака концентрированный Р — 
метанол Р 

(10:20:30, 

об/об/об

).

Наносимый объем пробы

: 5 мкл.

Фронт подвижной фазы

: не менее 8 см 

от линии старта.

Высушивание

: при температуре от 100°С 

до 105°С в течение 10 мин.

Проявление

: пластинку опрыскивают 

ре-

активом нингидрина и олова (II) хлорида Р

 

и нагревают при температуре 110°С в тече-
ние15 мин. Пластинку снова опрыскивают 

ре-

активом нингидрина и олова (II) хлорида Р

 и 

нагревают при температуре 110°С в течение 
15 мин.

Пригодность хроматографической сис-

темы

: раствор сравнения (b):

 

– на хроматограмме обнаруживаются два 

полностью разделенных основных пятна.

Результаты: 

на хроматограмме испыту-

емого раствора любое пятно, соответствую-
щее неамину, должно быть не интенсивнее 
пятна на хроматограмме раствора сравне-
ния (а).

# Примесь С

. Не более 3 %. Тонкослой-

ная хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор. 

40 мг испытуемо-

го образца растворяют в 

воде Р

 и доводят до 

объема 5,0 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (а). 

40 мг 

ФСО фра-

мицетина сульфата

 растворяют в 

воде Р 

и 

доводят до объема 5,0 мл этим же раствори-
телем.

Раствор сравнения (b). 

30 мг 

ФСО фра-

мицетина сульфата

 растворяют в 

воде Р

 и 

доводят до объема 25,0 мл этим же раство-
рителем. 5,0 мл полученного раствора дово-
дят 

водой Р

 до объема 25,0 мл. 

Раствор сравнения (с)

. 40 мг 

ФСО не-

омицина сульфата

 растворяют в 

воде Р

 и 

доводят до объема 5,0 мл этим же раство-
рителем. 

Пластинка

:

 

ТСХ пластинка со слоем под-

ходящего силикагеля.

Подвижная фаза

: 

метанол Р — 

раствор 

200 г/л

 натрия хлорида Р 

(20:80, 

об/об

).

Наносимый объем пробы

: по 5 мкл в виде 

полос.

Фронт подвижной фазы

: не менее 12 см 

от линии старта.

Высушивание

: при температуре от 100°С 

до 105°С в течение 10 мин.

Проявление

: пластинку опрыскивают 

рас-

твором нингидрина Р1

 и сушат при темпера-

туре от 100°С до 105°С в течение10 мин.

Пригодность хроматографической сис-

темы

: раствор сравнения (с):

 

– на хроматограмме обнаруживается 

пятно со значением 

R

f

, меньшим чем значе-

ние 

R

f

 основного пятна.

Результаты

: на хроматограмме испы-

туемого раствора пятно, соответствующее 
неомицину С (значение 

R

f

 меньшее, чем зна-

чение 

R

f

 основного пятна), должно быть не 

интенсивнее пятна на хроматограмме раст-
вора сравнения (b) (3 %). 

Сульфаты

. Не менее 27,0 % и не более 

31,0 

% в пересчете на сухое вещество. 

0,250 г испытуемого образца растворяют в 
100 мл 

воды Р

 и доводят до рН 11

 раствором 

аммиака концентрированным Р.

 Прибавля-

ют 10,0 мл 

0,1 М раствора бария хлорида

, 

около 0,5 мг 

фталеинового пурпурного Р

 и 

титруют 

0,1 М раствором натрия эдетата

; 

в момент изменения окраски раствора при-
бавляют 50 мл 

96 % спирта Р

 и продолжа-

ют титрование до исчезновения фиолетово-
синего окрашивания.

1 мл 

0,1 М раствора бария хлорида

 со-

ответствует 9,606 мг SO

4

.

Потеря в массе при высушивании

 

(

2.2.32

). Не более 8,0 %. 1,000 г испытуемо-

го образца сушат над 

фосфора (V) оксидом 

Р

 при температуре 60°С и давлении, не пре-

вышающем 0,7 кПа, в течение 3 ч.

Сульфатная зола

 (

2.4.14, метод А

). Не 

более 1,0 %. Определение проводят из 1,0 г 
испытуемого образца.

Стерильность 

(

2.6.1

). Если субстан-

ция предназначена для производства ле-
карственных средств для внутриполостно-
го введения без дополнительной процедуры 
стерилизации, то она должна выдерживать 
испытание на стерильность.

Бактериальные эндотоксины 

(

2.6.14, 

метод D

). Менее 1,3 МЕ/мг, если субстан-

ция предназначена для производства ле-
карственных средств для внутриполостно-
го введения без дополнительной процедуры 
удаления бактериальных эндотоксинов.

# Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

#

 

Микробиологическая чистота

 

(

2.6.12, 

2.6.13, 5.1.4

). Фрамицетина сульфат в усло-

виях испытания обладает антимикробным 
действием. Посев на питательную среду №  2 
проводят из разведения 1:10. Посев на пи-
тательные среды № 1, № 8 и № 11 проводят 
для исключения возможности присутствия 
устойчивых к фрамицетина сульфату штам-
мов микроорганизмов из разведения 1:50.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Микробиологический метод (

2.7.2

). В ка-

честве стандартного образца используют 

ФСО фрамицетина сульфата

.

625

# Фуразолидон

ХРАНЕНИЕ

В воздухонепроницаемом контейнере в 

защищенном от света месте. 

Если субстанция предназначена для про-

изводства лекарственных средств для вну-
триполостного введения — в стерильном кон-
тейнере с контролем первого вскрытия.

МАРКИРОВКА

При необходимости указывают:

 

– субстанция стерильна;

 

– субстанция не содержит бактериальных 

эндотоксинов.

ПРИМЕСИ

O

O

NH

2

OH

HO

NH

2

HN

HO

HO

R1

R2

A. R1 = H, R2 = NH

2

: 2-Дезокси-4-

O

-(2,6-

диамино-2,6-дидезокси-α-D-глюкопиранозил)-D-
стрептамин (неамин или неомицин 

A-LP

).

B. R1 = CO-CH

3

, R2 = NH

2

: 3-

N

-Ацетил-2-

дезокси-4-

O

-(2,6-диамино-2,6-дидезокси-α-D-

глюкопиранозил)-D-стрептамин (3-ацетилнеамин).

D. R1 = H, R2 = OH: 4-

O

-(2-Амино-2-дезокси-

α-D-глюкопиранозил)-2-дезокси-D-стрептамин 
(паромамин или неомицин D).

O

O

O

O

NH

2

OH

O

HO

O

NH

2

OH

HO

NH

2

HN

HO

HO

HO

R3

R4

R1

R2

C. R1 = CH

2

-NH

2

, R2 = R3 =H, R4 = NH

2

: 

2-Дезокси-4-

O

-(2,6-диамино-2,6-дидезокси-

α-D-глюкопиранозил)-5-

O

-[3-

O

-(2,6-диамино-

2 , 6 - д и д езо к с и - α - D - гл ю к о п и р а н оз и л ) - β - D -
рибофуранозил]-D-стрептамин (неомицин C).

E. R1 = R3 = H, R2 = CH

2

-NH

2

, R4 = OH: 

4-

O

-(2-Амино-2-дезокси-α-D-глюкопиранозил)-

2-дезокси-5-

O

-[3-

O

-(2,6-диамино-2,6-дидезокси-

β-L-идопиранозил)-β-D-рибофуранозил]-D-
стрептамин (паромомицин I или неомицин E).

F. R1 = CH

2

-NH

2

, R2 = R3 = H, R4 = OH: 

4-

O

-(2-Амино-2-дезокси-α-D-глюкопиранозил)-

2-дезокси-5-

O

-[3-

O

-(2,6-диамино-2,6-дидезокси-

α-D-глюкопиранозил)-β-D-рибофуранозил]-D-
стрептамин (паромомицин II или неомицин F).

G. R1 = H, R2 = CH

2

-NH

2

, R3 = CO-CH

3

, R4 = NH

2

: 

3-

N

-Ацетил-2-дезокси-4-

O

-(2,6-диамино-2,6-

дидезокси-α-D-глюкопиранозил)-5-

O

-[3-

O

-(2,6-

диамино-2,6-дидезокси-β-L-идопиранозил)-β-D-
рибофуранозил]-D-стрептамин (неомицин 

B-LP

).

 # ФУРАЗОЛИДОН

Furazolidonum

FURAZOLIDONE

O

O

2

N

N

N

O

O

C

8

H

7

N

3

O

5

 М.м. 

225,2

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Фуразолидон содержит не менее 97,0 % и 

не более 103,0 % 3-(5-нитрофурфурилиденами-
но)оксазолидин-2-она в пересчете на сухое ве-
щество.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Желтый кристаллический порошок.
Очень мало растворим в воде и в 96 

% 

спирте, малорастворим в хлороформе, практи-
чески нерастворим в эфире.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А.

 Абсорбционная спектрофотометрия в ин-

фракрасной области (

2.2.24

).

Приготовление

: в дисках.

Сравнение

: 

ФСО фуразолидона

 или спектр, 

представленный на рисунке 1.

В.

 1 мг испытуемого образца растворяют 

в 1 мл 

диметилформамида Р 

и прибавляют 

0,05 мл 

1 М раствора калия гидроксида спир-

тового раствора

. Появляется темно-голубое 

окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ

Температура плавления

 (

2.2.14

). От 257°С 

до 259°С.

рН

 (

2.2.3

). От 4,5 до 7,0. 1 г испытуемого об-

разца встряхивают с 100 мл 

воды, свободной от 

углерода диоксида

 

Р

, в течение 15 мин и филь-

труют. 

Нитрофурфураля диацетат

. Не более 

1,0 %. Тонкослойная хроматография (

2.2.27

).

Испытание проводят с защитой от яркого 

света.

Испытуемый раствор

. 50 мг испытуемого 

образца растворяют в 5 мл 

диметилформами-

да Р

 при нагревании на водяной бане в течение 

нескольких минут, охлаждают и доводят 

ацето-

ном Р

 до объема 10 мл.

Раствор сравнения

. 5,0 мг 

ФСО нитро-

фурфураля диацетата 

растворяют в смеси из 

равных объемов 

диметилформамида Р

 и 

аце-

тона

 

Р

 и доводят до объема 50,0 мл этим же 

растворителем.

Пластинка

: ТСХ пластинка со слоем 

сили-

кагеля G Р

.

626

Подвижная фаза

: 

толуол Р

 — 

диоксан

 

Р

 

(95:5, 

об/об

).

Наносимый объем пробы

: 20 мкл испытуе-

мого раствора и 10 мкл раствора сравнения.

Фронт подвижной фазы

: не менее 3/4 

высоты пластинки.

Высушивание

: при температуре 105°С в те-

чение 5 мин.

Проявление

: горячую пластинку опрыскива-

ют 

раствором фенилгидразина гидрохлорида Р.

Результаты

: на хроматограмме испытуе-

мого раствора пятно, соответствующее нитро-
фураля диацетату, должно быть не интенсив-
нее соответствующего пятна на хроматограмме 
раствора сравнения.

Потеря в массе при высушивании

 

(

2.2.32

). Не более 0,5 %. 1,000 г испытуемого об-

разца сушат при температуре 105°С. 

Сульфатная зола

  (

2.4.14, метод А

). Не 

более 0,1 %. Определение проводят из 1,0 г ис-
пытуемого образца.

Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

Микробиологическая чистота

 

(

2.6.12

,

 

2.6.13

,

 5.1.4

). Фуразолидон в условиях испыта-

ний обладает антимикробным действием. Для 
устранения антимикробного действия посев 
на питательные среды проводят методом мем-
бранной фильтрации.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Испытание проводят с защитой от 

света.

К 80 мг испытуемого образца прибавляют 

150 мл 

диметилформамида Р

, перемешивают 

до полного растворения и доводят 

водой Р

 до 

объема 500,0 мл. 5,0 мл полученного раствора 
доводят 

водой Р

 до объема 100,0 мл. Измеря-

ют оптическую плотность (

2.2.25

) полученного 

раствора в максимуме при 367 нм. 

Содержание C

8

H

7

N

3

O

5

 рассчитывают с 

учетом удельного показателя поглощения, рав-
ного 750.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

 ФУРОСЕМИД

Furosemidum

FUROSEMIDE

S

H

2

N

CO

2

H

Cl

N

H

O

O

O

C

12

H

11

ClN

2

O

5

S 

 М.м. 330,7

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Фуросемид содержит не менее 98,5 % и не 

более 101,0 

% 4-хлор-2-[(фуран-2-илметил)-

Рисунок 1. 

Инфракрасный спектр пропускания ФСО фуразолидона в дисках с калия бромидом Р.

 15

 20

 25

 30

 35

 40

 45

 50

 55

 60

 65

 70

 75

 80

 85

 90

 95

 100

Пропускание

 500   

 1000  

 1500  

 2000  

 3000  

Волновое  число  (см

-1

)

627

Фуросемид

амино]-5-сульфамоилбензойной кислоты в пе-
ресчете на сухое вещество.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)
Белый или почти белый кристаллический по-

рошок.

Практически нерастворим в воде, раство-

рим в ацетоне, умеренно растворим в 96 

% 

спирте, практически нерастворим в метиленхло-
риде. Растворяется в разведенных растворах ги-
дроксидов щелочных металлов.

Температура плавления: около 210°С с раз-

ложением.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Первая идентификация: В.
Вторая идентификация: А, С.

А.

 Абсорбционная спектрофотометрия в 

ультрафиолетовой и видимой областях (

2.2.25

).

Испытуемый раствор

. 50 мг испытуемого 

образца растворяют в растворе 4 г/л 

натрия ги-

дроксида Р

 и доводят до объема 100 мл этим же 

растворителем. 1 мл полученного раствора до-
водят раствором 4 г/л 

натрия гидроксида Р

 до 

объема 100 мл.

Диапазон длин волн

: от 220 нм до 350 нм.

Максимум поглощения

: при 228 нм, при 

270 нм и при 333 нм.

Отношение оптических плотностей

: 

А

270

/А

228

 — от 0,52 до 0,57.

В. 

Абсорбционная спектрофотометрия в ин-

фракрасной области (

2.2.24

).

Сравнение

:

 ФСО фуросемида 

# или спектр, 

представленный на рисунке 1.

С.

 25 мг испытуемого образца растворяют в 

10 мл 

96 % спирта Р

. К 5 мл полученного раст-

вора прибавляют 10 мл 

воды Р

. К 0,2 мл по-

лученного раствора прибавляют 10 мл 

кисло-

ты хлористоводородной разведенной Р

 и на-

гревают с обратным холодильником в течение 
15 мин. Охлаждают, прибавляют 18 мл 

1 М раст-

вора натрия гидроксида

 и 1 мл раствора 5 г/л 

натрия нитрита Р

. Выдерживают в течение 

3 мин, прибавляют 2 мл раствора 25 г/л 

кисло-

ты сульфаминовой Р

, перемешивают и при-

бавляют 1 мл раствора 5 г/л 

нафтилэти-

лендиамина дигидрохлорида Р

. Появляется 

фиолетово-красное окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ

Сопутствующие примеси

. Жидкостная 

хроматография (

2.2.29

). 

Растворы готовят не-

посредственно перед использованием, испы-
тание проводят с защитой от света

.

Испытуемый раствор

. 50,0 мг испытуемого 

образца растворяют в

 

подвижной фазе и дово-

дят до объема 50,0 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (а).

 2,0 мг 

ФСО фуросе-

мида примеси А

 растворяют в подвижной фазе и 

доводят до объема 2,0 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (b). 

1,0 мл испытуемого 

раствора и 1,0 мл раствора сравнения (а) дово-
дят подвижной фазой до объема 20,0 мл. 1,0 мл 
полученного раствора доводят подвижной фазой 
до объема 20,0 мл.

Условия хроматографирования:

 

–

колонка

 длиной 0,25 м и внутренним ди-

аметром 4,6 мм, заполненная 

силикагелем 

Рисунок 1.

 Инфракрасный спектр пропускания ФСО фуросемида.

 40

 45

 50

 55

 60

 65

 70

 75

 80

 85

 90

 95

Пропускание

 1000 

 1500 

 2000 

 2000 

 3000 

Волновое  число  (см

-1

)

628

октилсилильным для хроматографии Р

 с раз-

мером частиц 5 мкм;

 

–

подвижная фаза

: 0,2 г 

калия дигидрофос-

фата Р

 и 0,25 г 

цетримида Р

 растворяют в 

70 мл 

воды Р

, доводят до рН 7,0 

раствором ам-

миака Р

 и прибавляют 30 мл 

пропанола Р

;

 

–

скорость подвижной фазы

: 1 мл/мин;

 

–

спектрофотометрический детектор

, 

длина волны 238 нм;

 

–

объем вводимой пробы

: по 20 мкл испыту-

емого раствора и раствора сравнения (b);

 

–

время хроматографирования

: 3-кратное 

время удерживания фуросемида.

Пригодность хроматографической систе-

мы

: раствор сравнения (а):

 

–

разрешение

: не менее 4 между пиками 

примеси А (первый пик) и фуросемида (второй 
пик).

Предельное содержание примесей

:

 

–

примеси А, В, С, D, Е

 (не более 0,25 %): на 

хроматограмме испытуемого раствора площадь 
любого пика, кроме основного, не должна пре-
вышать площадь пика примеси А на хромато-
грамме раствора сравнения (b);

 

–

сумма примесей

 (не более 0,5 %): на хро-

матограмме испытуемого раствора сумма пло-
щадей всех пиков, кроме основного, не должна 
превышать 2-кратную площадь пика примеси А 
на хроматограмме раствора сравнения (b).

На хроматограмме испытуемого раствора 

не учитывают пики с площадью менее 0,1 пло-
щади пика примеси А на хроматограмме раст-
вора сравнения (b) (0,025 %).

Хлориды 

(

2.4.4

). Не более 0,02 

% (200 

ppm). К 0,5 г испытуемого образца прибавля-
ют смесь из 0,2 мл 

кислоты азотной Р

 и 30 мл 

воды дистиллированной Р

 и встряхивают в те-

чение 5 мин. Выдерживают в течение 15 мин и 
фильтруют.

Сульфаты

  (

2.4.13

). Не более 0,03 

% 

(300 ppm). К 1,0 г испытуемого образца при-
бавляют смесь из 0,2 мл 

кислоты уксусной Р

 и 

30 мл 

воды дистиллированной Р

 и встряхивают 

в течение 5 мин. Выдерживают в течение 15 мин 
и фильтруют.

Тяжелые металлы 

(

2.4.8, метод С

). Не 

более 0,002 % (20 ppm). 1,0 г испытуемого образ-
ца должен выдерживать испытание на тяжелые 
металлы. Эталон готовят с использованием 2 мл 

эталонного раствора свинца (10 ppm Pb) P.

Потеря в массе при высушивании 

(

2.2.32

). 

Не более 0,5 %. 1,000 г испытуемого образца 
сушат при температуре 105°С.

Сульфатная зола 

(

2.4.14, метод А

). Не 

более 0,1 %. Определение проводят из 1,0 г ис-
пытуемого образца.

# Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

# Микробиологическая чистота

 

(

2.6.12

,

 

2.6.13

,

 5.1.4

). Фуросемид в условиях испытания 

не обладает антимикробным действием.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

0,250 г испытуемого образца растворяют в 

20 мл 

диметилформамида Р

 и титруют 

0,1 М 

раствором натрия гидроксида

, используя в ка-

честве индикатора 0,2 мл 

раствора бромтимо-

лового синего Р2

.

Параллельно проводят контрольный опыт.
1 мл 

0,1 М раствора натрия гидроксида

 со-

ответствует 33,07 мг C

12

H

11

ClN

2

O

5

S.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

ПРИМЕСИ

Специфицированные примеси: А, В, С, D, Е.

S

H

2

N

CO

2

H

N

H

Cl

O

O

O

А. 2-Хлор-4-[(фуран-2-илметил)амино]-5-суль-

фамоилбензойная кислота.

R2

Cl

CO

2

H

R1

В. R1 = Cl, R2 = SO

2

-NH

2

: 2,4-Дихлор-5-

сульфамоилбензойная кислота.

С. R1 = NH

2

, R2 = SO

2

-NH

2

: 2-Амино-4-хлор-

5-сульфамоилбензойная кислота.

E. R1 = Cl, R2 = H: 2,4-Дихлорбензойная кислота.

S

H

2

N

CO

2

H

N

H

N

H

O

O

O

O

D. 2,4-Бис[(фуран-2-илметил)амино]-5-сульфа-

моилбензойная кислота.

 ХИМОТРИПСИН

Chymotrypsinum

CHYMOTRYPSIN

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Химотрипсин представляет собой протеоли-

тический фермент, получаемый активацией хи-
мотрипсиногена, экстрагируемого из поджелудоч-
ной железы крупного рогатого скота (

Bos taurus

 

L.). Активность: не менее 5,0 микрокатал/мг. В 
растворе при рН около 8 обладает максимальной 
ферментативной активностью; активность обра-
тимо ингибируется при рН 3; при значении рН 3 
химотрипсин является наиболее стабильным.

ПРОИЗВОДСТВО

Животные, используемые для получения хи-

мотрипсина, должны выдерживать требования, 
предъявляемые к здоровью животных, использу-
емых человеком в пищу. Кроме того, используе-
мые ткани не должны содержать опасные веще-

629

Химотрипсин

ства в соответствии с международным или наци-
ональным законодательством.

Метод производства должен быть валиди-

рован, чтобы при испытании субстанция отвеча-
ла следующему требованию.

Гистамин 

(

2.6.10

). Не более 1 мкг (в пере-

счете на основание гистамина) на 5 микрокатал 
химотрипсиновой активности. Перед проведени-
ем испытания раствор испытуемого образца на-
гревают на водяной бане в течение 30 мин.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Белый или почти белый кристаллический 

или аморфный порошок. Аморфная форма яв-
ляется гигроскопичной.

Умеренно растворим в воде.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А.

 1 мл раствора S, приготовленного как ука-

зано в разделе «Испытания», доводят 

водой Р

 

до объема 10 мл. В лунке белой пластинки для 
капельных реакций смешивают 0,05 мл получен-
ного раствора и 0,2 мл раствора субстрата. По-
является красновато-фиолетовое окрашивание.

Раствор субстрата. 

К 24,0 мг 

ацетилти-

розина этилового эфира Р

 прибавляют 0,2 мл 

96 % спирта Р

 и перемешивают до растворения. 

Прибавляют 2,0 мл 

0,067 М раствора фосфат-

ного буфера рН 7,0 

и 1 мл 

смешанного раст-

вора метилового красного Р

 и доводят 

водой Р

 

до объема 10,0 мл.

B.

 0,5 мл раствора S доводят 

водой Р

 до 

объема 5 мл и прибавляют 0,10 мл раствора 20 г/л 

тозилфенилананилхлорметана Р

 в 

96 %  спирте 

Р

. Доводят до рН 7,0 и встряхивают в течение 2 ч. 

В лунке белой пластинки для капельных реакций 
смешивают 0,05 мл полученного раствора и 0,2 мл 
раствора субстрата, приготовленного как указано 
в идентификации А. В течение 3 мин после сме-
шивания не появляется окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ

Раствор S

. 0,10 г испытуемого образца 

растворяют в 

воде, свободной от углерода ди-

оксида, Р 

и доводят до объема 10,0 мл этим же 

растворителем.

Прозрачность 

(

2.2.1

). Раствор S по степени 

мутности не должен превышать эталон II.

рН 

(

2.2.3

). От 3,0 до 5,0. Измеряют 

рН раствора S.

Оптическая плотность 

(

2.2.25

). 30,0 мг ис-

пытуемого образца растворяют в 

0,001 М

 

раство-

ре

 

кислоты хлористоводородной 

и доводят до 

объема 100,0 мл этим же растворителем. Спектр 
поглощения испытуемого раствора должен иметь 
максимум при 281 нм и минимум при 250 нм. 
Удельный показатель поглощения в максиму-
ме — от 18,5 до 22,5; в минимуме — не более 8.

Трипсин.

Раствор субстрата. 

К 98,5 мг 

тозиларги-

нина метилового эфира гидрохлорида Р

 прибав-

ляют 5 мл 

трис(гидроксиметил)аминометан-

буферного раствора рН 8,1 

и перемешивают до 

растворения. К полученному раствору прибав-
ляют 2,5 мл 

смешанного раствора метилового 

красного Р

 и доводят 

водой Р

 до объема 25,0 мл.

Испытуемый раствор

. В лунке белой пла-

стинки для капельных реакций смешивают 
0,05 мл 

трис(гидроксиметил)аминометан-

буферного раствора рН 8,1 Р

 и 0,1 мл раствора 

S и прибавляют 0,2 мл раствора субстрата. 

Раствор сравнения

. Готовят аналогично ис-

пытуемому раствору и в то же самое время, ис-
пользуя испытуемый образец, к которому при-
бавляют не более 1 % (

м/м

) 

БСП трипсина

.

В испытуемом растворе в течение 3—5 мин 

после смешивания не должно появляться окра-
шивание. В растворе сравнения появляется 
красновато-фиолетовое окрашивание.

 

Потеря в массе при высушивании 

(

2.2.32

). 

Не более 5,0 %. 0,100 г испытуемого образца 
сушат при температуре 60°С и давлении, не пре-
вышающем 0,7 кПа, в течение 2 ч.

#

 

Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

#

 

Микробиологическая чистота 

(

2.6.12, 

2.6.13,

 

5.1.4

). Химотрипсин в условиях испыта-

ния не обладает антимикробным действием.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Активность испытуемого образца определя-

ют, сравнивая скорость, с которой он гидролизу-
ет 

ацетилтирозина этиловый эфир Р

, со ско-

ростью, с которой 

БСП химотрипсина

 гидроли-

зует этот же субстрат в этих же условиях.

Прибор

. Используют реакционный сосуд 

вместимостью около 30 мл, снабженный:

 

– устройством, поддерживающим темпера-

туру (25,0±0,1)°С;

 

– устройством для перемешивания (напри-

мер, магнитной мешалкой);

 

– крышкой с отверстиями для электродов, 

наконечника бюретки, трубки для подвода азота 
и прибавления реактивов.

Может быть использована автоматическая 

или ручная установка для титрования. В послед-
нем случае бюретку градуируют делениями по 
0,005 мл; используют рН-метр с широким диа-
пазоном, снабженный стеклянным ионселектив-
ным электродом и каломельным или хлорсере-
бряным электродами сравнения.

Испытуемый раствор. 

25,0 мг испытуемого 

образца растворяют в 

0,001 М растворе кисло-

ты хлористоводородной 

и доводят до объема 

250,0 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения. 

Растворяют 25,0 мг 

БСП химотрипсина 

в 

0,001 М растворе кисло-

ты хлористоводородной 

и доводят до объема 

250,0 мл этим же растворителем.

Растворы хранят при температуре от 0°С до 

5°С. 1 мл каждого раствора нагревают до темпе-
ратуры около 25°С в течение 15 мин и исполь-

630

зуют 50 мкл каждого раствора (соответствует 
около 25 нанокатал) для каждого титрования. 
Титрование проводят в атмосфере азота.

10,0 мл 

0,01 М раствора кальция хлорида Р

 

помещают в реакционный сосуд и при перемеши-
вании прибавляют 0,35 мл 

0,2 М раствора аце-

тилтирозина этилового эфира Р

. Когда тем-

пература установится в пределах (25,0±0,1)°С 
(приблизительно через 5 мин), доводят до рН 8,0 

0,02 М раствором натрия гидроксида. 

Прибав-

ляют 50 мкл испытуемого раствора (соответству-
ет около 5 мкг испытуемого образца) и начинают 
отсчет времени. Поддерживают рН 8,0, прибав-
ляя 

0,02 М раствор натрия гидроксида

, отме-

чая прибавленный объем каждые 30 с. Рассчи-
тывают использованный объем 

0,02 М раствора 

натрия гидроксида 

в секунду между 30 и 210 се-

кундой титрования. Аналогично проводят титро-
вание с использованием раствора сравнения и 
рассчитывают использованный объем 

0,02 М 

раствора натрия гидроксида

 в секунду.

Активность в микрокатал на миллиграмм 

рассчитывают по формуле:

A

V

m

V

m

⋅

′

⋅

⋅′

,

где:

m 

— масса навески испытуемого образца, мг;

m

’ — масса навески 

БСП химотрипсина

, мг;

V 

— объем 

0,02 М раствора натрия ги-

дроксида

, пошедший на титрование испытуе-

мого раствора в секунду;

V

’ — объем 

0,02 М раствора натрия ги-

дроксида

, пошедший на титрование раствора 

сравнения в секунду;

А

 — активность 

БСП химотрипсина

,

 

в ми-

крокатал на миллиграмм.

ХРАНЕНИЕ

В воздухонепроницаемом контейнере в за-

щищенном от света месте при температуре от 
2°С до 8°С.

МАРКИРОВКА

Указывают:

 

– количество химотрипсина и общую актив-

ность в микрокатал на контейнер;

 

– для аморфного химотрипсина — «гигро-

скопичен».

 ХЛОРАЛГИДРАТ

Chlorali hydras

CHLORAL HYDRATE

Cl

3

C

OH

OH

C

2

H

3

Cl

3

O

2 

 М.м. 165,4

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Хлоралгидрат содержит не менее 98,5 % и 

не более 101,0 % 2,2,2-трихлорэтан-1,1-диола.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Бесцветные прозрачные кристаллы.
Очень легко растворим в воде, легкораство-

рим в 96 % спирте.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А.

 К 10 мл раствора S, приготовленного как 

указано в разделе «Испытания», прибавляют 
2 мл 

раствора натрия гидроксида разведенно-

го Р

. Раствор мутнеет, при нагревании появляет-

ся запах хлороформа.

В.

 К 1 мл раствора S прибавляют 2 мл 

раствора натрия сульфида Р

. Появляется 

желтое окрашивание, быстро переходящее в 
красновато-коричневое. При выдерживании в 
течение небольшого промежутка времени может 
образоваться красный осадок.

ИСПЫТАНИЯ

Раствор S

. 3,0 г испытуемого образца раст-

воряют в 

воде, свободной от углерода диокси-

да, Р

 и доводят до объема 30 мл этим же раст-

ворителем.

Прозрачность 

(

2.2.1

). Раствор S должен 

быть прозрачным.

Цветность 

(

2.2.2, метод II

). Раствор S 

должен быть бесцветным.

рН 

(

2.2.3

). От 3,5 до 5,0. Измеряют рН раст-

вора S.

Хлоралалкоголят

. К 1,0 г испытуемого об-

разца прибавляют 10 мл 

раствора натрия ги-

дроксида разведенного Р

 и нагревают. Надоса-

дочный слой фильтруют, к фильтрату прибавля-
ют по каплям 

0,05 М раствор йода

 до появления 

желтого окрашивания. Выдерживают в течение 
1 ч. Не должно образовываться осадка.

Хлориды 

(

2.4.4

). Не более 0,01 % (100 ppm). 

5 мл раствора S доводят 

водой Р

 до объема 15 мл.

Тяжелые металлы

  (

2.4.8, метод А

). Не 

более 0,002 % (20 ррm). 10 мл раствора S дово-
дят 

водой Р

 до объема 20 мл. Полученный раст-

вор должен выдерживать испытание на тяжелые 
металлы. Эталон готовят с использованием 

эта-

лонного раствора свинца (1 ppm Pb) P.

Нелетучий остаток

. Не более 0,1 %. 2,000 г 

испытуемого образца выпаривают на водя-
ной бане досуха. Масса полученного остатка не 
должна превышать 2 мг.

#

 

Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

#

 

Микробиологическая чистота 

(

2.6.12, 

2.6.13,

 

5.1.4

). Хлоралгидрат в условиях испыта-

ния обладает антимикробным действием. Посев 
на питательные среды № 3 и № 8 проводят из 
разведения 1:20, на питательную среду № 2 — 
из разведения 1:50, на питательную среду 
№ 1 — из разведения 1:100.

631

Хлорамфеникол (# левомицетин)

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ
4,000 г испытуемого образца растворяют в 

10 мл 

воды Р

 и прибавляют 40,0 мл 

1 М раст-

вора натрия гидроксида

. Выдерживают в тече-

ние точно 2 мин и титруют 

0,5 М раствором кис-

лоты серной

, используя в качестве индикатора 

0,1 мл 

раствора фенолфталеина Р

. Нейтрали-

зованный раствор титруют 

0,1 М раствором се-

ребра нитрата

, используя в качестве индика-

тора 0,2 мл 

раствора калия хромата Р

. Объем 

1 М раствора натрия гидроксида

, использован-

ного на титрование, рассчитывают путем вычи-
тания объема 

0,5 М раствора кислоты серной

 

и 2/15 объема 

0,1 М раствора серебра нитра-

та

 из объема 

1 М раствора натрия гидрокси-

да

, прибавленного до титрования.

1 мл 

1 М раствора натрия гидроксида

 со-

ответствует 0,1654 г C

2

H

3

Cl

3

O

2

.

ХРАНЕНИЕ
В воздухонепроницаемом контейнере # в за-

щищенном от света месте.

 ХЛОРАМФЕНИКОЛ (# ЛЕВОМИЦЕТИН)

Сhloramphenicolum

CHLORAMPHENICOL

NO

2

N

H

Cl

Cl

O

OH

H

H

OH

С

11

Н

12

Cl

2

N

2

O

5

 

 М.м. 323,1

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Хлорамфеникол содержит не менее 98,0 % 

и не более 102,0 

% 2,2-дихлор-

N

-[(1

R

,2

R

)-2-

гидрокси-1-(гидроксиметил)-2-(4-нитрофенил)
этил]ацетамида в пересчете на сухое вещество.

Субстанция продуцируется некоторыми 

штаммами 

Streptomyces venezuelae

 в подходящей 

среде. Обычно получают синтетическим путем.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Белый, серовато-белый или желтовато-белый 

мелкий кристаллический порошок либо мелкие 
кристаллы, игольчатые или вытянутые пластинки.

Малорастворим в воде, легкорастворим в 

96 % спирте и в пропиленгликоле.

Раствор в этаноле является правовращаю-

щим, а раствор в этилацетате — левовращающим.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Первая идентификация: А, В.
Вторая идентификация: А, С, D, Е.

А.

 Температура плавления (

2.2.14

): от 149°С 

до 153°С.

В.

 Абсорбционная спектрофотометрия в ин-

фракрасной области (

2.2.24

).

Сравнение

: 

ФСО хлорамфеникола 

# или 

спектр, представленный на рисунке 1.

С.

 Просматривают хроматограммы, полу-

ченные в испытании «Сопутствующие приме-
си». На хроматограмме с 1 мкл испытуемого 
раствора обнаруживается основное пятно, со-
ответствующее по расположению и размеру 
основному пятну на хроматограмме раствора 
сравнения (а).

Рисунок 1.

 Инфракрасный спектр пропускания ФСО хлорамфеникола.

 58

 60

 62

 64

 66

 68

 70

 72

 74

 76

 78

 80

 82

 84

 86

 88

 90

 92

 94

 96

 98

Пропускание

 500 

 1000 

 1500 

 2000 

 2000 

 3000 

Волновое  число  (см

-1

)

632

D.

 10 мг испытуемого образца растворяют в 

1 мл 

спирта (50 %, об/об) Р

, прибавляют 3 мл 

раствора 10 г/л 

кальция хлорида Р

, 50 мг 

по-

рошка цинка Р

 и нагревают на водяной бане в 

течение 10 мин. Горячий раствор фильтруют и 
охлаждают. Прибавляют 0,1 мл 

бензоилхлорида 

Р

 и встряхивают в течение 1 мин. Прибавляют 

0,5 мл 

раствора железа (III) хлорида Р1

 и 2 мл 

хлороформа Р

 и встряхивают. В водном слое по-

является окраска от светло-фиолетово-красной 
до красно-фиолетовой.

Е.

 50 мг испытуемого образца помещают в 

фарфоровый тигель, прибавляют 0,5 г 

натрия 

карбоната безводного Р

, нагревают на откры-

том огне в течение 10 мин и охлаждают. Осадок 
смывают 5 мл 

кислоты азотной разведенной Р

 

и фильтруют. К 1 мл фильтрата прибавляют 1 мл 

воды Р

. Полученный раствор дает реакцию (а) 

на хлориды (

2.3.1

).

ИСПЫТАНИЯ

Кислотность или щелочность

. К 0,1 г ис-

пытуемого образца прибавляют 20 мл 

воды, сво-

бодной от углерода диоксида, Р

, встряхивают 

и прибавляют 0,1 мл 

раствора бромтимолово-

го синего Р1

. При прибавлении не более 0,1 мл 

0,02 М раствора кислоты хлористоводородной

 

или 

0,02 М раствора натрия гидроксида

 окра-

ска раствора должна измениться.

Удельное оптическое вращение

  (

2.2.7

). 

От +18,5 до +20,5. 1,50 г испытуемого образца 
растворяют в 

этаноле Р

 и доводят до объема 

25,0 мл этим же растворителем.

Сопутствующие примеси

. Тонкослойная 

хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор. 

0,10 г испытуемого 

образца растворяют в 

ацетоне Р 

и доводят до 

объема 10 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (а). 

0,10 г 

ФСО

 

хлорам-

феникола 

растворяют в 

ацетоне

 

Р 

и доводят до 

объема 10 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (b). 

0,5 мл раствора срав-

нения (а) доводят 

ацетоном Р

 до объема 100 мл.

Пластинка

: ТСХ пластинка со слоем

 сили-

кагеля GF

254

 Р

.

Подвижная фаза

: 

вода Р — метанол Р — 

хлороформ Р 

(1:10:90, 

об/об/об

).

Наносимый объем пробы

: по 1 мкл испыту-

емого раствора и раствора сравнения (а) и по 
20 мкл испытуемого раствора и раствора срав-
нения (b).

Фронт подвижной фазы

: не менее 15 см от 

линии старта.

Высушивание

: на воздухе.

Проявление

: просматривают в ультрафио-

летовом свете при длине волны 254 нм.

Предельное содержание примесей

:

 

–

любая примесь

 (не более 0,5 %): на хрома-

тограмме с 20 мкл испытуемого раствора любое 
пятно, кроме основного, должно быть не интен-
сивнее основного пятна на хроматограмме раст-
вора сравнения (b).

Потеря в массе при высушивании 

(

2.2.32

). 

Не более 0,5 %. 1,000 г испытуемого образца 
сушат при 105°С.

Сульфатная зола

  (

2.4.14, метод А

). Не 

более 0,1 %. Определение проводят из 2,0 г ис-
пытуемого образца.

Пирогенность

  (

2.6.8

). Субстанция должна 

выдерживать испытание на пирогены, если 
предназначена для производства лекарствен-
ных средств для парентерального применения 
без последующей процедуры удаления пироге-
нов. Готовят раствор 2 мг/мл испытуемого образ-
ца. Тест-доза — 2,5 мл полученного раствора на 
1 кг массы тела кролика.

# Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

# Микробиологическая чистота 

(

2.6.12, 

2.6.13, 5.1.4

). Хлорамфеникол в условиях ис-

пытания обладает антимикробным действием. 
Для устранения антимикробного действия при 
посеве на питательные среды используют метод 
мембранной фильтрации.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

0,100 г испытуемого образца растворяют в 

воде Р

 и доводят до объема 500,0 мл этим же 

растворителем. 10,0 мл полученного раствора 
доводят 

водой Р

 до объема 100,0 мл. Измеряют 

оптическую плотность (

2.2.25

) полученного раст-

вора при длине волны 278 нм.

Содержание С

11

Н

12

Cl

2

N

2

O

5

 рассчитывают с 

учетом удельного показателя поглощения, рав-
ного 297.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.
Стерильная субстанция — в стерильном 

воздухонепроницаемом контейнере с контролем 
первого вскрытия.

 ХЛОРАМФЕНИКОЛА ПАЛЬМИТАТ

Сhloramphenicoli palmitas

CHLORAMPHENICOL PALMITATE

NO

2

N

H

Cl

Cl

O

O

H

O

CH

3

H

OH

С

27

Н

42

Cl

2

N

2

O

6

 

 М.м. 561,6

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Хлорамфеникола пальмитат содержит не 

менее 98,0 % и не более 102,0 % (2

R

,3

R

)-2-[(дихлор-

ацетил)амино-3-гидрокси-3-(4-нитрофенил)пропил-
гексадеканоата в пересчете на сухое вещество.

633

Хлорамфеникола пальмитат

Полусинтетический продукт, полученный из 

продукта ферментации.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Мелкий маслянистый порошок белого или 

почти белого цвета.

Практически нерастворим в воде, легкорас-

творим в ацетоне, умеренно растворим в 96 % 
спирте, очень мало растворим в гексане.

Температура плавления: от 87°С до 95°С.
Обладает полиморфизмом (

5.9

). Термоди-

намически устойчивая форма обладает низкой 
биодоступностью при пероральном приеме.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А.

 Тонкослойная хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор. 

50 мг испытуемого 

образца растворяют в смеси из 1 мл 

1 М раст-

вора натрия гидроксида

 и 5 мл 

ацетона Р

 и вы-

держивают в течение 30 мин. Прибавляют 1,1 мл 

1 М раствора кислоты хлористоводородной

 и 

3 мл 

ацетона Р

.

Раствор сравнения (а). 

10 мг

 ФСО хлорам-

феникола 

растворяют в 

ацетоне Р

 и доводят до 

объема 5 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (b). 

10 мг 

кислоты 

пальмитиновой Р

 растворяют в 

ацетоне Р 

и до-

водят до объема 5 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (с). 

10 мг испытуемого 

образца растворяют в 

ацетоне Р

 и доводят до 

объема 5 мл этим же растворителем.

Пластинка

: 

ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля силанизированного Р

.

Подвижная фаза

: раствор 100 г/л 

аммония 

ацетата Р — 96 % спирт Р 

(30:70, 

об/об

).

Наносимый объем пробы

: 4 мкл.

Фронт подвижной фазы

: не менее 15 см от 

линии старта.

Высушивание

: на воздухе.

Проявление

: пластинку опрыскивают рас-

твором, содержащем 0,2 г/л 

дихлорфлуоресце-

ина Р

 и 0,1 г/л 

родамина В Р

 в 

96 %

 

спирте Р

, 

сушат на воздухе и посматривают в ультрафио-
летовом свете при длине волны 254 нм.

Результаты

: на хроматограмме испытуе-

мого раствора обнаруживаются три пятна, со-
ответствующие по расположению основным 
пятнам на хроматограммах растворов сравне-
ния (а), (b) и (с).

В.

 0,2 г испытуемого образца растворяют 

в 2 мл 

пиридина Р

, прибавляют 2 мл раствора 

100 г/л 

калия гидроксида Р

 и нагревают на во-

дяной бане. Появляется красное окрашивание.

С.

 10 мг испытуемого образца растворяют в 

5 мл 

96 %  спирта

 

Р

, прибавляют 4,5 мл 

кисло-

ты серной разведенной Р

 и 50 мг 

цинка порош-

ка Р

, выдерживают в течение 10 мин и при не-

обходимости сливают надосадочную жидкость 
или фильтруют. Охлаждают в ледяной воде, 
прибавляют 0,5 мл 

раствора натрия нитри-

та Р

. Выдерживают в течение 2 мин и прибав-

ляют 1 г 

мочевины Р

, 2 мл 

раствора натрия ги-

дроксида концентрированного Р

, 1 мл 

раствора

 

β-нафтола Р

. Появляется красное окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ

Кислотность

. 1,0 г испытуемого образца 

растворяют в 5 мл смеси из равных объемов 

96 % спирта Р

 и 

эфира Р

, нагревают до тем-

пературы 35°С и прибавляют 0,2 мл 

раствора 

фенолфталеина Р

.

 

При прибавлении не более 

0,4 мл 

0,1 М раствора натрия гидроксида

 окра-

ска раствора должна измениться на розовую и 
сохраняться в течение 30 с

.

Удельное оптическое вращение

  (

2.2.7

). 

От +22,5 до +25,5. 1,25 г испытуемого образца 
растворяют в 

этаноле Р

 и доводят до объема 

25,0 мл этим же растворителем.

Свободный хлорамфеникол

. Не более 

450 ppm. 1,0 г испытуемого образца раство-
ряют в 80 мл 

ксилола Р

 при слабом нагревании, 

охлаждают и трижды встряхивают с порциями 

воды Р

, каждая по 15 мл. Объединенные водные 

экстракты доводят 

водой Р

  до  объема  50  мл  и 

встряхивают с 10 мл 

толуола Р

. Отделяют и от-

брасывают слой с толуолом. Часть водного слоя 
центрифугируют и измеряют оптическую плот-
ность (

2.2.25

) в максимуме при длине волны 

278 нм, используя в качестве компенсационно-
го раствора контрольный раствор с оптической 
плотностью не более 0,05.

Содержание свободного хлорамфеникола в 

одной части на миллион частей (ppm) рассчиты-
вают по формуле:

96

,

5

10

4

⋅

A

.

Сопутствующие примеси

. Тонкослойная 

хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор. 

0,1 г испытуемого 

образца растворяют в 

ацетоне Р 

и доводят до 

объема 10 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (а). 

20 мг 

ФСО

 

хлорам-

феникола пальмитата изомера

 растворяют в 

ацетоне

 

Р 

и доводят до объема 10 мл этим же 

растворителем. 1 мл полученного раствора до-
водят 

ацетоном Р

 до объема 10 мл.

Раствор сравнения (b). 

20 мг 

ФСО хлорам-

феникола

 

дипальмитата 

растворяют в 

ацето-

не Р

 и доводят до объема 10 мл этим же раст-

ворителем. 1 мл полученного раствора доводят 

ацетоном Р

 до объема 10 мл.

Раствор сравнения (с). 

5 мг 

ФСО хлорам-

феникола

 растворяют в 

ацетоне Р

 и доводят 

до объема 10 мл этим же растворителем. 1 мл 
полученного раствора доводят 

ацетоном Р

 до 

объема 10 мл.

Пластинка

: ТСХ пластинка со слоем 

сили-

кагеля GF

254

 Р

.

Подвижная фаза

: 

метанол Р — хлороформ 

Р — циклогексан Р 

(15:40:50, 

об/об/об

).

Наносимый объем пробы

: 10 мкл.

Фронт подвижной фазы

: не менее 15 см от 

линии старта.

634

Высушивание

: на воздухе.

Проявление

: просматривают в ультрафи-

олетовом свете при длине волны 254 нм.

Предельное содержание примесей

:

 

–

хлорамфеникола пальмитата изомер 

и хлорамфеникола дипальмитат

 (не более 

2,0 %): на хроматограмме испытуемого раст-
вора пятна, соответствующие хлорамфени-
кола пальмитата изомеру и хлорамфенико-
ла дипальмитату, должны быть не интенсив-
нее соответствующих пятен на хроматограм-
мах растворов сравнения (а) и (b);

 

–

любая другая примесь

 (не более 0,5 %): 

на хроматограмме испытуемого раствора 
любое пятно, кроме основного и пятен, со-
ответствующих хлорамфеникола пальмита-
та изомеру и хлорамфеникола дипальмитату, 
должно быть не интенсивнее основного пятна 
на хроматограмме раствора сравнения (с).

Потеря в массе при высушивании 

(

2.2.32

). Не более 0,5 %. 1,000 г испытуемо-

го образца сушат над 

фосфора (V) оксидом Р

 

при температуре 80°С и давлении, не превы-
шающем 0,1 кПа, в течение 3 ч.

Сульфатная зола

  (

2.4.14, метод А

). Не 

более 0,1 %. Определение проводят из 1,0 г 
испытуемого образца.

# Остаточные количества органиче-

ских растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый 

образец должен выдерживать требования 
статьи (

5.4

).

#

 

Микробиологическая чистота 

(

2.6.12, 

2.6.13, 5.1.4

). Хлорамфеникола пальмитат в 

условиях испытания не обладает антимикроб-
ным действием.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

90,0 мг испытуемого образца раство-

ряют в 

96 % спирте Р

 и доводят до объема 

100,0 мл этим же растворителем. 10,0 мл по-
лученного раствора доводят 

96 % спиртом Р

 

до объема 250,0 мл. Измеряют оптическую 
плотность (

2.2.25

) полученного раствора при 

длине волны 271 нм.

Содержание С

27

Н

42

Сl

2

N

2

O

6

 рассчитывают 

с учетом удельного показателя поглощения, 
равного 178.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

ПРИМЕСИ

NO

2

N

H

Cl

Cl

O

OH

H

H

O

O

CH

3

А. (1

R

,2

R

)-2-[(Дихлорацетил)амино]-3-гидрокси-

1-(4-нитрофенил)пропил гексадеканоат (изомер 
хлорамфеникола пальмитата).

NO

2

N

H

Cl

Cl

O

O

H

H

O

O

CH

3

O

CH

3

B. (1

R

,2

R

)-2-[(Дихлорацетил)амино]-1-(4-нит-

рофенил)пропан-1,3-диил бисгексадеканоат (хлор-
амфеникола пальмитат).

 ХЛОРГЕКСИДИНА ДИГЛЮКОНАТА 
РАСТВОР

Chlorhexidini digluconatis solutio

CHLORHEXIDINE DIGLUCONATE SOLUTION

H

N

NH

H

N

NH

H

N

N

H

NH

N

H

NH

N

H

Cl

Cl

OH

H

OH

H

H

CO

2

H

HO

H

OH

HO

2

C

22

H

30

Cl

2

N

10

 · 2C

6

H

12

O

7

 

 М.м. 898

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Хлоргексидина диглюконата водный раст-

вор содержит не менее 190 г/л и не более 210 г/л 
1,1’-(гексан-1,6-диил)бис[5-(4-хлорфенил)бигуа-
нид] ди-D-глюконата.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Почти бесцветная или бледно-желтоватая 

жидкость.

Смешивается с водой, с не более чем 

3 частями ацетона и с не более чем 5 частями 
96 %  спирта.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Первая идентификация: А, В.
Вторая идентификация: В, С, D.

А.

 Абсорбционная спектрофотометрия в ин-

фракрасной области (

2.2.24

).

Приготовление

: к 1 мл испытуемого образ-

ца прибавляют 40 мл 

воды Р

, охлаждают в ледя-

ной бане, подщелачивают при перемешивании 
по каплям 

раствором натрия гидроксида кон-

центрированным Р

 с использованием 

бумаги 

титанового желтого Р

 и прибавляют еще 1 мл 

раствора натрия гидроксида концентрирован-
ного Р

. Фильтруют, осадок промывают 

водой Р

 

до исчезновения щелочной реакции промывной 
воды, перекристаллизовывают из 

спирта (70 %, 

об/об) Р

 и сушат при температуре от 100°C до 

105°С. Используют сухой остаток.

Сравнение

: 

ФСО хлоргексидина

 # или 

спектр, представленный на рисунке 1.

635

Хлоргексидина диглюконата раствор

В.

 Тонкослойная хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор

. 10,0 мл испытуемо-

го образца доводят 

водой Р

 до объема 50 мл.

Раствор сравнения

. 25 мг 

ФСО кальция 

глюконата

 растворяют в 1 мл 

воды Р

.

Пластинка

: 

ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля G Р

.

Подвижная фаза

: 

раствор аммиака концен-

трированный Р — этилацетат Р — вода Р — 
96 % спирт Р

 (10:10:30:50, 

об/об/об/об

).

Наносимый объем пробы

: 5 мкл.

Фронт подвижной фазы

: не менее 10 см от 

линии старта.

Высушивание

: при температуре 100°С в те-

чение 20 мин и охлаждают.

Проявление

: пластинку опрыскивают рас-

твором 50 г/л 

калия дихромата Р

 в 40 % (

м/м

) 

растворе 

кислоты серной Р

. Просматривают 

через 5 мин.

Результаты

: на хроматограмме испытуе-

мого раствора обнаруживается основное пятно, 
соответствующее по расположению, цвету и раз-
меру основному пятну на хроматограмме раст-
вора сравнения.

С.

 К 1 мл испытуемого образца прибавля-

ют 40 мл 

воды Р

, охлаждают в ледяной бане, 

подщелачивают при перемешивании по каплям 

раствором натрия гидроксида концентриро-
ванным Р

 с использованием 

бумаги титаново-

го желтого Р

 и прибавляют еще 1 мл 

раствора 

натрия гидроксида концентрированного Р

. 

Фильтруют, осадок промывают 

водой Р

 до исчез-

новения щелочной реакции промывной воды, пе-
рекристаллизовывают из 

спирта (70 %, об/об) Р

 

и сушат при температуре от 100°C до 105°С. Тем-
пература плавления (

2.2.14

) полученного остат-

ка: от 132°С до 136°С.

D. 

К 0,05 мл испытуемого образца прибавля-

ют 5 мл раствора 10 г/л 

цетримида Р

, 1 мл раст-

вора 

натрия гидроксида концентрированного 

Р

 и 1 мл 

бромной воды Р

. Появляется интенсив-

ное красное окрашивание.

ИСПЫТАНИЯ

Относительная плотность

  (

2.2.5

). От 1,06 

до 1,07.

рН

 (

2.2.3

). От 5,5 до 7,0. 5,0 мл испытуемого 

образца доводят 

водой, свободной от углерода 

диоксида, Р

 до объема 100 мл.

Хлоранилин

. Не более 0,25 % в пересчете на 

хлоргексидина диглюконат с номинальной концен-
трацией 200 г/л. 2,0 мл испытуемого образца до-
водят 

водой Р

 до объема 100 мл. К 10 мл получен-

ного раствора прибавляют 2,5 мл 

кислоты хлори-

стоводородной разведенной Р

 и доводят 

водой 

Р

 до объема 20 мл. Прибавляют быстро, переме-

шивая после каждого прибавления: 0,35 мл 

раст-

вора натрия нитрита Р

, 2 мл раствора 50 г/л 

ам-

мония сульфамата Р

, 5 мл раствора 1 г/л 

нафти-

лэтилендиамина дигидрохлорида Р

, 1 мл 

96 % 

спирта Р

. Доводят 

водой Р

 до объема 50,0 мл и 

выдерживают в течение 30 мин. Красновато-синяя 
окраска полученного раствора должна быть не ин-
тенсивнее раствора, приготовленного аналогично 
и в то же самое время с использованием смеси из 
10,0 мл раствора 0,010 г/л 

хлоранилина Р

 в 

кисло-

те хлористоводородной Р

 и 10 мл 

воды Р

 вместо 

разведенного испытуемого образца.

Рисунок 1. 

Инфракрасный спектр пропускания ФСО хлоргексидина.

 50

 55

 60

 65

 70

 75

 80

 85

 90

 95

Пропускание

 1000 

 1500 

 2000 

 2000 

 3000 

Волновое  число  (см

-1

)