КРАТКОЕ РУКОВОДСТВО ПО РЕПРОДУКЦИИ ЖИВОТНЫХ: крупный рогатый скот (2009 год)

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

щийся эмбрион должен подать сигнал, предотвращающий лютеолиз, кото-

Рис. 19. Взаимосвязь между матерью и эмбрионом, предшествующая

рый в ином случае мог бы привести к стандартному завершению полового

признанию стельности

цикла. Обнаружено, что эмбрион коровы и овцы вырабатывает и высвобо-

ждает специфический белок беременности — интерферон-τ (INF-τ) (Farin

и соавт., 1989; Mann и соавт., 1999). Механизм ингибирования INF-τ во

время лютеолиза хорошо известен и заключается в подавлении рецепторов

Образование

к окситоцину в эпителии полости матки (Robinson и соавт., 1999) и индук-

желтого тела

ции ингибитора синтеза простагландина (Thatcher и соавт., 1995). У КРС

Овуляция

яйцеклетки

мРНК для интерферона-τ была впервые обнаружена в трофэктодерме,

Оплодотворение яйцеклетки

основном месте его производства, на 12-й день и достигла максимального

в яйцеводе

уровня между 15 и 16-м днем. (Farin и соавт., 1990). Интерферон-τ может

быть в значительном количестве обнаружен в первую очередь в смывах из

матки на 14-16-й день, совпадающий с началом удлинения эмбриона (Mann

и соавт., 1998).

Лютеолиз

В случае задержки развития эмбриона — или в том случае, если рост

Сниженная концентрация

Прогестерон

эмбриона и материнский половой цикл не синхронизованы (напр. вследствие

прогестерона

INT

задержки овуляции или позднего осеменения), — наблюдается недостаточ-

PGF2

INT

PGF2

ная или запоздалая выработка интерферона-τ, подавления лютеолиза не

происходит, и эмбрион погибает. Основной причиной недостаточной выра-

ботки интерферона-τ эмбрионом, происходящей в результате оплодотво-

Отсутствие эмбриона -

Низкое качество эмбриона -

Высокое качество эмбриона -

отсутствие сигнала.

слабый сигнал. После лютелиоза

хороший сигнал. Лютелиоз

рения яйцеклетки на фоне задержки овуляции, является процесс старения

После лютелиоза начинается

начинается новый цикл.

отсутствует.

яйцеклетки, связанный с увеличением периода существования доминантного

новый цикл

При отсутствии досточной

При наличии необходимой

концентрации прогестерона

фолликула. Предполагается, что вследствие увеличения этого периода

эмбрион погибает

стельность сохраняется

и задержки овуляции в яйцеклетке происходят изменения, которые выра-

жаются в ее преждевременном созревании и, в свою очередь, уменьшают

ее способности к оплодотворению и развитию. Слабое развитие эмбриона,

Предотвращение гибели эмбриона при помощи фармакологических

ассоциирующееся со слабой выработкой интерферона-τ, не подавляет лю-

средств

теолиз, что приводит к гибели эмбриона (Mann и соавт., 1996, Mann и соавт.,

На сегодняшний день наиболее популярные стратегии и способы фарма-

1998). Как указано в главе 2.3.3, существует тесная взаимосвязь между ран-

кологического лечения, направленные на увеличение показателей стельно-

ним увеличением концентрации прогестерона после осеменения, развитием

сти у КРС, могут быть разделены на две группы.

эмбриона и его способностью вырабатывать интерферон-τ (Kerbler и соавт.,

1. Профилактика задержки овуляции

1997; Mann и соавт., 1999; 2001).

2. Поддержка функции желтого тела на ранних стадиях и профилактика

На рис. 19 схематически показана взаимосвязь между эмбрионом

преждевременного лютеолиза.

и коровой на ранней стадии развития эмбриона и механизм признания

О фармакологических способах, направленных на уменьшение случаев

стельности.

ранней гибели эмбриона, см. главу 2.3.4

120

121

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

2.4.7. Корова, нуждающаяся в повторном осеменении

мина А. Аборт могут вызывать также многочисленные растительные токсины

и микотоксины и неорганические яды, такие как нитраты/нитриты, свинец

Нуждающейся в повторном осеменении считается корова, имеющая нор-

или кадмий. Патогенные аборты не являются распространенным явлением,

мальный половой цикл без клинических отклонений, но не оплодотворенная

но аборты, вызванные вводом простагландинов или глюкокортикоидов,

после не менее чем двух успешных осеменений. На практике некоторые из

случаются в стаде, в котором плохо организована идентификация животных,

этих животных бывают осеменены в неправильно выбранное время. У дру-

учет вводимых препаратов и проводимого лечения, а также имеет место

гих могут присутствовать непальпируемые патогенные изменения в сумке

неверная диагностика яловости у стельных коров.

или яйцеводе, вследствие чего возникают трудности при диагностике или

Инфекции, вызывающие аборты, включают большой перечень бактерий,

имеются не диагностированные маточные инфекции.

вирусных и протозойных микроорганизмов (Anderson и соавт., 2007).

Тремя другими патологическими причинами повторного осеменения

Следует помнить, что некоторые генетические отклонения и отклонения

являются:

в развитии могут стать причиной гибели плода и аборта. Это так называе-

• субклинические эндометриты;

мые комплексные пороки позвоночника (CVM), дисхондроплазия и различ-

• задержка овуляции;

ные отклонения на хромосомном уровне.

• недостаточность функции желтого тела.

Перечень причин аборта у КРС, приведенный в таблице 14, не является

См. главы 2.4.3. и 2.3.4.

исчерпывающим.

2.4.8. Аборты

Таблица 14. Дифференциальная диагностика аборта у КРС

Аборт у коровы определяется как гибель плода и изгнание его между

Причины неинфекционного характера

Инфекционные причины

45 и 265-м днем стельности.

Генетические аберрации

Вирусы

Это одна из важнейших причин репродуктивных и экономических потерь,

Хромосомные аномалии

Вирус бычьего герпеса 1 (BHV1)

особенно в том случае, если в стаде наблюдается высокий уровень абортов.

Фитотератогены: люпин, Senecio spp.

Вирус бычьего герпеса 4 (BHV4)

Более того, некоторые инфекции, вызывающие аборт у КРС, представляют

Вирус бычьей вирусной диареи (BVDV)

опасный зоонозный риск для человека.

Вирус парагриппа 3 (PI-3)

Уровень абортов до 5% в год считается нормальным. Эта цифра не

Парвовирус

включает в себя бóльшую часть абортов, происходящих в течение 2 и 3-го

Пищевые

Бактерии

месяцев стельности, поскольку они часто остаются незамеченными. Уровень

Токсичные растения

Brucella abortus

абортов выше 10% считается «вспышкой абортов». Диагностика причин

Отравление нитратами

Campylobacter foetus

абортов затруднена, и причину можно установить лишь в 20-30% случаев,

Фитоэстрогены

Chlamidia psittaci

что обусловлено отсутствием подходящих образцов или их низким качест-

Недостаток йода

Leptospira hardjo/Pomona

вом. Кроме того, часто присутствует задержка между гибелью плода и его

Недостаток витамина А

Listeria monocytogenes

изгнанием. Быстро развивающийся перед изгнанием автолиз может ока-

Недостаток селена

Salmonella Dublin/typhimurium

зать значительное влияние на качество образцов, взятых для диагностики.

Отравление свинцом

Стафилококки

Серология часто является неадекватной. В литературе приводится целый

Отравление кадмием

Стрептококки

диапазон инфекционных и неинфекционных причин абортов.

Pasteurella spp.

Неинфекционными причинами абортов являются физические причины,

E. coli и т. д.

такие как травма, повторное осеменение стельных животных и гипертер-

мия (также связывается с пирексией). Факторы, связанные с нарушением

рациона, редко вызывают аборты. Увеличение количества абортов можно

наблюдать в стаде, в котором существует продолжительный дефицит вита-

122

123

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Стрессы

Простейшие

аборту, подробности содержания и ухода (в стойле или на выпасе), ис-

Условия содержания животных

Toxoplasma gondii

тория вакцинации, лечебные мероприятия, проводимые за 1-2 недели

Тепловой стресс

Sarcocystis

до аборта (особенно введение фармакологических средств).

Травма

Neospora canium

• Стадо: средний уровень абортов в стаде, последние случаи увеличения

Хирургическая операция

Trichomonas foetus

числа абортов, количество абортов на текущий период, план вакци-

Недостаток влаги

нации стада, последнее медикаментозное лечение, режим кормления,

Беспокойство

смена рациона, недавние новые поступления в стадо.

Вакцинации

Следует помнить о существовании риска зоонозных инфекций, связан-

Прочее

Грибы

ных с патогенными организмами и вызывающих аборт у КРС, таких как бру-

Многоплодная беременность

Aspergillus spp.

целлез, лептоспироз, листериоз, сальмонеллез и т. д. При сборе и транспор-

Осеменение

Mycoplasma spp.

тировке образцов следует принять соответствующие меры безопасности.

Лечение кортикостероидами

В таблице 15 приводятся основные симптомы абортов, вызванных инфек-

Лечение простагландинами

ционными причинами, а также рекомендации по сбору основных образцов.

Аллергия

Обезвоживание

Основная информация об исследовании причин абортов у КРС

Для подробного исследования возможных причин абортов и выяснения

их источника (особенно — источника инфекции) необходимо правильно

собрать образцы и соответствующие сопутствующие данные. Оптимальным

было бы лабораторное исследование плода и плаценты целиком, проведе-

ние гистопатологической и микробиологической оценки и анализа образцов

сыворотки, взятых из матки для серологического исследования. Фермеры

и практикующие ветеринары должны приложить максимум усилий для

исследования плаценты, поскольку часто именно по плацентарным тканям

можно определить наличие инфекционных патогенных организмов.

Сохраняемые в формалине ткани для гистопатологического исследова-

ния включают мозг, легкие, сердце, печень, почки, надпочечники, селезен-

ку, вилочковую железу, лимфатические узлы, мускулатуру, сычуг, тонкий

кишечник, веки плода и плаценту.

Серологические исследования парных образцов сыворотки коровы,

имевшей аборт, позволят определить наличие возбудителя, но не помогут

провести дифференциацию между вакцинацией и естественным заражением

(если не использовались вакцины-маркеры) или между текущим и преды-

дущим воздействием инфекции. Серология коровы обычно проводится при

исследовании сыворотки не привитых коров, проверке нескольких животных

в стаде и наличии истории болезни каждого животного.

Дополнительно должна предоставляться следующая информация.

• Корова, имевшая аборт: возраст, стадия продуктивности, продолжи-

тельность стельности, общие клинические симптомы, предшествующие

124

125

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Таблица 15. Симптомы абортов, вызываемых основными инфекциями

Возбудитель

Процент абортов

Срок стельности

Повторяемость

Патология плода

Образцы

абортов

Бактериальная инфекция

Brucella abortus

До 80% не

6-9 месяцев,

В большинстве

Задержание последа,

Плацента, плод

Бруцеллез

вакцинированных

аборт или

случаев единич-

котиледоны некротизиро-

или выделения из

Болезнь Банга

животных, забо-

мертворождение

ный аборт.

ванные, красно-желтые;

матки.

Зоонозные

левших в 1-м или

в период от 2-х

межкотиледонная область

Диагностика: мате-

инфекции

2-м триместре.

недель до 5-ти

утолщена.

ринская серология,

месяцев после

Теленок: нормальный

непрямой МФА на

заражения.

или автолизированный, с

антитела в плацен-

бронхопневмонией.

те, бакпосев.

Campylobacter

>10%

5-8 месяцев

Не распространен,

Плацента: умеренный

Плацента, содер-

fetus venerealis

выздоравливаю-

плацентит, кровоизлияния

жание сычуга

Вибриоз

щие животные

в котиледонах, отечная

плода, вагинальные

демонстрируют

межкотиледонная область.

смывы.

резистентность

Плод: свежий или автоли-

Диагностика:

к инфекции.

зированный; умеренный

микроскопическое

фибринозный плеврит, пе-

исследование,

ритонит, бронхопневмония

посев.

С. fetus fetus

Спорадические

4-9 месяцев

Не распространен,

См. выше.

См. выше

С. jejuni

выздоравливаю-

щие животные

демонстрируют

резистентность

к инфекции.

Серовары

5-40%

Последний

Иммунитет к се-

Плацента: диффузная

Плацента, плод.

Leptospira

триместр,

ротипу, вызвав-

плацента без сосудов,

Диагностика:

interrogans:

аборт через

шему аборт, но

светло-коричневые котиле-

непрямой МФА

grippotyphosa,

2-5 недель после

восприимчивость

доны и отечная желтоватая

на антитела или

pomona, hardjo,

инфицирования

к другим типам.

межкотиледонная область.

ПЦР-анализ на

canicola,

Плод: автолизированный.

лептоспироз.

icterohae-

morrhagiae

Зоонозные

инфекции

Arcanobacterium

Спорадические.

На любом сроке.

Неизвестно.

Плацента: эндометриты и

Плацента, плод.

(Actinomyces)

диффузная плацента, цвет

Анализ бактери-

pyogenes

от красно-коричневого до

альной культуры

коричневого.

из плаценты или

Плод: автолизированный,

содержимого

фибринозный перикардит,

сычуга

плеврит или перитонит.

Listeria

Обычно споради-

Последний

Возможно

Мать: повышенная тем-

Плацента, плод.

monocytogenes

ческие, но могут

триместр.

излечение.

пература тела, отсутствие

Анализ бактери-

Зоонозные

достигать 50%.

аппетита.

альной культуры

инфекции

Плацента: задержка.

из плаценты или

Плод: автолизированный,

содержимого

фибринозный полисерозит

сычуга

и белые очаги некроза в

печени и/или котиледоне.

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Грибная инфекция

Aspergillus sp

Обычно споради-

За 4 месяца до

Возможно

Плацента: жесткая,

Плацента, плод.

(60-80%) Mucor

ческие, но могут

отела, чаще всего

излечение.

некротический плацентит,

Диагноз: высевание

sp, Absidia или

достигать 5-10%.

зимой.

котиледоны увеличе-

из содержимого

Rhizopus sp

ны, некротизированы,

желудка, плацен-

межкотиледонная область

ты и пораженной

уплотнена, кожистая.

кожи.

Плод: автолизированный,

~30% имеют серую, будто

пораженную червями

кожу, особенно на голове

и плечах.

Протозойные инфекции

Tritrichomonas

Спорадические.

Первая половина

Иммунитет

Плацента: задержка, уме-

Плацента, плод,

(Trichomonas)

стельности.

вырабатывается,

ренный плацентит с гемор-

выделения из

foetus

но, по-видимо-

рагическим поражением

влагалища/матки.

Трихомониаз

му, не является

котиледона и уплотненной

Диагноз: анализ со-

пожизненным.

межкотиледонной обла-

держимого сычуга,

стью, покрытой хлопьями

плацентарной жид-

экссудата.

кости и выделений

Плод: специфические

из матки

поражения отсутствуют

Neospora

Высокий процент

На любом сроке,

Вероятность

Плацента, плод: специ-

Плацента, плод

caninum

при первой

чаще всего на

снижается,

фические поражения

(мозг, сердце,

Неоспороз

стельности и

5-6-м месяце.

но возможно

отсутствуют, автолиз.

печень, жидкости

при поражении

повторение.

Микроскоп: очаговый

тела), образцы

молодняка.

энцефалит с некрозом и

сыворотки матери.

До 30% при пер-

негнойным воспалением,

Диагноз: опреде-

вой вспышке.

гепатит.

ление антигенов

Энзоотия: 5-10%

в образцах мозга

Иммунохимия в

образцах тканей.

Антитела-ПЦР,

ИФА.

Вирусные инфекции

Вирус бычьей

Обычно низкая.

Серьезная

Не распростра-

Плацента: задержка,

Плацента, плод

вирусной диа-

патология.

нен, иммунитет

специфические поражения

предпочтитель-

реи BVD-MD

Аборты до 4-го

вырабатывается.

отсутствуют.

но — селезенка,

месяца.

Плод: специфические

сыворотка матери и

поражения отсутствуют,

др. коров из стада.

автолиз, мумификация.

Диагноз: посев,

иммунологическое

окрашивание, ПЦР

или обнаружение

преколостральных

антител у абортиро-

ванных телят.

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Вирус бычьего

От 5 до 60% у

Возможно на

Не распростра-

В большинстве случа-

Плацента, плод,

герпеса (BHVI)

не привитых

любой стадии, но

нен, иммунитет

ев сильное поражение

образцы сыворотки

Вирус бычьего

животных.

более распро-

вырабатывается.

плаценты или плода

матери.

инфекционного

странено с 4-го

отсутствует.

Диагноз: иммуно-

ринотрахеита

месяца до срока

Плацента: некротический

химия образцов

(IBRV) IBR

отела.

васкулит.

почек и надпочеч-

IBR-IPV

Плод: автолизированный,

ников, серология

очаги некротического

крови, ПЦР.

поражения печени.

Вирус аф-

Обычно низкий.

Различный.

Маловероятен.

Специфические поражения

Плацента, плод,

риканской

отсутствуют.

образцы сыворотки

катаральной

Плод: автолизированный.

матери.

лихорадки

Диагноз: выделе-

ние вируса.

Вирусный

Может достигать

Обычно послед-

Маловероятен.

Плацента: специфические

Анамнез.

аборт КРС,

75%.

ний триместр.

поражения отсутствуют.

Диагностика:

аборты неоп-

Очаг распростра-

Плод: увеличение печени,

повышенный Ig-G

ределенной

нения — в основ-

увеличение селезенки и

плода.

этиологии,

ном Калифорния,

увеличение лимфоузлов.

Ornithodoros

США.

Под микроскопом — вы-

coriaceus

раженная лимфоидная

гиперплазия в селезенке

и лимфатических узлах и

гранулематозное воспале-

ние большинства органов.

Возбудители, не типичные или редкие для КРС

Аборт, вызван-

Спорадические.

К концу последне-

Маловероятен.

Плацента: плацентит,

Плацента, плод.

ный хламидией

го триместра.

густой желто-коричневый

Диагностика:

(Chlamydia

экссудат на котиледонах

высевание из

psittaci, серотип

и в межкотиледонной

легких, плаценты

1), Вирусный

области.

и/или содержимого

аборт

Плод: свежий, минималь-

сычуга.

Зоонозные

но выраженный автолиз,

инфекции.

пневмония, гепатит.

Ureaplasma

Обычно споради-

Третий триместр

Возможен.

Плацента: задержка,

Плацента, плод.

diversum

ческие, но воз-

межкотиледонная область

Диагностика: высе-

можны вспышки.

уплотнена, негнойный

вание из плаценты,

плацентит.

легких и/или содер-

Плод: серьезные по-

жимого сычуга

ражения отсутствуют,

пневмония

Salmonella spp

Обычно споради-

Любой срок

Возможен

Коровы: проявляют клини-

Плацента, плод.

ческие, но воз-

ческие признаки.

Диагноз: высевание

можны вспышки

Плацента и плод: самораз-

из содержимого

рушение и эмфизема.

сычуга и других

тканей..

Прочие инфекции, могущие вызвать аборт у КРС: вирус парагриппа 3 (PI3V),Mycoplasmaspp, Histophilussomni (Haemophilussomnus),

Staphylococcusspp, Streptococcusspp, Pasteurellaspp, E.coli, Toxoplasmagondii

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Неоспороз

полу-аллогенного плода. Для упрощения течения стельности цитокиновая

Neospora caninum — это простейший паразит, близкородственный

среда в плаценте выделяет цитокины Th-2-типа, роль которых состоит в про-

с Toxoplasma gondii, которые считаются основной причиной нарушений ре-

тиводействии провоспалительной иммунной реакции Th1-типа. Защитный

продуктивной системы КРС по всему миру (Dubey, 2003; Hall и соавт., 2005;

иммунитет против N. caninum, как и против любого другого межклеточного

Dubey и соавт., 2007).

паразита, включает иммунный ответ Th1-типа, что может представлять

До настоящего времени носителями Neospora caninum считались собаки

проблему для коровы, пытающейся контролировать инфекцию во время

и койоты (Dijkstra и соавт., 2001; Gondim и соавт., 2004), хотя клинические

стельности (Innes, 2007). Чрезмерно бурная реакция Th1-типа может при-

формы неоспороза описывались у коров, овец, коз, оленей и лошадей

вести к потере стельности и, таким образом, стать одной из причин абортов,

(Dubey, 2003).

связанных с неоспорозом.

Коровы являются основным промежуточным переносчиком паразитов.

Аборт происходит в середине стельности, обычно между четвертым

Наличие антител к неоспорозу было обнаружено у множества видов, но

и шестым месяцем, при отсутствии клинических признаков. Абортированный

у большинства из них последствия серопозитивности остаются не ясными:

плод обычно выходит без больших повреждений, плацента не задерживает-

овцы (Dubey и соавт., 1990), козы (Dubey и соавт., 1992), буйволы (Fuij и со-

ся. Мозг, сердце, печень, плацента и жидкости тела или сыворотка являются

авт., 2001), лисы (Buxton и соавт., 1997), койоты (Lindsay и соавт., 1996),

наилучшими образцами для диагностики, кроме того, точность диагностики

еноты (Lindsay и соавт., 2001), собаки динго (Barber и соавт., 1997), олени

повышается, если исследуются различные ткани. Поражение неоспорами

(Tieman и соавт., 2005), ламы и альпаки (Wolf и соавт., 2005) и европейские

обнаруживается в различных органах, наиболее часто поражаемый орган —

бизоны (Cabay и соавт., 2005). В недавних публикациях Sedlak и Bartova

мозг плода. Самым характерным признаком является очаговый энцефалит

(2006) отмечалось, что антитела к N. caninum были обнаружены у 31 из

плода, характеризующийся некрозом и негнойным воспалением (Dubey,

556-ти животных зоопарка (5,6%), представляющих 18 из 114-ти протестиро-

2003; Dubey и соавт., 2007).

ванных видов: евразийский волк (Canis lupus lupus), гривистый волк, фенек,

В стаде, инфицированном неоспорой, могут наблюдаться как энде-

гепард, ягуар, евразийская рысь, индийский лев, пекан, гарна, европейский

мические, так и эпидемические случаи абортов. Наиболее важной осо-

бизон, водяной козел, африканский буйвол, антилопа канна, ситатунга, бе-

бенностью является то, что паразиты присутствуют у самки постоянно,

ломордый олень, восточный лось, пятнистый олень, милу.

в виде хронической инфекции, которая может быть передана плоду во

Последствия инфицирования стельной коровы будут зависеть от мно-

время стельности. Существует два способа передачи инфекции в стаде.

гочисленных факторов, включая срок стельности во время инфицирования

Горизонтальный путь: жизненный цикл паразита включает двух хозяев,

и иммунный статус матери. Срок стельности, на котором наступило инфици-

корова заражается при заглатывании ооцист простейшего, которые вы-

рование/паразитэмия, является основным фактором, определяющим тяжесть

деляются постоянным хозяином — собакой. Вертикальный путь: передача

протекания болезни. Инфицирование неоспорами, произошедшее в первом

через плаценту и инфицирование плода, которое не всегда заканчивается

триместре стельности, может иметь более серьезные последствия для пло-

абортом, и выживший плод становится постоянным носителем. У телок,

да, чем инфицирование в последнем триместре (Innes, 2007). Клинические

зараженных подобным образом, во время стельности также может слу-

последствия инфицирования во время стельности могут включать: аборт,

читься аборт. В отличие от токсоплазмоза овец, коровы, имевшие аборт по

рождение слабого теленка, иногда с неврологическими нарушениями, или

причине заражения неоспорой, могут вынашивать и инфицировать телят

рождение клинически здорового потомства, являющегося носителем забо-

и в последующие стельности.

левания (Innes и соавт., 2005).

Основные экономические потери, обусловленные неспорозом, бывают

Одним из наиболее интересных, но до сих пор не до конца ясных аспек-

связаны с нарушениями репродуктивной деятельности (аборты, мертворо-

тов аборта КРС, вызванного неоспорой, является иммунологическая связь

жденные телята, повторное осеменение, выбраковка животных по причине

между носителем, его развивающимся плодом и паразитом. Иммунная

бесплодия). Опосредованные расходы включают стоимость ветеринарных

система стельного животного, управляемая цитокинами, играет основную

услуг, оплату диагностики, а также расходы, связанные с заменой выбра-

роль во время стельности, которая может рассматриваться как комплекс-

кованных животных.

ный процесс, при котором мать должна поддерживать жизнеспособность

132

133

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Существуют исследования, доказывающие, что продуктивность молока

наиболее распространенной причиной абортов у КРС. Патология ВД в раз-

в сероположительных стадах ниже, чем в сероотрицательных (Hernandez

вивающемся плоде является сложной. Инфицирование плода до 125-го

и соавт., 2001; Romero и соавт., 2005).

дня стельности может стать причиной его гибели и аборта, рассасывания,

Диагноз ставится на основе гистопатологии и иммуногистохимии

мумификации, отклонений в развитии или иммунотолерантности плода

абортированных плодов и серологии коровы или плода (непрямой МФА,

и рождения животного-носителя. После 125-го дня стельности ВД либо

ИФА, РПГА).

становится причиной абортов, либо иммунная система плода уничтожает

На сегодняшний день не существует доказательств передачи у КРС

вирус. Существует все большая вероятность того, что влияние вируса ВД

N. caninum половым путем. Исследования, описанные Serrano-Martinez

на репродуктивную систему не ограничивается только гибелью эмбриона

и соавт. (2007) и Ferre и соавт. (2008), показали наличие ДНК N. caninum

с последующим абортом.

в семени и крови экспериментально зараженных быков. Наблюдение за

Снижение показателей оплодотворяемости у КРС с острой формой

ними позволило обнаружить постоянное наличие N. caninum в семени

вирусом ВД доказано и является основной жалобой фермеров, в стадах

в незначительном количестве, что демонстрирует хроническую стадию

в которых присутствует вирус (Houe и соавт., 1993; McGovan и соавт., 1993).

инфекции. Однако эти простейшие не были обнаружены у мышей, оп-

Виремия, инициированная экспериментальным путем во время фолликуляр-

лодотворенных зараженным (положительный результат ПЦР) семенем,

ной фазы, продемонстрировала 50%-ное снижение показателей стельности

а у телок, осемененных образцами семени всех быков, отсутствовала

и снижение качества и количества эмбрионов, полученных после суперову-

сероконверсия. Возможные последствия передачи заболевания до сих пор

ляции (McGowan и соавт., 1993; Kafi и соавт., 1997).

остаются не изученными.

Несмотря на возможность индуцирования следующей ступени передачи

Морфологические изменения, инициированные вирусом ВД в яич-

N. caninum после экспериментального инфицирования макаки-резуса (Barr

никах КРС при острой инфекции

и соавт., 1994a), однозначные выводы о возможности поражения N. caninum

Ssentongo и соавт. (1980); Grooms и соавт. (1998) и McGowan и соавт.

человека по-прежнему не сделаны.

(2003) описали воспалительные изменения (лимфоцитарный оофорит) в тка-

Методы борьбы с абортами, вызванными неоспорой, могут включать вак-

нях яичников, вызванные острой формой ВД КРС и виремией. Воспаление,

цинацию (Romero и соавт., 2004) и/или обследование и выбраковку, направ-

упомянутое выше, было обнаружены как в фолликулах, так и в желтом теле

ленную на устранение из стада инфицированных животных (Hall и соавт.,

инфицированных коров и явилось очевидной причиной функциональных на-

2005). Однако оба этих способа ограничены в применении. Обследование

рушений, приводящих к ослаблению фолликулярной и лютеиновой функций

и выбраковку, например, возможно применять только в том стаде, в котором

и последующему бесплодию.

случаи распространения заболевания редки. Тем не менее, любые меры,

направленные на контроль неоспоры в стаде, должны устранять источники

Функциональные последствия морфологических изменений в яич-

инфекции с целью недопущения контакта стельных животных с паразитами.

никах, вызванных вирусом ВД КРС

Это включает выявление и удаление абортированных телят и последов,

1. Нарушение роста фолликула

а также ограничения контакта с собаками и дикими собаками для коров,

Grooms и соавт. (1998) отметили, что максимальный диаметр и скорость

бывающих на выпасе.

роста доминантного овулирующего и неовулирующего фолликулов были

Более подробная информация представлена на сайте www.neosporosis.com.

значительно снижены в течение двух циклов эструса, следующих за инфи-

цированием сероотрицательных животных штаммом нецитопатогенного пес-

Влияние вируса ВД КРС во время осеменения на будущую оплодо-

тивируса КРС. Это было впоследствии подтверждено в работе Fray и соавт.

творяемость КРС

(1999; 2000; 2002), которые продемонстрировали, что у коров, зараженных

У коров, пораженных вирусом ВД КРС в период до и после отела, могут

ВД КРС, значительно нарушен рост фолликула, максимальный диаметр

проявиться различные болезненные симптомы, включающие подавление

фолликула перед овуляцией существенно уменьшен и максимальный диа-

иммунитета, врожденную патологию, аборты и диарею с поражением сли-

метр овуляторного фолликула в целом меньше по сравнению с неинфици-

зистых оболочек. Согласно многочисленным исследованиям ВД является

рованными животными.

134

135

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Kafi и соавт. (1997) описали значительное снижение показателей овуля-

Возможно, что сниженная концентрация прогестерона в плазме, наблю-

ции суперовулирующих телок, зараженных нецитопатогенным пестивирусом

даемая у животных, зараженных вирусом ВД КРС, оказывает влияние на

КРС за 9 дней до искусственного осеменения.

оплодотворяемость, задерживая развитие эмбриона. Отсроченный и не-

адекватный предовуляторный пик ЛГ, наблюдаемый у коров и телок с ви-

2. Недостаточная выработка эстрадиола

ремией, может также вызывать задержки в развитии эмбриона и оказывать

Работа Fray и соавт. (1999; 2000, 2002) отчетливо продемонстрировала,

отрицательное влияние на его качество. Это, в свою очередь, может умень-

что внеклеточная виремия во время осеменения оказывает ярко выражен-

шить способность эмбриона вырабатывать интерферон-τ и предотвращать

ное отрицательное воздействие на репродуктивную функцию как коров, так

лютеолиз. Эти данные подтверждаются результатами крупномасштабных

и телок. Различия в росте фолликулов инфицированных животных было

статистических анализов воздействия вируса ВД КРС на оплодотворяемость

вызвано недостаточной выработкой эстрадиола, низким общим уровнем

в молочном стаде в Британии: в стаде, характеризовавшемся наличием ВД

эстрадиола и задержкой достижения пиковой концентрации перед овуляцией

КРС, коровы позже возвращались в эструс (свыше 21 дня), чем коровы из

(Fray и соавт., 1999; 2002).

стада, в котором продолжительное время не наблюдалось инфекции (Robert

и соавт., 2003).

3. Задержка проявлений признаков половой охоты и задержка дости-

Одним из основных средств уменьшения потерь, вызванных вирусом ВД

жения пиковой концентрации ЛГ вследствие недостаточной выработки

КРС, является применение мер биологической безопасности, ограничиваю-

эстрадиола

щих воздействие вируса на животных, вакцинация препаратами, предотвра-

Недостаточная выработка эстрадиола может, в свою очередь, объяснить

щающими внеклеточную виремию и заражение через плаценту.

задержку начала поведенческого эструса и слабое проявление признаков

охоты, наблюдаемое Kafi и соавт. (1997) и McGowan и соавт. (2003) у телок,

2.4.9. Нежелательная стельность

инфицированных ВД КРС. Более того, в серии этих экспериментов McGowan

и соавт. (2003) наблюдали колеблющийся уровень ЛГ у инфицированных

Конечно, не следует допускать случайной случки молодых телок, но тем

животных, из которых только у некоторых был нормальный предовуляторный

не менее это является обычной причиной нежелательной стельности.

выброс гормонов, а у остальных инфицированных животных обнаруживалась

Животноводы, откармливающие молодых телок, также имеют основания

задержка или недостаточность пиковой концентрации ЛГ. Обследование

для прерывания стельности. Цена стельной телки на бойне ниже и, в любом

эндокринной системы инфицированных телок в настоящем исследовании

случае, эффективность кормов выше, если телка не является стельной.

показало, что у большинства (83%) отсутствовала нормальная предовуля-

Примерно вплоть до 150-го дня стельности единственным источником

торная пиковая концентрация эстрадиола и ЛГ (McGowan и соавт., 2003). Это

прогестерона у стельного животного является желтое тело. Вызванный

можно расценивать как прямой результат неадекватного роста фолликула

с помощью простагландинов лютеолиз приводит в результате к аборту. Если

и высвобождения количества эстрадиола, недостаточного для стимуляции

была замечена незапланированная случка, то простагландин можно ввести

выделения ЛГ. Задержанный и не достаточный предовуляторный выброс

в виде инъекции через 10-16 дней или, в качестве альтернативы, назначить

ЛГ может привести к задержке овуляции, что отрицательно скажется на

его только тем коровам, эструс у которых не наблюдается по истечении

качестве яйцеклетки и потенциале развития эмбриона.

трех недель.

Между 100 и 150-м днем стельности действие простагландинов умень-

Недостаточная выработка прогестерона, приводящая к ранней ги-

шается более чем на 90%, поскольку некоторые случаи стельности меньше

бели эмбрионов

зависят от желтого тела. Таким образом, инъекция простагландина не га-

В экспериментах, описанных Fray и соавт. (1999; 2000; 2002) и McGowan

рантирует прерывания стельности. Важно провести диагностику стельности

и соавт. (2003), у коров и телок, имеющих внеклеточную виремию ко вре-

хотя бы через 10 дней после использования простагландина, и повторять

мени осеменения, была заметна задержка постовуляторного роста прогес-

инъекции до тех пор, пока у всех животных не произойдет аборт.

терона, а также постоянный низкий уровень прогестерона между 3 и 11-м

После 150-го дня стельности уже сама плацента вырабатывает достаточ-

днем после овуляции.

ное количество прогестерона, чтобы поддерживать состояние стельности.

136

137

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Сочетание 25 мг дексаметазона и доза простагландина F2α обычно инду-

10-15 мл). Следует отметить, что 10-30% коров, подвергнутых начальной

цирует аборт на любой стадии стельности. Однако Thomas (1991) сообщал

стимуляции, могут отелиться в течение одной недели.

о повышенном уровне смертности у телок на откорме при использовании

комбинации дексаметазон/простагландин.

Простагландины

Инъекция стандартной дозы простагландина F2α в течение одной недели

2.5. Стимуляция отела

до предполагаемой даты отела также стимулирует отел, и большинство

коров телится в пределах 48-ми часов. Сочетание кортикостероидов и про-

Основными причинами принятия решения о необходимости стимуляции

стагландинов может оказаться предпочтительнее, поскольку последние

отела являются:

требуются для созревания плода.

• ускорение отела с целью сокращения интервала между отелами или

Опубликованные и полученные в полевых исследования сведения ука-

для уплотнения графика отелов;

зывают на то, что стимуляция отела простагландинами (вне зависимости

• снижение частоты дистоции (патологических родов) путем предотвра-

от используемого аналога) повышает частоту случаев задержки плодных

щения чрезмерного роста плода;

оболочек. Необходимо знать точную дату осеменения для того, чтобы не

• прерывание аномальной стельности;

вызвать преждевременные роды, которые значительно снизят жизнеспо-

• ускорение даты отела у поздно оплодотворенных коров, если осемене-

собность теленка. Поэтому очень важно должным образом вести записи

ние и продукция являются сезонными (например, в Новой Зеландии).

в журнале, равно как и уделять внимание санитарно-гигиеническим усло-

Для сохранения стельности у коров необходим определенный уровень

виям во время отела.

прогестерона. Как уже упоминалось выше, в первые 150 дней стельности,

а также в последние несколько дней перед отелом, основным источником

2.6. Бык-производитель

прогестерона является желтое тело. В промежутке между этими периодами

плацента вырабатывает прогестерон в достаточном для сохранения стель-

Как правило, центры искусственного осеменения устанавливают высокие

ности количестве. Механизм родов запускается в результате повышенной

стандарты качества спермы. Для каждого быка должен быть предоставлен

выработки кортизола в организме плода. Как следствие, начинается уси-

индекс фертильности или аналогичные данные, чтобы облегчить фермеру

ление выработки плацентой эстрогена и простагландинов (PGF2α). Желтое

выбор того или иного быка. На фермах, практикующих случку, фертиль-

тело рассасывается, и уровень содержания прогестерона в плазме резко

ность быка имеет особое значение для оплодотворяемости всего поголовья.

снижается. Исследования сосредоточены на использовании простаглан-

Сниженная фертильность быка приводит к задержке оплодотворения, уд-

динов, кортикостероидов или комбинации обоих соединений с целью сти-

линению сервис-периода и даже к увеличению количества выбракованных

муляции отела.

животных. Настоятельно рекомендуется проводить ежегодную оценку каж-

дого быка на предмет его пригодности к осеменению.

Кортикостероиды

Применение быстродействующего дексаметазона (Dexadreson^®; 15 мл)

2.6.1. Оценка пригодности быка к осеменению

незадолго до отела или во время него имитирует подъем выработки корти-

зола плодом и, тем самым, стимулирует процесс отела. Большинство коров

Стандарты оценки пригодности быка к осеменению предоставлены

телится в пределах 72 часов.

Обществом териогенологии (www.therio.org ).

Если ставится задача стимулировать отел более чем за 7-10 дней до

Следует помнить о том, что на сегодня не существует единого параметра

предполагаемой даты отела, то реакция может быть различной, и неудачная

или анализа, предсказывающего плодовитость быка с высокой точностью,

стимуляции имеет место довольно часто. Неудачу можно предотвратить

поэтому при общей оценке пригодности быка к осеменению учитываются

путем начальной стимуляции животного с помощью препарата кортикосте-

несколько критериев (Kastelic и Thundathil 2008). Окончательное решение

роида средней степени срока действия (Dexafort^®; 10 мл). Примерно через

принимается на основе физического состояния быка и базовой оценки

неделю корове вводят быстродействующий дексаметазон (Dexadreson^®;

семени.

138

139

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Анализ потенциала плодовитости быка состоит из 4 элементов:

нивается по шкале: 1) быстрые энергичные волны, 2) замедленные волны,

• общее обследование;

3) волны отсутствуют, но отмечается общее колебание, 4) редкие колебания.

• обследование полового тракта;

Поскольку общая подвижность также зависит от плотности спермы, более

• оценка спермы;

точная оценка подвижности сперматозоидов может быть дана при помощи

• оценка либидо.

фазово-контрастного микроскопа.

Оценка спермы под микроскопом с небольшим увеличением позволяет

Общее обследование

выявить грубые аномалии, но вряд ли даст информацию о более сложных

После проверки возраста быка и его идентификации особое внимание

отклонениях подвижности, которые также могут влиять на фертильность

следует обратить на двигательный аппарат, когда животное стоит и двига-

обследуемого быка. Компьютерный анализ семени (CASA) намного более

ется по твердой поверхности. При свободном содержании животных также

объективен и позволяет измерить специфические характеристики подвиж-

очень важно обратить внимание на зрение.

ности, связанные с функциональным статусом сперматозоидов.

Морфологию сперматозоидов можно оценить при увеличении 1000х,

Обследование полового тракта

используя свежую сперму, окрашенную эозин-нигрозином.

Полное обследование должно включать осмотр пениса и мошонки,

Решение о пригодности быка к осеменению принимается при минимум

а также ректальную пальпацию. Пенис следует осмотреть и пальпировать.

30% подвижности и 70% морфологически нормальной спермы.

Однако некоторые дефекты, например, искривление пениса или недоста-

точная эрекция заметны только при случке.

Оценка либидо

Мошонку обследуют на предмет таких аномалий, как наличие грыжи,

Простым тестом на либидо является 10-15-минутный запуск быка в за-

ожирение, значительная несоразмерность яичек, а также их размер и кон-

гон, в котором находятся коровы или телки в эструсе. Если быку удается

систенция, которая должна быть плотной и упругой. Придатки яичка должны

сделать одну или более садок, то нарушения либидо маловероятны. Если

быть нормальными и иметь мягкий хвост. Мошонка должна быть хорошо

быку не удается сделать садку, следует провести новое тестирование.

развитой. Существует прямая взаимосвязь между окружностью мошонки

Неудача в двух тестах дает серьезные основания для сомнений в либидо

(достигающей максимума в возрасте 4-6-ти лет) и выработкой спермы.

быка (Petrunkina и соавт., 2007; Kastelic и Thundathil 2008).

Ректальное обследование включает пальпацию уретры, простаты, се-

Проводится анализ некоторых новейших методов, основанных на молеку-

менных пузырьков, ампул, семявыносящих протоков и внутренних паховых

лярной биологии и взаимодействии половых клеток. Исследования направ-

колец. Наиболее частой аномалией является везикулит семенных пузырь-

лены на дальнейшее применение таких методов для оценки фертильности

ков, этиология и патогенез которого остается неизвестным. Были выделе-

у быков (Petrunkina и соавт., 2007; Kastelic и Thundathil, 2008).

ны такие патогены, как A. pyogenes, B. abortus, E. coli, Streptococcus spp.

и другие. Реакция на длительное лечение сильно варьируется и не является

2.6.2. Бесплодие

стабильной.

Бесплодие быка может быть связано с неуспешной садкой, неспособ-

Оценка спермы

ностью ввести пенис во влагалище или неспособностью к оплодотворению.

У большинства быков эякуляцию можно вызвать с помощью электроэяку-

Диагноз, как правило, может быть поставлен после тщательного обследова-

лятора, который является простым и безопасным методом, обеспечивающим

ния в соответствии с приведенными выше указаниями. Гораздо труднее вы-

сбор спермы. У некоторых быков эякуляция не наступает или происходит

явить фертильность, находящуюся на уровне ниже оптимальной. Инфекции

выделение «водянистой» жидкости из уретры. В таких случаях применение

яичка обычно влекут за собой очень неблагоприятный прогноз. Дегенерация

искусственной вагины будет более эффективным. Общая подвижность

яичек может быть вызвана стрессом, токсинами, недостаточным питанием

сперматозоидов оценивается при температуре 37 ^оС путем помещения

или недостатком тепла. Диагностика часто основывается на обследовании

крупной капли спермы на предварительно подогретое предметное стекло

спермы, а степень выздоровления может сильно варьироваться. У некото-

микроскопа для осмотра при малом увеличении. Общая подвижность оце-

рых быков состояние спермы может вернуться в норму в пределах восьми

140

141

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

недель, тогда как у других этот процесс может занять до шести месяцев,

2.7. Пересадка эмбриона

после чего необходимо провести анализ спермы.

Гормональное лечение бесплодных быков имеет ограниченную ценность.

Применение искусственного осеменения помогает быстро достичь улуч-

ГСЖК действует подобно ФСГ и стимулирует сперматогенез. Благодаря

шения генофонда поголовья, что делает возможным более эффективное

своей активности как ЛГ ХГЧ стимулирует выработку тестостерона. ГнРГ

использование производителей высшего качества. Максимально возмож-

может индуцировать кратковременный подъем уровней ФСГ и ЛГ. Для поста-

ная продуктивность коровы заключается в рождении одного теленка в год.

новки правильного диагноза полезно провести клиническое обследование

Методики множественной овуляции и пересадки эмбриона повышают ре-

и ознакомление с подробной историей случая. Только после этого следует

продуктивный потенциал коров-производителей и, тем самым, увеличивают

принимать решение относительно специального лечения или изменений

значимость последних в разведении КРС.

условий содержания быка (включая его отдых).

Некоторые основания для пересадки эмбриона:

Различные патогенные микроорганизмы также могут стать причиной бес-

• получение большего количества телят от ценной высокопродуктивной

плодия быка или передачи инфекции через его семя (Givens и соавт., 2006;

коровы;

2008). Некоторые из них могут оказывать воздействие на плодовитость быка

• улучшение генофонда поголовья;

напрямую, вызывая заболевания репродуктивного тракта или сперматозои-

• упрощение международной перевозки животных;

дов и снижая фертильность. Вирусными патогенными организмами, которые

• предотвращение связанных с акклиматизацией проблем при экспорте

могут ухудшить качество спермы и/или оказать воздействие на репродуктив-

КРС в тропические регионы;

ный тракт быка, являются: герпесвирус КРС 1 (агент инфекционного ринотра-

• (международные) программы разведения быков-производителей;

хеита КРС), ВД КРС. Среди других вирусов, которые передаются через семя:

• индукция многоплодной стельности;

ящур, вирус везикулярного стоматита, вирус чумы и вирус дерматоза. Риск

• получение мясных телят чистой линии из группы молочного поголовья

передачи вируса иммунодефицита КРС и вируса лейкоза КРС через семя

более низкого качества;

крайне низок. Вирус африканской лихорадки может быть обнаружен в семени

• получение потомства от коров, имеющих нарушение фертильности.

быков с виремией и может привести к передаче венерических инфекций.

Tritrichomonas foetus и Campylobacter fetus venerealis передаются половым

Традиционные технологии пересадки эмбриона дают сегодня довольно

путем; они не вызывают заболевания у быка, но могут сохраняться в заморо-

стабильные результаты, и многие практикующие ветеринары имеют по-

женном семени, поэтому чрезвычайно важно, чтобы быки, используемые для

добный опыт в течение 20-ти и более лет (Scherzer и соавт., 2008). Точные

осеменения, особенно естественного осеменения, постоянно проверялись

размеры данной индустрии определить сложно. В 2003 году было переса-

на наличие этих организмов. Среди других микроорганизмов, которые со-

жено более полумиллиона эмбрионов, 40% из них — после заморозки и от-

храняются в семени и могут вызывать бесплодие или передавать инфекции:

таивания и 18% — выращенных in vitro (Betteridge и соавт., 2006). Северная

Brucella abortus, Leptospira spp., Histophilus somnus, Ureaplasma diversum,

Америка по прежнему занимает лидирующее положение (45% пересадок),

Mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis, Chlamydia, Mycobacterium bovis,

а Европа и Южная Америка — по 20% за 2003 г. Недавно такие страны, как

Coxiella burnetii, and Mycoplasma mycoides ssp. Mycoides.

Бразилия и Китай, заняли передовые позиции по производству эмбрионов

Всемирная организация здравоохранения животных установила стан-

КРС. Выращивание эмбрионов в лабораторных условиях является на се-

дарты контроля заболеваний, связанных с выработкой семени. Быков,

годня хорошо организованной и достаточно выгодной процедурой. Более

содержащихся в центрах по сбору семени и искусственному осеменению, не-

100 тыс. эмбрионов, выращенных подобным образом, были пересажены

обходимо ежегодно проверять на наличие бруцеллеза, туберкулеза ВД КРС,

в 2003 году, почти 60% из них — в Южной Америке.

T. foetus, C. foetus и герпесвируса КРС 1. Предкарантинная и карантинная

В 2005 году (последний год, по которому у нас имеются данные) число

проверка должна подтвердить, что бык не является носителем бруцеллеза,

пересаженных эмбрионов, полученных естественным путем или выращенных

туберкулеза, ВД КРС, а также герпесвируса КРС 1. Кроме того, сертифи-

in vitro, продолжает увеличиваться. Однако из более чем 600 тыс. эмбрионов

цированные службы осеменения требуют, чтобы быки были проверены на

in vivo, пересаженных по всему миру, приблизительно половина были свежи-

наличие лептоспироза.

ми и половина замороженными. По контрасту, около 260 тыс. лабораторных

142

143

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

эмбрионов было пересажено таким же способом, большинство из них (около

для оценки физиологической основы и определения будущих профилакти-

70%) — свежими.

ческих мер.

Подробное пошаговое описание производства и пересадки эмбриона

Созревание яйцеклетки в лабораторных условиях и техника культиви-

было опубликовано Mapletoft и Hasler (2005) и Sirard и Coenen (2006).

рования эмбриона связана с процессом клонирования и облегчения осеме-

Для пересадки могут использоваться эмбрионы двух видов.

нения трансгенных коров для производства ценного фармацевтического

• Эмбрионы, выращенные в естественных условиях и изъятые из репро-

белка в молоке. Клонирование взрослой коровы путем пересадки ядра

дуктивного тракта коровы-донора

и производство клонированной трансгенной коровы уже были осуществ-

Это эмбрионы с известным генетическим потенциалом и известным

лены технически. Однако это дорогая и недостаточно развитая на сегодня

анамнезом предков, что дает оптимальную возможность для быстрого

технология, которая может пока применяться только исследовательскими

улучшения генетики в стаде. Однако возможности данного способа

сообществами и фармацевтической промышленностью (Mapletoft и Hasler

относительно ограничены, что связано с такими факторами, как пока-

2007; Galli и Mazzari 2008). В лабораторных условиях оплодотворение путем

затели овуляции после инициированной фармакологическим способом

итро-цитоплазмической инъекции спермы, которая является такой много-

суперовуляции донора, показатели оплодотворяемости и показатели

обещающей при использовании для человека, возможно даже с использо-

сохранения эмбриона. Такие эмбрионы могут быть пересажены на-

ванием сухого замороженного семени, но еще не широко распространено.

прямую реципиенту с синхронизованным циклом или заморожены

Несколько лабораторий сообщили о весьма скромных успехах при получе-

и сохранены в жидком азоте для дальнейшего использования.

нии стельности в результате имплантации эмбрионов, выращенных in vitro

• Эмбрионы, полученные путем созревания и оплодотворения яйце-

на основе яйцеклеток, взятых у телок. Такой подход, возможно, позволит

клетки in vitro

увеличить процент генетических улучшений путем уменьшения интервала

Такие эмбрионы могут быть получены или из яйцеклетки, взятой

между поколениями.

у известного отобранного донора, с помощью выращивания предову-

Международное общество пересадки эмбрионов одобрило серию опре-

ляторного фолликула (так называемая процедура захвата яйцеклетки)

деленных процедур, особенно касающихся зоосанитарии и эпидемиологиче-

или после созревания in vitro незрелой яйцеклетки, полученной из

ских аспектов, для производства и пересадки эмбрионов. Инфекции, такие

яичников животных с бойни. Последний вариант, будучи наиболее

как ВД КРС и ринотрахеит КРС, могут передаваться через эмбрион, поэтому

продуктивным, создает, однако, определенные проблемы, такие как

требуется утверждение определенных процедур, гарантирующих, что эм-

(обычно) неизвестный генетический статус коровы-донора и состояние

брион свободен от данных патогенов. Подробный отчет, предоставленный

ее здоровья.

Givens и соавт. (2008b), обобщает современные рекомендации, касающиеся

Общеизвестно, что эмбрион, полученный в естественных условиях, обла-

здоровья КРС при пересадке эмбриона, призывая исследователей разви-

дает лучшими качествами по сравнению с созревшим и выращенным в ла-

вать и уделять внимание аспектам биобезопасности. Большинство систем

бораторных условиях. Несмотря на хорошие показатели созревания ядра,

коммерческого производства эмбрионов используют культуральную среду,

способности яйцеклетки к росту и развитию различны. Одной из причин

дополненную различными питательными элементами животного происхо-

такой вариативности могут быть внутренние свойства клетки, полученной из

ждения. Также применяются различные профилактические меры (скани-

яичника. Более того, одним из негативных последствий пересадки эмбриона

рование источника, предварительная обработка при высокой температуре

и переносе ядра соматической клетки у КРС и других видов является то, что

и добавка антибиотиков). Такие системы увеличивают риски для здоровья,

эмбрионы, плод, плацента и потомство могут значительно отличаться по

особенно эмбрионов, выращенных в лабораторных условиях (Givens и со-

морфологическим признаками и потенциалу развития от эмбрионов, полу-

авт., 2008). Система, основанная на определенных компонентах, свободных

ченных в естественных условиях (Farin и соавт., 2004; 2006; Lonergan и Farin

от клеточных составляющих, или элементов, полученных из крови, была бы

2008). В целом такие отклонения называются «гигантизм потомства» или

идеальной с точки зрения здоровья и качества. Более того, определенные

«гигантизм телят». Поскольку современные диагностические возможности

химические условия без сыворотки и сывороточных белков могут позволить

выявления возможных аномалий у эмбрионов, полученных в лабораторных

осуществлять точное наблюдение за ростом или другими факторами разви-

условиях, ограничены, требуется проведение дополнительных исследований

тия эмбриона в любой данной среде.

144

145

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Доступны отчеты, описывающие использование среды, в которой каж-

ФСГ

дый компонент полностью или наполовину определен химически (Feugang

Существуют природные препараты ФСГ, получаемые от свиней и овец.

и соавт., 2009).

Поскольку у ФСГ относительно короткий период полувыведения, обычно

его применяют два раза в день. Как правило, дважды в течение 4-5 дней

2.7.1. Подготовка коровы-донора

вводиться 400 мг ФСГ (например, Follitropin^®-V). PGF2α вводиться с целью

индукции лютеолиза 48 или 72 часа спустя после начала лечения. Эструс на-

В естественных условиях у коровы обычно происходит одна овуляция

ступает через 36-48 часов после инъекции простагландина, а овуляция — на

за один половой цикл. Гонадотропная стимуляция яичников может индуци-

24-36 часов позже.

ровать множественную овуляцию (суперовуляция). Хотя техника пересадки

эмбриона широко применяется во всем мире, разнообразие реакции на

ГСЖК/eCG

суперстимуляцию остается важным ограничением. Разнообразие реакции

ГСЖК, сывороточный гонадотропин жеребых кобыл (Folligon^®), имеет

яичников связывается с различиями в лечении суперовуляции, таких как

длительный период полувыведения (40 часов) и присутствует в организме

подготовка ГнРГ, партия и общая доза, продолжительность и время лече-

животного до 10 дней, поэтому достаточно одной инъекции этого препарата.

ния, использование дополнительных гормонов, а также индивидуальные

Рекомендуемая дозировка — от 1500 до 3000 ед., наиболее часто применяе-

особенности животных.

мая — 2500 ед. Через 48 часов после инъекции ГСЖК применение простаг-

Недавние программы, созданные для регулирования фолликулярной

ландина приводит к рассасыванию желтого тела. Donaldson (1983) сообщил

волны и овуляции, все же не способны полностью устранить вариативность

о большей лютеолитической эффективности двух-трех инъекций природного

реакции на суперовуляцию. Однако эти программы оказали положительное

PGF2α, но при использовании его аналогов достаточно одной инъекции.

воздействие на применение коммерческих пересадок эмбриона, позволяя

Длительное стимулирующее воздействие большими дозами ГСЖК может

начать лечение в заранее запланированное время. Более того, программы,

оказать отрицательное влияние на овуляцию и вызвать образование второй

направленные на точную синхронизацию овуляции, позволяют осеменять

фолликулярной волны.

коров в запланированное время, устраняя необходимость выявления при-

Факторы, влияющие на изъятие и пересадку эмбрионов в молочном

знаков охоты во время программы суперстимуляции.

стаде, были описаны Chebel и соавт. (2008).

Согласно данным, полученным в ходе УЗИ, вторая фолликулярная волна

происходит у коров, имеющих двух- трехволновой цикл примерно на 8-12-й

Со стороны животных

день после эструса (7-11-й день после овуляции). В это время когорта расту-

• Стадия цикла. Лучшие результаты возможны, если суперовуляция

щих фолликулов доступна для множественной стимуляции. Однако доказано,

инициируется в середине лютеиновой фазы (9-13-й дни цикла).

что суперовуляторная реакция более эффективна, если лечение гонадотро-

• Фолликулярный статус на момент суперовуляции. Присутствие боль-

пином инициируется в начале фолликулярной волны, а не позднее.

шого доминантного фолликула на момент суперовуляции оказывает

Для инициирования суперовуляции у КРС используются три различных

отрицательное воздействие на реакцию (Guilbault и соавт., 1991).

типа гонадотропинов: ГнРГ из вытяжки гипофиза свиней или других домаш-

• Общее состояние здоровья и упитанность.

них животных (ФСГ); лошадиный хорионический гонадотропин (eCG)/ГСЖК;

• Фаза лактации.

человеческий менопаузальный гонадотропин (МГЧ). На сегодняшний день

наиболее широко в промышленной пересадке эмбрионов для получения

С точки зрения управления и содержания

суперовуляции применяется ГСЖК и ФСГ. Оба вводятся в середине лютеи-

• Общее управление животными (отсутствие стресса, адекватное

новой фазы обычно синхронизованного полового цикла, поскольку было до-

содержание).

казано, что суперовуляция более эффективна, если лечение гонадотропином

• Внешняя температура и относительная влажность среды

начать точно во время фолликулярной волны, а не позже. Поэтому обычно

содержания.

для коров с нормальным циклом применяется лечение, направленное на

регулирование времени фолликулярной волны.

146

147

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

С точки зрения процедуры

• адекватная концентрация прогестерона в организме реципиента во

• Выбранная программа синхронизации и индукции (тип программы

время пересадки (часто связанная с выработкой молока);

и соответствие).

• управление факторами, вызывающими стресс, в том числе тепловым

• Семя/осеменение. Использование высококачественного семени во

стрессом (управление, кормление, содержание и т. д.).

время осеменения через 12-24 часа после начала скрытой половой

охоты. Повторное осеменение не улучшает показатели оплодотворяе-

Даже при пересадке эмбрионов только высокого качества показатели

мости. Существуют различия между быками.

стельности среди реципиентов могут значительно отличаться. McMillan

• Пересадка эмбриона и техника пересадки.

(1998) разработал модель, позволяющую показать вклад донора и реципи-

ента в выживаемость пересаженного эмбриона в течение первых 60-ти дней

Использование прогестагенов, таких как Crestar^®, позволяет точно син-

стельности. Эта модель демонстрирует, что существуют различия в способ-

хронизовать эструс доноров эмбрионов и яйцеклеток. Дополнительные

ности реципиента выносить стельность (качество реципиента) до необхо-

преимущества дает использование прогестагенов, того же качества, что

димого срока, а также в способности эмбриона выжить и развиваться, что

и яйцеклетка/эмбрион, и возможность использования запланированного

и придает вариативность. Достаточно интересно, что качество реципиента

осеменения. Основная программа синхронизации на основе Crestar^® может

не имеет решающего значения при потере стельности до 60-го дня. Модель,

быть объединена с одиночной инъекцией ГСЖК (Folligon^®) или последующи-

предложенная McMillan (1998), позволяет предположить, что в стаде могут

ми инъекциями ФСГ (Folltropin V^®), для индукции суперовуляции.

быть постоянные реципиенты, и на практике многие ветеринары предпочи-

тают выявлять таких животных и использовать их повторно, чтобы ввести

2.7.2. Подготовка коровы реципиента

в стадо нужный генетический материал.

Ввиду большой вариативности сохранения эмбриона обычно выясняется,

2.8. Использование сексированного семени

что подготовлено слишком мало или слишком много животных. Оставшиеся

для осеменения

эмбрионы могут быть заморожены и сохранены в жидком азоте, но для

заморозки отбираются только эмбрионы высокого качества. Их можно пе-

Использование сексированного семени позволяет производителям мо-

ресадить в течение нормального полового цикла или, что более практично,

лока отбирать из своего стада и производить ремонтных телок с прекрасной

в ходе контролируемого цикла, поскольку различий в уровне стельности не

генетикой.

отмечается.

Современные технологии сортировки Х и У-хромосом-несущей спермы

В начале эструса аналог ГнРГ (Receptal^®, Fertagyl^®, 2,5 мл) может исполь-

требуют индивидуальной идентификации и отбора сперматозоидов в высоко-

зоваться для индуцирования и завершения овуляции у коровы-реципиента

скоростном проточном цитометре (обзор Seidel 2007; Garner и Seidel 2008).

в состоянии эструса, синхронизированного с помощью аналогов простаглан-

Потребность в телках стремительно растет, что повышает спрос на сек-

дина. Лучших результатов можно ожидать при более точном определении

сированное семя от быков, имеющих большую генетическую ценность. Успех

времени овуляции и лучшем развитии желтого тела, а также при наличии

этой технологии зависит в основном от оплодотворяющей способности

избытка коров-реципиентов.

сортированных сперматозоидов, поскольку это основной фактор, который,

Среди факторов, оказывающих влияние на успех пересадки эмбрионов

таким образом, является наиболее экономически целесообразным.

у реципиентов (оцененных по показателям стельности/отелов), важнейшими

На сегодняшний день оплодотворяемость различна и зависит от обра-

являются следующие (Peterson и Lee 2003; Looney и соавт., 2006; Vasconcelos

ботки семени после сортировки. Новая техника обработки разрабатывается

и соавт., 2006):

и, возможно, она повысит уровень оплодотворяемости при использовании

• качество эмбриона и соответствующая техника пересадки;

сексированного семени. Отбор наиболее подходящих быков и испытания

• выбранное время пересадки по отношению к половому циклу

отобранных образцов принятым способом являются очень важными для

реципиента;

достижения успеха.

148

149

КРАТКОЕ РУКОВОДСТВО ПО РЕПРОДУКЦИИ ЖИВОТНЫХ: крупный рогатый скот (2009 год) - часть 5