ГОСУДАРСТВЕННАЯ ФАРМАКОПЕЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ. Том III Контроль качества фармацевтических субстанций (2009 год) - часть 19

226

Бактериальные эндотоксины 

(

2.6.14

). 

Менее 0,01 МЕ в МЕ гепарина, если субстанция 
предназначена для производства лекарствен-
ных средств для парентерального применения 
без последующей процедуры удаления бактери-
альных эндотоксинов.

# Пирогенность 

(

2.6.8

). Субстанция должна 

быть апирогенной. Тест-доза — 2000 МЕ в 1 мл 
раствора 9 г/л 

натрия хлорида Р

 на 1 кг массы 

тела кролика. Раствор вводят внутривенно. 

Тест «Пирогенность» проводится в качестве 

альтернативного тесту «Бактериальные эндо-
токсины».

# Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

). 

# Микробиологическая чистота 

(

2.6.12, 

2.6.13, 5.1.4

). Гепарин натрия в условиях испы-

тания не обладает антимикробным действием.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Проводят количественное определение гепа-

рина (

2.7.5

). Полученная активность должна быть 

не менее 90 % и не более 111 % от заявленной ак-
тивности. Результаты испытаний считаются досто-
верными, если границы доверительного интерва-
ла определения (

Р 

= 0,95) составляют от 80 % до 

125 % от заявленного значения активности.

ХРАНЕНИЕ

В воздухонепроницаемом контейнере. 
Стерильная субстанция — в стерильном 

воздухонепроницаемом контейнере с контролем 
первого вскрытия.

МАРКИРОВКА

Указывают:

 

– количество Международных Единиц в 

миллиграмме.

При необходимости указывают:

 

– субстанция пригодна для производства 

лекарственных средств для парентерального 
применения.

 ГИДРОКОРТИЗОН

Hydrocortisonum

HYDROCORTISONE

O

CH

3

HO

CH

3

H

H

H

H

OH

OH

O

C

21

H

30

O

5

 

 М.м. 362,5

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Гидрокортизон содержит не менее 97,0 % и 

не более 103,0 % 11β,17,21-тригидроксипрегн-4-
ен-3,20-диона в пересчете на сухое вещество.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Белый или почти белый кристаллический 

порошок.

Практически нерастворим в воде, умеренно 

растворим в ацетоне и в 96 % спирте, малораст-
ворим в метиленхлориде.

Обладает полиморфизмом (

5.9

).

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Первая идентификация: А, В.
Вторая идентификация: С, D.

А.

 Абсорбционная спектрофотометрия в ин-

фракрасной области (

2.2.24

).

Сравнение

: 

ФСО гидрокортизона 

# или 

спектр, представленный на рисунке 1.

Если полученные спектры отличаются, то 

испытуемый образец и 

ФСО гидрокортизо-

на

 растворяют по отдельности в минимальном 

объеме 

ацетона Р

 и выпаривают на водяной 

бане до сухих остатков, которые используют для 
получения новых спектров.

В.

 Тонкослойная хроматография (

2.2.27

).

Смесь растворителей метанол Р — мети-

ленхлорид Р

 (1:9, 

об/об

).

Испытуемый раствор.

 10 мг испытуемо-

го образца растворяют в смеси растворите-
лей и доводят до объема 10 мл этим же раст-
ворителей.

Раствор сравнения (а). 

20 мг 

ФСО гидро-

кортизона 

растворяют в смеси в смеси раст-

ворителей и доводят до объема 20 мл этим же 
растворителем.

Раствор сравнения (b). 

10 мг 

преднизоло-

на Р 

растворяют в растворе сравнения (а) и до-

водят до объема 10 мл этим же растворителем.

Пластинка

: 

ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля F

254

 Р

.

Подвижная фаза

: последовательно хрома-

тографируют сначала с использованием подвиж-
ной фазы, состоящей из смеси 1,2 объема 

воды 

Р

 и 8 объемов 

метанола

 

Р

 прибавленной к смеси 

из 15 объемов 

эфира Р

 и 77 объемов 

метилен-

хлорида Р

, а затем с использованием подвижной 

фазы, состоящей из 

бутанола Р

, насыщенного 

водой Р

, 

толуола Р

 и 

эфира Р

 (5:15:80, 

об/об/об

).

Наносимый объем пробы

: 5 мкл.

Фронт подвижной фазы: 

не менее 15 см от 

линии старта при каждом элюировании.

Высушивание

: на воздухе.

Проявление А

: пластинку просматрива-

ют в ультрафиолетовом свете при длине волны 
254 нм.

Результаты А

: на хроматограмме испыту-

емого раствора обнаруживается пятно, соответ-
ствующее по расположению и размеру основному 
пятну на хроматограмме раствора сравнения (а).

227

Гидрокортизон

Проявление В

: пластинку опрыскивают 

раствором кислоты серной спиртовым Р

 и 

нагревают при температуре 120°С в течение 
10 мин или до проявления пятен и охлаждают. 
Просматривают при дневном свете и в ультра-
фиолетовом свете при длине волны 365 нм.

Результаты В

: на хроматограмме испы-

туемого раствора обнаруживается пятно, со-
ответствующее по расположению, размеру и 
цвету при просматривании при дневном свете 
и флуо-ресценции при просмотре в ультра-
фиолетовом свете при длине волны 365 нм 
основному пятну на хроматограмме раствора 
сравнения (а).

Пригодность хроматографической си-

стемы

: раствор сравнения (b):

 

– на хроматограмме обнаруживаются два 

полностью разделенных пятна.

С.

 Тонкослойная хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор (a).

 25 мг испытуе-

мого образца растворяют в 

метаноле Р

 и до-

водят до объема 5 мл этим же растворителем 
(раствор А). 2 мл полученного раствора дово-
дят 

метиленхлоридом Р

 до объема 10 мл.

Испытуемый раствор (b).

 0,4 мл раст-

вора А помещают в стеклянную пробирку 
длиной 100 мм и диаметром 20 мм со шлифом 
или с подходящей пробкой из политетрафто-
рэтилена и выпаривают растворитель при 
слабом нагревании и под током 

азота Р

. При-

бавляют 2 мл раствора

 

15 %  (

об/об

) 

кислоты 

уксусной ледяной Р

 и 50 мг 

натрия висмута-

та Р

, пробирку закрывают и встряхивают по-

лученную суспензию в течение 1 ч на меха-

ническом встряхивателе, защищая раствор 
от света. Прибавляют 2 мл раствора

 

15 %  (

об/

об

) 

кислоты уксусной ледяной Р

 и фильтруют 

в делительную воронку вместимостью 50 мл, 
промывая фильтр двумя порциями

 воды Р

 по 

5 мл каждая. Прозрачный фильтрат встря-
хивают с 10 мл 

метиленхлорида Р

. Органи-

ческий слой промывают 5 мл 

1 М раствора 

натрия гидроксида

 и двумя порциями

 воды Р

 

по 5 мл каждая и высушивают с использова-
нием 

натрия сульфата безводного Р.

Раствор сравнения (а). 

25 мг 

ФСО гидро-

кортизона 

растворяют в 

метаноле Р

 и дово-

дят до объема 5 мл этим же растворителем 
(раствор В). 2 мл полученного раствора дово-
дят 

метиленхлоридом Р

 до объема 10 мл.

Раствор сравнения (b). 

0,4 мл раствора 

В помещают в стеклянную пробирку длиной 
100 мм и диаметром 20 мм со шлифом или 
с подходящей пробкой из политетрафторэти-
лена и выпаривают растворитель при слабом 
нагревании и под током 

азота Р

. Прибавля-

ют 2 мл раствора

 

15 %  (

об/об

) 

кислоты ук-

сусной ледяной Р

 и 50 мг 

натрия висмута-

та Р

, пробирку закрывают и встряхивают по-

лученную суспензию в течение 1 ч на меха-
ническом встряхивателе, защищая раствор 
от света. Прибавляют 2 мл раствора

 

15 %  (

об/

об

) 

кислоты уксусной ледяной Р

 и фильтруют 

в делительную воронку вместимостью 50 мл, 
промывая фильтр двумя порциями

 воды Р

 по 

5 мл каждая. Прозрачный фильтрат встря-
хивают с 10 мл 

метиленхлорида Р

. Органи-

ческий слой промывают 5 мл 

1 М раствора 

Рисунок 1. 

Инфракрасный спектр пропускания ФСО гидрокортизона.

 62

 64

 66

 68

 70

 72

 74

 76

 78

 80

 82

 84

 86

 88

 90

 92

 94

 96

 98

Пропускание

 1000 

 1500 

 2000 

 2000 

 3000 

Волновое  число  (см

-1

)

228

натрия гидроксида

 и двумя порциями

 воды Р

 

по 5 мл каждая и высушивают с использова-
нием 

натрия сульфата безводного Р.

Пластинка

: 

ТСХ пластинка со слоем си-

ликагеля F

254

 Р

.

Подвижная фаза

: последовательно хро-

матографируют сначала с использовани-
ем подвижной фазы, состоящей из смеси 1,2 
объема 

воды Р

 и 8 объемов 

метанола

 

Р,

 при-

бавленного к смеси из 15 объемов 

эфира Р

 и 

77 объемов 

метиленхлорида Р

, а затем с ис-

пользованием подвижной фазы, состоящей из 

бутанола Р

, насыщенного 

водой Р

, 

толуола 

Р

 и 

эфира Р

 (5:15:80, 

об/об/об

).

Наносимый объем пробы

: по 5 мкл испы-

туемого раствора (а) и раствора сравнения (а) 
и по 25 мкл испытуемого раствора (b) и раст-
вора сравнения (b), последние два раствора 
наносят малыми количествами для получения 
пятен небольшого размера.

Фронт подвижной фазы

: не менее 15 см 

от линии старта при каждом элюировании.

Высушивание

: на воздухе.

Проявление А

: пластинку просматривают 

в ультрафиолетовом свете при длине волны 
254 нм.

Результаты А

: основные пятна на хро-

матограммах испытуемых растворов соответ-
ствуют по расположению и размеру основным 
пятнам на хроматограммах соответствующих 
растворов сравнения.

Проявление В

: пластинку опрыскивают 

раствором кислоты серной спиртовым Р

 и 

нагревают при температуре 120°С в течение 
10 мин или до проявления пятен и охлаждают. 
Просматривают при дневном свете и в ультра-
фиолетовом свете при длине волны 365 нм.

Результаты В

: основные пятна на хро-

матограммах испытуемых растворов соответ-
ствуют по расположению, размеру и цвету при 
просматривании при дневном свете и флуо-
ресценции при просмотре в ультрафиолето-
вом свете при длине волны 365 нм основным 
пятнам на хроматограммах соответствующих 
растворов сравнения. Значения 

R

f

 основных 

пятен на хроматограммах испытуемого раст-
вора (b) и раствора сравнения (b) заметно 
выше значений 

R

f

 основных пятен на хрома-

тограммах испытуемого раствора (а) и раст-
вора сравнения (а).

D.

 2 мг испытуемого образца прибав-

ляют к 2 мл 

кислоты серной Р

 и встря-

хивают до растворения. В течение 5 мин 
появляется интенсивное коричневато-
красное окрашивание и зеленая флуо-
ресценция при просматривании в ультрафио-
летовом свете при длине волны 365 нм. Полу-
ченный раствор прибавляют к 10 мл 

воды Р

 

и перемешивают. Окраска исчезает, а раствор 
остается прозрачным. Флуоресценция при 
просматривании в ультрафиолетовом свете 
при длине волны 365 нм не исчезает.

ИСПЫТАНИЯ

Удельное оптическое вращение

  (

2.2.7

). 

От +150 до +156 в пересчете на сухое веще-
ство. 0,250 г испытуемого образца растворяют 
в 

диоксане Р

 и доводят до объема 25,0 мл 

этим же растворителем.

Сопутствующие примеси

. Жидкостная 

хроматография

 

(

2.2.29

). 

Растворы готовят 

непосредственно перед использованием

.

Испытуемый раствор.

 25,0 мг испыту-

емого образца растворяют в 2 мл 

тетраги-

дрофурана Р

 и доводят 

водой Р

 до объема 

10,0 мл.

Раствор сравнения (а). 

2 мг 

ФСО гидро-

кортизона 

и 2 мг 

ФСО преднизолона 

раство-

ряют в подвижной фазе и доводят до объема 
100,0 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (b). 

1,0 мл испытуе-

мого раствора доводят подвижной фазой до 
объема 100,0 мл.

Условия хроматографирования:

 

–

колонка

 из нержавеющей стали длиной 

0,25 м и внутренним диаметром 4,6 мм, за-
полненная 

силикагелем октадецилсилиль-

ным, деактивированным по отношению к 
основаниям, эндкепированным для хромато-
графии Р 

с размером частиц 5 мкм;

 

–

температура

: 45°С;

 

–

подвижная фаза

: смешивают 220 мл 

тетрагидрофурана Р

 с 700 мл 

воды Р

, вы-

держивают до установления равновесия, до-
водят 

водой Р

 до объема 1000,0 мл и пере-

мешивают;

 

–

скорость подвижной фазы

: 1 мл/мин;

 

–

спектрофотометрический детектор

, 

длина волны 254 нм;

 

–

уравновешивание колонки

: не менее 

30 мин со скоростью подвижной фазы 
1 мл/мин;

 

–

объем вводимой пробы

: по 20 мкл испы-

туемого раствора, растворов сравнения (а) и 
(b); 20 мкл подвижной фазы в качестве кон-
трольного опыта;

 

–

время хроматографирования

: 4-крат-

ное время удерживания гидрокортизона.

Времена удерживания

: преднизо-

лон — около 14 мин; гидрокортизон — около 
15,5 мин.

Пригодность хроматографической си-

стемы

: раствор сравнения (а):

 

–

разрешение

: не менее 2,2 между пиками 

преднизалона и гидрокортизона. При необхо-
димости изменяют содержание тетрагидро-
фурана в подвижной фазе.

Предельное содержание примесей

:

 

–

любая примесь

 (не более 0,5 %): на хро-

матограмме испытуемого раствора площадь 
любого пика, кроме основного, не должна пре-
вышать 0,5 площади основного пика на хро-
матограмме раствора сравнения (b);

 

–

сумма примесей

 (не более 1,5 %): на 

хроматограмме испытуемого раствора сумма 

229

Гидрокортизона ацетат

площадей всех пиков, кроме основного, не 
должна превышать 1,5-кратную площадь 
основного пика на хроматограмме раствора 
сравнения (b).

На хроматограмме испытуемого раствора 

не учитывают пики с площадью менее 0,05 
площади основного пика на хроматограмме 
раствора сравнения (b) (0,05 %).

Потеря в массе при высушивании

 

(

2.2.32

). Не более 1,0 %. 0,500 г испытуемого 

образца сушат при температуре 105°С.

# Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

#

 

Микробиологическая чистота 

(

2.6.12, 

2.6.13, 5.1.4

). Гидрокортизон в условиях испы-

тания не обладает антимикробным действием.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

0,100 г испытуемого образца растворяют в 

96 % спирте Р 

и доводят до объема 100,0 мл 

этим же растворителем. 2,0 мл полученного 
раствора доводят 

96 % спиртом Р

 до объема 

100,0 мл. Измеряют оптическую плотность 
(

2.2.25

) полученного раствора в максимуме при 

длине волны 241,5 нм.

Содержание С

21

Н

30

O

5

 рассчитывают с 

учетом удельного показателя поглощения, рав-
ного 440.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

ПРИМЕСИ

А. Преднизолон.
В. Кортизон.
С. Гидрокортизона ацетат.

O

CH

3

R2

CH

3

H

H

H

H

OH

R3

O

H

R1

D. R1 = R2 = OH, R3 = CH

2

OH: 6β,11β,17,21-

Тетрагидроксипрегн-4-ен-3,20-дион (6β-гидро-
ксигидрокортизон).

F. R1 = R2 = H, R3 = CH

2

OH: 17,21-Дигидро-

ксипрегн-4-ен-3,20-дион (вещество Рейштейна 
(Reichstein)).

G. R1 = H, R2 = OH, R3 =CHO: 11β,17-Ди-

гидрокси-3,20-диоксопрегн-4-ен-21-аль.

O

CH

3

HO

CH

3

H

H

H

H

OH

OH

O

E. 11β,17,21-Тригидроксипрегна-4,6-диен-

3,20-дион (∆6-гидрокортизон).

 ГИДРОКОРТИЗОНА АЦЕТАТ

Hydrocortisoni acetas

HYDROCORTISONE AСETATE

O

CH

3

HO

CH

3

H

H

H

H

OH

O

O

CH

3

O

C

23

H

32

O

6

 

 М.м. 404,5

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Гидрокортизона ацетат содержит не менее 

97,0 % и не более 103,0 % 11β,17-дигидрокси-
3,20-диоксопрегн-4-ен-21-илацетата в пересче-
те на сухое вещество.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Белый или почти белый кристаллический 

порошок.

Практически нерастворим в воде, малораст-

ворим в этаноле и в метиленхлориде.

Температура плавления: около 220°С с раз-

ложением.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Первая идентификация: А, В.
Вторая идентификация: С, D, Е.

А.

 Абсорбционная спектрофотометрия в ин-

фракрасной области (

2.2.24

).

Сравнение: ФСО гидрокортизона ацета-

та

 

#

 или спектр, представленный на рисунке 1.

В.

 Тонкослойная хроматография (

2.2.27

).

Смесь растворителей. Метанол Р — ме-

тиленхлорид Р

 (1:9, 

об/об

).

Испытуемый раствор.

 10 мг испытуемого 

образца растворяют в смеси растворителей и до-
водят до объема 10 мл этим же растворителей.

Раствор сравнения (а). 

20 мг 

ФСО гидро-

кортизона ацетата 

растворяют в смеси в смеси 

растворителей и доводят до объема 20 мл этим 
же растворителем.

Раствор сравнения (b). 

10 мг 

кортизона 

ацетата Р 

растворяют в растворе сравнения 

(а) и доводят до объема 10 мл этим же раство-
рителем.

Пластинка

: 

ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля F

254

 Р

.

Подвижная фаза

: смесь из 1,2 объема 

воды 

Р

 и 8 объемов 

метанола

 

Р

 прибавляют к смеси 

из 15 объемов 

эфира Р

 и 77 объемов 

метилен-

хлорида Р

.

Наносимый объем пробы

: 5 мкл.

Фронт подвижной фазы

: не менее 15 см от 

линии старта.

230

Высушивание

: на воздухе.

Проявление А

: пластинку просматрива-

ют в ультрафиолетовом свете при длине волны 
254 нм.

Результаты А

: на хроматограмме испыту-

емого раствора обнаруживается пятно, соответ-
ствующее по расположению и размеру основному 
пятну на хроматограмме раствора сравнения (а).

Проявление В

: пластинку опрыскивают 

рас-

твором кислоты серной спиртовым Р

 и нагре-

вают при температуре 120°С в течение 10 мин 
или до проявления пятен и охлаждают. Просма-
тривают при дневном свете и в ультрафиолето-
вом свете при длине волны 365 нм.

Результаты В

: на хроматограмме испыту-

емого раствора обнаруживается пятно, соответ-
ствующее по расположению, размеру и цвету 
при просматривании при дневном свете и флу-
оресценции при просмотре в ультрафиолетовом 
свете при длине волны 365 нм основному пятну 
на хроматограмме раствора сравнения (а).

Пригодность хроматографической систе-

мы

: раствор сравнения (b):

 

– на хроматограмме обнаруживаются два 

полностью разделенных пятна.

С.

 Тонкослойная хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор (a).

 25 мг испытуемо-

го образца растворяют в 

метаноле Р

 и доводят 

до объема 5 мл этим же растворителем (раст-
вор А). 2 мл полученного раствора доводят 

ме-

тиленхлоридом Р

 до объема 10 мл.

Испытуемый раствор (b).

 2 мл раствора 

А помещают в стеклянную пробирку вмести-

мостью 15 мл со шлифом или с подходящей 
пробкой из политетрафторэтилена, прибавляют 
10 мл 

раствора калия гидрокарбоната мета-

нольного насыщенного Р

 и немедленно пропу-

скают струю 

азота Р

 через раствор в течение 

5 мин. Пробирку закрывают пробкой, нагрева-
ют в водяной бане при температуре 45°С, за-
щищая раствор от света, в течение 2 ч 30 мин 
и охлаждают.

Раствор сравнения (а). 

25 мг 

ФСО гидро-

кортизона ацетата 

растворяют в 

метаноле Р

 

и доводят до объема 5 мл этим же растворите-
лем (раствор В). 2 мл полученного раствора до-
водят 

метиленхлоридом Р

 до объема 10 мл.

Раствор сравнения (b).

 2 мл раствора В по-

мещают в стеклянную пробирку вместимостью 
15 мл со шлифом или с подходящей пробкой 
из политетрафторэтилена, прибавляют 10 мл 

раствора калия гидрокарбоната метанольно-
го насыщенного Р

 и немедленно пропускают 

струю 

азота Р

 через раствор в течение 5 мин. 

Пробирку закрывают пробкой, нагревают в водя-
ной бане при температуре 45°С, защищая раст-
вор от света, в течение 2 ч 30 мин и охлаждают.

Пластинка

: 

ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля F

254

 Р

.

Подвижная фаза

: смесь из 1,2 объема 

воды 

Р

 и 8 объемов 

метанола

 

Р

 прибавляют к смеси 

из 15 объемов 

эфира Р

 и 77 объемов 

метилен-

хлорида Р

.

Наносимый объем пробы

: 5 мкл.

Фронт подвижной фазы

: не менее 15 см от 

линии старта.

Рисунок 1. 

Инфракрасный спектр пропускания ФСО гидрокортизона ацетата.

 

 55

 60

 65

 70

 75

 80

 85

 90

 95

Пропускание

 1000 

 1500 

 2000 

 2000 

 3000 

Волновое  число  (см

-1

)

231

Гидрокортизона ацетат

Высушивание

: на воздухе.

Проявление А

: пластинку просматривают 

в ультрафиолетовом свете при длине волны 
254 нм.

Результаты А

: основные пятна на хро-

матограммах испытуемых растворов соответ-
ствуют по расположению и размеру основным 
пятнам на хроматограммах соответствующих 
растворов сравнения.

Проявление В

: пластинку опрыскивают 

раствором кислоты серной спиртовым Р

 и 

нагревают при температуре 120°С в течение 
10 мин или до проявления пятен и охлаждают. 
Просматривают при дневном свете и в ультра-
фиолетовом свете при длине волны 365 нм.

Результаты В

: основные пятна на хро-

матограммах испытуемых растворов соответ-
ствуют по расположению, размеру и цвету при 
просматривании при дневном свете и флуо-
ресценции при просмотре в ультрафиолето-
вом свете при длине волны 365 нм основным 
пятнам на хроматограммах соответствующих 
растворов сравнения. Значения 

R

f

 основных 

пятен на хроматограммах испытуемого раст-
вора (b) и раствора сравнения (b) заметно 
ниже значений 

R

f

 основных пятен на хромато-

граммах испытуемого раствора (а) и раствора 
сравнения (а).

D.

 2 мг испытуемого образца прибавля-

ют к 2 мл 

кислоты серной Р

 и встряхивают 

до растворения. В течение 5 мин появляет-
ся интенсивное коричневато-красное окра-
шивание с зеленой флуоресценцией при про-
сматривании в ультрафиолетовом свете при 
длине волны 365 нм. Полученный раствор 
прибавляют к 10 мл 

воды Р

 и перемешива-

ют. Окрашивание исчезает, а флуоресценция 
не исчезает.

Е.

 10 мг испытуемого образца дают реак-

цию на ацетил (

2.3.1

).

ИСПЫТАНИЯ

Удельное оптическое вращение

  (

2.2.7

). 

От +158 до +167 в пересчете на сухое вещество. 
0,250 г испытуемого образца растворяют в 

диокса-

не Р

 и доводят до объема 25,0 мл этим же раство-

рителем.

Сопутствующие примеси

. Жидкостная хро-

матография

 

(

2.2.29

).

Испытуемый раствор.

 25,0 мг испытуемого 

образца растворяют в 

метаноле Р

 и доводят до 

объема 10,0 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (а). 

2 мг 

ФСО гидрокорти-

зона ацетата 

и 2 мг 

кортизона ацетата Р 

раст-

воряют в подвижной фазе и доводят до объема 
100,0 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (b). 

1,0 мл испытуемо-

го раствора доводят подвижной фазой до объема 
100,0 мл.

Условия хроматографирования:

 

–

колонка

 длиной 0,25 м и внутренним диа-

метром 4,6 мм, заполненная 

силикагелем окта-

децилсилильным для хроматографии Р 

с раз-

мером частиц 5 мкм;

 

–

подвижная фаза

: 400 мл 

ацетонитрила Р

 

смешивают с 550 мл 

воды Р

, выдерживают до 

установления равновесия, доводят 

водой Р

 до 

объема 1000,0 мл и перемешивают;

 

–

скорость подвижной фазы

: 1 мл/мин;

 

–

спектрофотометрический детектор

, 

длина волны 254 нм;

 

–

уравновешивание колонки

: не менее 30 мин;

 

–

объем вводимой пробы

: 20 мкл;

 

–

время хроматографирования

: 2,5-кратное 

время удерживания гидрокортизона ацетата.

Времена удерживания

: гидрокортизона ацетат — 

около 10 мин; кортизона ацетат — около 12 мин.

Пригодность хроматографической систе-

мы

: раствор сравнения (а):

 

–

разрешение

: не менее 4,2 между пиками 

гидрокортизона ацетата и кортизона ацетата; 
при необходимости изменяют содержание аце-
тонитрила в подвижной фазе.

Предельное содержание примесей

:

 

–

любая примесь

: на хроматограмме испытуе-

мого раствора площадь любого пика, кроме основ-
ного, не должна превышать площадь основного 
пика на хроматограмме раствора сравнения (b) 
(1,0 %); площадь не более одного из таких пиков 
может превышать 0,5 площади основного пика на 
хроматограмме раствора сравнения (b) (0,5 %);

 

–

сумма примесей

 (не более 1,5 %): на хро-

матограмме испытуемого раствора сумма пло-
щадей всех пиков, кроме основного, не должна 
превышать 1,5-кратную площадь основного пика 
на хроматограмме раствора сравнения (b).

На хроматограмме испытуемого раствора не 

учитывают пики с площадью менее 0,05 площади 
основного пика на хроматограмме раствора срав-
нения (b) (0,05 %).

Потеря в массе при высушивании

 (

2.2.32

). 

Не более 0,5 %. 0,500 г испытуемого образца 
сушат при температуре 105°С.

# Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

#

 

Микробиологическая чистота 

(

2.6.12, 

2.6.13, 5.1.4

). Гидрокортизона ацетат в условиях ис-

пытания не обладает антимикробным действием.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

0,100 г испытуемого образца растворяют в 

96 % спирте Р 

и доводят до объема 100,0 мл 

этим же растворителем. 2,0 мл полученного 
раствора доводят 

96 % спиртом Р

 до объема 

100,0 мл. Измеряют оптическую плотность 
(

2.2.25

) полученного раствора в максимуме при 

длине волны 241,5 нм.

Содержание С

23

Н

32

O

6

 рассчитывают с 

учетом удельного показателя поглощения, рав-
ного 395.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

232

 45

 50

 55

 60

 65

 70

 75

 80

 85

 90

 95

 100

Пропускание

 500 

 1000 

 1500 

 2000 

 2000 

 3000 

Волновое  число  (см

-1

)

 ГИДРОКСИКАРБАМИД

Hydroxycarbamidum

HYDROXYCARBAMIDE

H

2

N

N

H

O

OH

CH

4

N

2

O

2

 

 М.м. 76,1

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Гидроксикарбамид содержит не менее 

97,5 % и не более 102,0 % 

N

-гидроксимочевины.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Белый или почти белый кристаллический 

порошок. Гигроскопичен.

Легкорастворим в воде, практически нераст-

ворим в 96 % спирте.

Обладает полиморфизмом (

5.9

).

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

А.

 Абсорбционная спектрофотометрия в ин-

фракрасной области (

2.2.24

).

Сравнение

: 

ФСО гидроксикарбамида 

# или 

спектр, представленный на рисунке 1.

Если полученные спектры отличаются, то 

испытуемый образец и 

ФСО гидроксикарбами-

да 

растворяют по отдельности в 

96 % спирте Р

, 

выпаривают до сухих остатков, которые исполь-
зуют для получения новых спектров.

В.

 Просматривают хроматограммы, полу-

ченные в испытании «Мочевина». На хромато-

грамме испытуемого раствора обнаруживается 
основное пятно, соответствующее по располо-
жению и размеру основному пятну на хромато-
грамме раствора сравнения (с).

ИСПЫТАНИЯ

Мочевина

. Не более 0,5 %. Тонкослойная 

хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор

. 50 мг испытуемо-

го образца растворяют в 

воде Р

 и доводят до 

объема 1,0 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (а)

. 12,5 мг 

мочевины Р

 

растворяют в 

воде Р

 и доводят до объема 50 мл 

этим же растворителем.

Раствор сравнения (b)

. 5 мг испытуемого об-

разца и 5 мг 

мочевины Р

 растворяют в 

воде Р

 и 

доводят до объема 20 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (c)

. 50 мг 

ФСО гидрок-

сикарбамида

 растворяют в 

воде Р

 и доводят до 

объема 1,0 мл этим же растворителем.

Пластинка

: 

ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля Р

.

Подвижная фаза

: 

пиридин Р — вода Р — 

этилацетат Р

 (2:2:10, 

об/об/об

).

Наносимый объем пробы

: 10 мкл.

Фронт подвижной фазы

: не менее 2/3 

высоты пластинки.

Высушивание

: на воздухе.

Проявление

: пластинку опрыскивают раство-

ром 10 г/л 

диметиламинобензальдегида Р

 в 

1 М 

растворе кислоты хлористоводородной

.

Пригодность хроматографической систе-

мы

: раствор сравнения (b):

 

– на хроматограмме должны обнаруживать-

ся два полностью разделенных пятна.

Рисунок 1.

 Инфракрасный спектр пропускания ФСО гидроксикарбамида.

233

Гидрохлортиазид

Результаты

: на хроматограмме испытуе-

мого раствора пятно, соответствующее мочеви-
не, должно быть не интенсивнее соответствую-
щего пятна на хроматограмме раствора сравне-
ния (а).

Сопутствующие примеси

. Жидкостная 

хроматография (

2.2.29

).

Испытуемый раствор (а)

. 0,100 г испыту-

емого образца растворяют в подвижной фазе и 
доводят до объема 10,0 мл этим же растворите-
лем.

Испытуемый раствор (b)

. 5,0 мл испытуе-

мого раствора (а) доводят подвижной фазой до 
объема 50,0 мл.

Раствор сравнения (а)

. 

Раствор гото-

вят непосредственно перед использованием

. 

0,100 г 

гидроксиламина гидрохлорида Р

 и 5 мг 

испытуемого образца растворяют в подвижной 
фазе и доводят до объема 10,0 мл этим же раст-
ворителем.

Раствор сравнения (b)

. 0,1 мл испытуемо-

го раствора (а) доводят подвижной фазой до 
объема 100,0 мл.

Раствор сравнения (c)

. 0,100 г 

ФСО гидрок-

сикарбамида

 растворяют в подвижной фазе и 

доводят до объема 10,0 мл этим же растворите-
лем. 5,0 мл полученного раствора доводят под-
вижной фазой до объема 50,0 мл.

Условия хроматографирования:

 

–

колонка

 длиной 0,25 м и внутренним диа-

метром 4,6 мм, заполненная 

силикагелем окта-

децилсилильным для хроматографии Р

 с раз-

мером частиц 5 мкм;

 

–

подвижная фаза

: 

метанол Р — вода Р

 

(5:95, 

об/об

);

 

–

скорость подвижной фазы

: 0,5 мл/мин;

 

–

спектрофотометрический детектор

, 

длина волны 214 нм;

 

–

объем вводимой пробы

: по 20 мкл испы-

туемого раствора (а) и растворов сравнения 
(а) и (b);

 

–

время хроматографирования

: 3-кратное 

время удерживания гидроксикарбамида.

Пригодность хроматографической систе-

мы

: раствор сравнения (а):

 

–

разрешение

: не менее 1,0 между пиками 

примеси А и гидроксикарбамида.

Предельное содержание примесей

:

 

–

любая примесь

 (не более 0,1 %): на хро-

матограмме испытуемого раствора площадь 
любого пика, кроме основного, не должна пре-
вышать площадь основного пика на хромато-
грамме раствора сравнения (b);

 

–

сумма примесей

 (не более 0,2 %): на хро-

матограмме испытуемого раствора сумма пло-
щадей всех пиков, кроме основного, не должна 
превышать 2-кратную площадь основного пика 
на хроматограмме раствора сравнения (b).

На хроматограмме испытуемого раствора 

не учитывают пики с площадью менее 0,2 пло-
щади основного пика раствора сравнения (b) 
(0,02 %).

Хлориды

 (

2.4.4

). Не более 0,005 % (50 ppm). 

1,0 г испытуемого образца растворяют в 

воде Р

 

и доводят до объема 15 мл этим же растворите-
лем. Полученный раствор должен выдерживать 
испытание на хлориды.

Тяжелые металлы

  (

2.4.8, метод А

). Не 

более 0,001 % (10 ppm). 2,0 г испытуемого об-
разца растворяют в 

воде Р

 и доводят до объема 

20 мл этим же растворителем. 12 мл полученно-
го раствора должны выдерживать испытание на 
тяжелые металлы. Эталон готовят с использова-
нием 

эталонного раствора свинца (1 ppm Pb) Р

.

Вода

 (

2.5.12

). Не более 0,5 %. Определение 

проводят из 2,00 г испытуемого образца.

Сульфатная зола

 (

2.4.14

). Не более 0,1 %. 

Определение проводят из 1,0 г испытуемого об-
разца.

#

 

Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

#

 

Микробиологическая чистота 

(

2.6.12, 

2.6.13, 5.1.4

). Гидроксикарбамид в условиях ис-

пытания не обладает антимикробным действием.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Жидкостная хроматография (2.2.29), как 

указано в испытании «Сопутствующие приме-
си», со следующими изменениями.

Объем вводимой пробы

: по 20 мкл испытуе-

мого раствора (b) и раствора сравнения (с).

ХРАНЕНИЕ

В воздухонепроницаемом контейнере в за-

щищенном от света месте.

ПРИМЕСИ

А. H

2

N-OH: Гидроксиламин.

 ГИДРОХЛОРТИАЗИД

Hydrochlorothiazidum

HYDROCHLOROTHIAZIDE

N

H

NH

S

Cl

S

O

O

H

2

N

O

O

C

7

H

8

СlN

3

O

4

S

2

 

 М.м. 297,7

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Гидрохлортиазид содержит не менее 98,0 % 

и не более 102,0 % 6-хлор-3,4-дигидро-2

Н

-1,2,4-

бензотиадиазин-7-сульфонамида-1,1-диоксида 
в пересчете на сухое вещество.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Белый или почти белый кристаллический 

порошок.

234

Очень мало растворим в воде, растворим 

в ацетоне, умеренно растворим в 96 % спирте. 
Растворяется в разведенных растворах гидрок-
сидов щелочных металлов.

Обладает полиморфизмом (

5.9

).

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Первая идентификация: В.
Вторая идентификация: А, С, D.

А.

 Абсорбционная спектрофотометрия в 

ультрафиолетовой и видимой областях (

2.2.25

).

 

Испытуемый раствор. 

50,0 мг испытуе-

мого образца растворяют в 10 мл 

0,1 М раст-

вора натрия гидроксида

 и доводят 

водой Р

 до 

объема 100,0 мл. 2,0 мл полученного раствора 
доводят 

0,01 М раствором натрия гидроксида

 

до объема 100,0 мл.

Диапазон длин волн

: от 250 нм до 350 нм.

Максимумы поглощения

: при 273 нм и при 

323 нм.

Отношение оптических плотностей

: 

А

273

/А

323

 — от 5,4 до 5,7.

В.

 Абсорбционная спектрофотометрия в ин-

фракрасной области (

2.2.24

).

Сравнение

: 

ФСО гидрохлортиазида # 

или 

спектр, представленный на рисунке 1.

Если полученные спектры отличаются, то 

испытуемый образец и 

ФСО гидрохлортиази-

да 

растворяют по отдельности в минимальном 

количестве 

этанола Р1

 и выпаривают до сухих 

остатков, которые используют для получения 
новых спектров.

С.

 Тонкослойная хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор. 

50 мг испытуемо-

го образца растворяют в 

ацетоне Р

 и дово-

дят до объема 10 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (а). 

50 мг 

ФСО гидрох-

лортиазида 

растворяют в 

ацетоне Р

 и дово-

дят до объема 10 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (b).

 25 мг 

хлортиази-

да Р

 растворяют в растворе сравнения (а) и до-

водят до объема 5 мл этим же растворителем.

Пластинка

: 

ТСХ пластинка со слоем си-

ликагеля F

254

 Р

.

Подвижная фаза

: 

этилацетат Р

.

Наносимый объем пробы

: 2 мкл.

Фронт подвижной фазы

: не менее 10 см 

от линии старта.

Высушивание

: в потоке воздуха.

Проявление

: пластинку просматривают 

в ультрафиолетовом свете при длине волны 
254 нм. 

Пригодность хроматографической си-

стемы

: раствор сравнения (b):

 

– на хроматограмме обнаруживаются два 

полностью разделенных пятна.

Результаты

: на хроматограмме испы-

туемого раствора обнаруживается пятно, со-
ответствующее по расположению и размеру 
основному пятну на хроматограмме раствора 
сравнения (а).

D.

 К 1 мг испытуемого образца прибав-

ляют 2 мл свежеприготовленного раствора 
0,5 г/л 

натриевой соли хромотроповой кис-

лоты

 

Р

 в охлажденной смеси 

вода Р

 — 

кисло-

та серная Р

 (35:65, 

об/об

) и осторожно нагре-

вают. Появляется фиолетовое окрашивание.

Рисунок 1. 

Инфракрасный спектр пропускания

 

ФСО гидрохлортиазида

.

 

 54

 56

 58

 60

 62

 64

 66

 68

 70

 72

 74

 76

 78

 80

 82

 84

 86

 88

 90

 92

 94

 96

Пропускание

 1000 

 1500 

 2000 

 2000 

 3000 

Волновое  число  (см

-1

)

235

Гидрохлортиазид

ИСПЫТАНИЯ

Кислотность или щелочность

. 0,5 г из-

мельченного испытуемого образца встряхива-
ют с 25 мл 

воды Р

 в течение 2 мин и фильтру-

ют. К 10 мл полученного фильтрата прибавля-
ют 0,2 мл 

0,01 М раствора натрия гидроксида 

и 0,15 мл 

раствора метилового красного Р

. 

Должно появиться желтое окрашивание. При 
прибавлении не более 0,4 мл 

0,01 М раствора 

кислоты хлористоводородной

 окраска раст-

вора должна измениться на красную.

Сопутствующие примеси

. Жидкостная 

хроматография

 

(

2.2.29

).

Смесь растворителей. 

50,0 мл смеси из 

равных объемов 

ацетонитрила Р

 и 

метано-

ла Р1 

доводят 

фосфатным буферным рас-

твором рН 3,2 Р1 

до объема 200,0 мл.

Испытуемый раствор. 

30,0 мг

 

испытуемо-

го образца растворяют в 5 мл смеси из равных 
объемов 

ацетонитрила Р

 и 

метанола Р

, при 

необходимости используя ультразвук, и дово-
дят 

фосфатным буферным раствором рН 3,2 

Р1 

до объема 20,0 мл.

Раствор сравнения (а). 

15,0 мг

 ФСО гидро-

хлортиазида 

и 15,0 мг 

ФСО хлортиазида

 раст-

воряют в 25,0 мл смеси из равных объемов 

аце-

тонитрила Р

 и 

метанола Р

, используя ультра-

звук при необходимости, и доводят 

фосфат-

ным буферным раствором рН 3,2 Р1 

до объема 

100,0 мл. 5 мл полученного раствора доводят 
смесью растворитей до объема 100 мл.

Раствор сравнения (b). 

1,0 мл испытуемо-

го раствора доводят смесью растворителей до 
объема 50,0 мл. 5,0 мл полученного раствора 
доводят смесью растворителей до объема 
20,0 мл.

Условия хроматографирования:

 

–

колонка

 длиной 0,1 м и внутренним ди-

аметром 4,6 мм, заполненная 

силикагелем 

октадецилсилильным для хроматографии Р 

с размером частиц 3 мкм;

 

–

 подвижная фаза

:

 

– подвижная фаза А: к 940 мл 

фосфат-

ного буферного раствора рН 3,2 Р1 

при-

бавляют 60,0 мл 

метанола Р

, 10 мл 

те-

трагидрофурана Р

 и перемешивают;

 

– подвижная фаза В: к смеси из 500 мл 

метанола Р 

и 500 мл

 фосфатного бу-

ферного раствора рН 3,2 Р1

 прибавляют 

50,0 мл 

тетрагидрофурана Р

 и переме-

шивают;

Время (мин)

Подвижная 

фаза А

(%, 

об/об

)

Подвижная 

фаза В

(%, 

об/об

)

0—17

100 → 55

0 → 45

17—30

55

45

30—35

55 → 100

45 → 0

35—50

100

0

 

–

скорость подвижной фазы

: 0,8 мл/мин;

 

–

спектрофотометрический детектор

, 

длина волны 224 нм;

 

–

уравновешивание колонки

: не менее 

20 мин с использованием подвижной фазы А;

 

–

объем вводимой пробы

: по 10 мкл испы-

туемого раствора, растворов сравнения (а) и 
(b); 10 мкл смеси растворителей в качестве кон-
трольного опыта;

Времена удерживания

: примесь А — около 

7 мин; гидрохлортиазид — около 8 мин.

Пригодность хроматографической систе-

мы

: раствор сравнения (а):

 

–

разрешение

: не менее 2,5 между пиками 

примеси А и гидрохлортиазида; при необходи-
мости слегка изменяют состав подвижной фазы 
или временную программу линейного градиента.

Предельное содержание примесей

:

 

–

примеси А, В, С

 (не более 0,5 %): на хро-

матограмме испытуемого раствора площадь 
любого пика, кроме основного, не должна пре-
вышать площадь основного пика на хромато-
грамме раствора сравнения (b);

 

–

сумма примесей

 (не более 1 %): на хрома-

тограмме испытуемого раствора сумма площа-
дей всех пиков, кроме основного, не должна пре-
вышать 2-кратную площадь основного пика на 
хроматограмме раствора сравнения (b).

На хроматограмме испытуемого раствора 

не учитывают пики с площадью менее 0,1 пло-
щади основного пика на хроматограмме раст-
вора сравнения (b) (0,05 %).

Хлориды

 (

2.4.4

). Не более 0,01 % (100 ppm). 

1,0 г испытуемого образца растворяют в 25 мл 

ацетона Р

 и доводят 

водой Р

 до объема 30 мл. 

Эталон готовят с использованием 10 мл 

эталон-

ного раствора хлорида (5 ppm Cl) P

 и 5 мл 

аце-

тона Р

, содержащего 15 % 

(об/об)

 

воды Р

.

Потеря в массе при высушивании

 (

2.2.32

). 

Не более 0,5 %. 1,000 г испытуемого образца 
сушат при температуре 105°С.

Сульфатная зола

  (

2.4.14, метод А

). Не 

более 0,1 %. Определение проводят из 1,0 г ис-
пытуемого образца.

# Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

#

 

Микробиологическая чистота

 

(

2.6.12, 

2.6.13, 5.1.4

). Гидрохлортиазид в условиях 

испытания не обладает антимикробным дей-
ствием.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

0,120 г испытуемого образца растворят в 

50 мл 

диметилсульфоксида Р

 и титруют 

0,1 М 

раствором тетрабутиламмония гидроксида 
в 2-пропаноле

 потенциометрически (

2.2.20

) до 

второго скачка титрования

.

Параллельно проводят контрольный опыт.
1 мл 

0,1 М раствора тетрабутиламмо-

ния гидроксида в 2-пропаноле 

соответствует 

14,88 мг С

7

Н

8

СlN

3

О

4

S

2

.

236

ПРИМЕСИ

Специфицированные примеси: А, В, С

.

А. Хлортиазид.

NH

2

S

Cl

S

O

O

H

2

N

O

O

NH

2

В. 4-Амино-6-хлорбензол-1,3-дисульфон-

амид (саламид).

N

NH

S

Cl

S

O

O

H

2

N

O

O

NH

S

Cl

S

O

O

N

H

O

O

N

H

С. 6-Хлор-N-[(6-хлор-7-сульфамоил-2,3-ди-

гидро-4H-1,2,4-бензотиадиазин-4-ил-1,1-ди-
ок сид)метил]-3,4-дигидро-2Н-1,2,4-бензо-
тиадиазин-7-сульфонамид-1,1-диоксид.

 ГЛИБЕНКЛАМИД

Glibenclamidum

GLIBENCLAMIDE

Cl

OCH

3

N

H

O

S

N

H

N

H

O

O

O

C

23

H

28

ClN

3

O

5

S 

 М.м. 494,0

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Глибенкламид содержит не менее 

99,0 

% и не более 101,0 

% 1-[[4-[2-[(5-хлор-2-

метоксибензоил)амино]этил]фенил]сульфонил]-
3-циклогексилмочевины в пересчете на сухое 
вещество.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Белый или почти белый кристаллический 

порошок.

Практически нерастворим в воде, умеренно 

растворим в метиленхлориде, малорастворим в 
96 % спирте и в метаноле.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Первая идентификация: А, С.
Вторая идентификация: А, В, D, Е.

А.

 Температура плавления (

2.2.14

): от 169°С 

до 174°С.

В. 

Абсорбционная спектрофотометрия 

в ультрафиолетовой и видимой областях 
(

2.2.25

).

Испытуемый раствор

. 50,0 мг испытуе-

мого образца растворяют в 

метаноле Р

, при 

необходимости используют ультразвук, и до-
водят до объема 50,0 мл этим же раствори-
телем. К 10,0 мл полученного раствора при-
бавляют 1,0 мл раствора 103 г/л 

кислоты 

хлористоводородной Р

 и доводят 

метано-

лом Р

 до объема 100,0 мл.

Диапазон длин волн

: от 230 нм до 350 нм.

Максимум поглощения

: при 300 нм и 

менее выраженный при 275 нм.

Удельный показатель поглощения в 

максимуме

: при 300 нм — от 61 до 65; при 

275 нм — от 27 до 32.

С.

 Абсорбционная спектрофотометрия в 

инфракрасной области (

2.2.24

).

Приготовление

: в дисках с 

калия бро-

мидом Р

.

Сравнение

: 

ФСО глибенкламида 

# или 

спектр, представленный на рисунке 1.

Если полученные спектры отличаются, 

то испытуемый образец и 

ФСО глибенкла-

мида 

увлажняют 

метанолом Р

, растирают, 

сушат при температуре от 100°С до 105°С и 
используют для получения новых спектров.

D.

 Тонкослойная хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор

. 10 мг испытуе-

мого образца растворяют в смеси из равных 
объемов 

метанола Р

 и 

метиленхлорида Р

 

и доводят до объема 10 мл этой же смесью 
растворителей.

Раствор сравнения

. 10 мг 

ФСО глибен-

кламида

 растворяют в смеси из равных объ-

емов 

метанола Р

 и 

метиленхлорида Р

 и 

доводят до объема 10 мл этой же смесью 
растворителей.

Пластинка

: 

ТСХ пластинка со слоем 

силикагеля GF

254

 Р

.

Подвижная фаза

: 

96 % спирт Р — уксус-

ная кислота ледяная Р — циклогексан Р — 
метиленхлорид Р

 (5:5:45:45, 

об/об/об/об

).

Наносимый объем пробы

: 10 мкл.

Фронт подвижной фазы

: не менее 10 см 

от линии старта.

Высушивание

: на воздухе.

Проявление

: пластинку просматривают 

в ультрафиолетовом свете при длине волны 
254 нм.

Результаты

: на хроматограмме испы-

туемого раствора обнаруживается основное 
пятно, соответствующее по расположению и 
размеру основному пятну на хроматограмме 
раствора сравнения.

Е.

 20 мг испытуемого образца раство-

ряют в 2 мл 

кислоты серной Р

. Раствор про-

зрачный и обладает синей флуоресценцией 
в ультрафиолетовом свете при 365 нм. В по-
лученном растворе растворяют 0,1 г 

хлорал-

гидрата Р

. В течение 5 мин цвет раствора 

237

Глибенкламид

изменяется на ярко-желтый, а через 20 мин 
появляется коричневатый оттенок.

ИСПЫТАНИЯ

Сопутствующие примеси

. Жидкостная 

хроматография (

2.2.29

).

Испытуемый раствор

. 25,0 мг испытуе-

мого образца растворяют в 

метаноле Р

 и до-

водят до объема 10,0 мл этим же растворите-
лем. Готовят непосредственно перед исполь-
зованием.

Раствор сравнения (а).

 5,0 мг 

ФСО гли-

бенкламида примеси А

 и 5,0 мг 

ФСО глибен-

кламида примеси В

 растворяют в 

метаноле Р

 

и доводят до объема 100,0 мл этим же раст-
ворителем. 5,0 мл полученного раствора до-
водят 

метанолом Р

 до объема 20,0 мл.

Раствор сравнения (b).

 2,0 мл испытуемо-

го раствора доводят 

метанолом Р

 до объема 

100,0 мл. 5,0 мл полученного раствора дово-
дят 

метанолом Р

 до объема 50,0 мл.

Раствор сравнения (с).

 5 мг 

ФСО гликлази-

да

 растворяют в 

метаноле Р

, прибавляют 2 мл 

испытуемого раствора и доводят 

метанолом Р

 

до объема 100 мл. 1 мл полученного раствора 
доводят 

метанолом Р

 до объема 10 мл.

Условия хроматографирования:

 

–

колонка

 длиной 0,10 м и внутренним диа-

метром 4,6 мм, заполненная сферическим 

сили-

кагелем октадецилсилильным, деактивирован-
ным по отношению к основаниям, для хромато-
графии Р

 с размером частиц 3 мкм;

 

–

температура

: 35°С;

 

–

подвижная фаза

:

 

– подвижная фаза А: смешивают 20 мл 

раствора 101,8 г/л свежеперегнанного 

триэтиламина Р

, доведенного до рН 3,0 

кислотой фосфорной Р

, и 50 мл 

ацето-

нитрила Р

; доводят 

водой Р

 до объема 

1000 мл;

 

– подвижная фаза В: подвижная фаза 

А — 

вода Р 

— 

ацетонитрил Р

 (20:65:915, 

об/об/об

);

Время (мин)

Подвижная 

фаза А

(%, 

об/об

)

Подвижная 

фаза В

(%, 

об/об

)

0—15

45

55

15—30

45 → 5

55 → 95

30—40

5

95

40—41

5 → 45

95 → 55

41—55

45

55

 

–

скорость подвижной фазы

: 0,8 мл/мин;

 

–

спектрофотометрический детектор

, 

длина волны 230 нм;

 

–

объем вводимой пробы

: 10 мкл.

Относительное удерживание

 (по отно-

шению к глибенкламиду; время удержива-
ния — около 5 мин): примесь А — около 0,5; 
примесь В — около 0,6.

Пригодность хроматографической си-

стемы

: раствор сравнения (с):

 

–

разрешение

: не менее 5,0 между пиками 

глибенкламида и гликлазида.

Предельное содержание примесей

:

Рисунок 1.

 Инфракрасный спектр пропускания ФСО глибенкламида в дисках с калия бромидом Р.

 

 32

 34

 36

 38

 40

 42

 44

 46

 48

 50

 52

 54

 56

 58

 60

 62

 64

 66

 68

Пропускание

 500 

 1000 

 1500 

 2000 

 2000 

 3000 

 4000 

Волновое  число  (см

-1

)

238

 

–

примесь А

 (не более 0,5 %): на хромато-

грамме испытуемого раствора площадь пика, 
соответствующего примеси А, не должна пре-
вышать площадь соответствующего пика на 
хроматограмме раствора сравнения (а);

 

–

примесь В

 (не более 0,5 %): на хромато-

грамме испытуемого раствора площадь пика, 
соответствующего примеси В, не должна пре-
вышать площадь соответствующего пика на 
хроматограмме раствора сравнения (а);

 

–

любая другая примесь

: на хроматограм-

ме испытуемого раствора площадь любого пика, 
кроме основного и пиков примесей А и В, не 
должна превышать площадь основного пика на 
хроматограмме раствора сравнения (b) (0,2 %), 
и площадь не более чем двух таких пиков может 
превышать 0,5 площади основного пика на хро-
матограмме раствора сравнения (b) (0,1 %);

 

–

сумма других примесей

 (не более 0,5 %): 

на хроматограмме испытуемого раствора сумма 
площадей всех пиков, кроме основного и пиков 
примесей А и В, не должна превышать 2,5-крат-
ную площадь основного пика на хроматограмме 
раствора сравнения (b).

На хроматограмме испытуемого раствора 

не учитывают пики с площадью менее 0,25 пло-
щади основного пика на хроматограмме раст-
вора сравнения (b) (0,05 %).

Тяжелые металлы

  (

2.4.8, метод D

). Не 

более 0,002 % (20 ppm). 1,0 г испытуемого образ-
ца должен выдерживать испытание на тяжелые 
металлы. Эталон готовят с использованием 2 мл 

эталонного раствора свинца (10 ppm Pb) Р

.

Потеря в массе при высушивании

 (

2.2.32

). 

Не более 1,0 %. 1,000 г испытуемого образца 
сушат при температуре 105°С.

Сульфатная зола

  (

2.4.14, метод А

). Не 

более 0,1 %. Определение проводят из 1,0 г ис-
пытуемого образца.

#

 

Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

#

 

Микробиологическая чистота 

(

2.6.12, 

2.6.13, 5.1.4

). Глибенкламид в условиях испыта-

ния не обладает антимикробным действием.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

0,400 г испытуемого образца растворяют 

при нагревании в 100 мл 

96 % спирта Р

 и ти-

труют 

0,1 М раствором натрия гидроксида

, ис-

пользуя в качестве индикатора 1 мл 

раствора 

фенолфталеина Р

, до розового окрашивания.

1 мл 

0,1 М раствора натрия гидроксида

 со-

ответствует 49,40 мг C

23

H

28

ClN

3

O

5

S.

ПРИМЕСИ

Cl

OCH

3

N

H

O

S

N

H

O

O

R

А. R = H: 5-Хлор-2-метокси-N-[2-(4-сульфа-

моилфенил)этил]бензамид.

В. R = СО-ОСH

3

:Метил-[[4-[2-[(5-хлор-2-мето-

ксибензоил)амино]этил]фенил]сульфонил]кар-
бамат.

 ГЛИКЛАЗИД

Gliclazidum

GLICLAZIDE

H

3

C

S

N

H

N

H

O

N

O

O

C

15

H

21

N

3

O

3

S 

 М.м. 323,4

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Гликлазид содержит не менее 99,0 

% и 

не более 101,0 

% 1-(гексагидроциклопента[

c

]-

пиррол-2(1

H

)-ил)—3-[(4-метилфенил)сульфо-

нил]мочевины в пересчете на сухое вещество.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА) 

Белый или почти белый порошок.
Практически нерастворим в воде, легкорас-

творим в метиленхлориде, умеренно растворим 
в ацетоне, малорастворим в 96 % спирте.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Абсорбционная спектрофотометрия в ин-

фракрасной области (

2.2.24

).

Приготовление

: в дисках.

Сравнение

: 

ФСО гликлазида

 # или спектр, 

представленный на рисунке 1.

ИСПЫТАНИЯ

Сопутствующие примеси

. Жидкостная 

хроматография (

2.2.29

). 

Растворы готовят не-

посредственно перед использованием.

Смесь растворителей. Ацетонитрил Р — 

вода Р 

(45:55, 

об/об

)

.

Испытуемый раствор.

 50,0 мг испытуемо-

го образца растворяют в 23 мл 

ацетонитрила 

Р

 и доводят 

водой Р

 до объема 50,0 мл.

Раствор сравнения (a)

. 1,0 мл испытуе-

мого раствора доводят смесью растворите-
лей до объема 100,0 мл. 10,0 мл полученно-
го раствора доводят смесью растворителей до 
объема 100,0 мл.

Раствор сравнения (b).

 5 мг испытуемо-

го образца и 15 мг 

ФСО гликлазида примеси F

 

растворяют в 23 мл 

ацетонитрила Р

 и дово-

дят 

водой Р 

до объема 50 мл. 1 мл полученно-

го раствора доводят смесью растворителей до 
объема 20 мл.

239

Гликлазид

Раствор сравнения (с)

. 10,0 мг 

ФСО гли-

клазида примеси F

 растворяют в 45 мл 

аце-

тонитрила Р

 и доводят 

водой Р 

до объема 

100,0 мл. 1,0 мл полученного раствора до-
водят смесью растворителей до объема 
100,0 мл.

Условия хроматографирования:

 

–

колонка

 из нержавеющей стали длиной 

0,25 м и внутренним диаметром 4 мм, заполнен-
ная 

силикагелем октилсилильным для хрома-

тографии Р 

с размером частиц 5 мкм;

 

–

подвижная фаза

: 

триэтиламин Р — кис-

лота трифторуксусная Р — ацетонитрил Р — 
вода Р

 (0,1:0,1:45:55, 

об/об/об/об

);

 

–

скорость подвижной фазы

: 0,9 мл/мин;

 

–

спектрофотометрический детектор

, 

длина волны 235 нм;

 

–

объем вводимой пробы

: 20 мкл;

 

–

время хроматографирования

: 2-кратное 

время удерживания гликлазида.

Относительное удерживание

 (по отно-

шению к гликлазиду; время удерживания — 
около 16 мин): примесь F — около 0,9.

Пригодность хроматографической си-

стемы

: раствор сравнения (b):

 

–

разрешение

: не менее 1,8 между пиками 

примеси F и гликлазида.

Предельное содержание примесей

:

 

–

примесь F

 (не более 0,1 %): на хро-

матограмме испытуемого раствора пло-
щадь пика, соответствующего примеси F, не 
должна превышать площадь соответствую-
щего пика на хроматограмме раствора срав-
нения (с);

 

–

неспецифицированные примеси

 (не 

более 0,10 

%): на хроматограмме испытуе-

мого раствора площадь любого пика, кроме 
основного и пика примеси F, не должна пре-
вышать площадь основного пика на хромато-
грамме раствора сравнения (а);

 

–

сумма примесей, кроме примеси F

 (не 

более 0,2 %): на хроматограмме испытуемого 
раствора сумма площадей всех пиков, кроме 
основного и пика примеси F, не должна пре-
вышать 2-кратную площадь основного пика 
на хроматограмме раствора сравнения (а).

На хроматограмме испытуемого раст-

вора не учитывают пики с площадью менее 
0,2 площади основного пика на хроматограм-
ме раствора сравнения (а) (0,02 %).

Примесь В

. Не более 0,0002 % (2 ppm). 

Жидкостная хроматография (

2.2.29

), как ука-

зано в испытании «Сопутствующие примеси», 
со следующими изменениями.

Испытуемый раствор.

 0,400 г испытуе-

мого образца растворяют в 2,5 мл 

диметил-

сульфоксида Р

 и доводят 

водой Р

 до объема 

10,0 мл. Перемешивают в течение 10 мин, вы-
держивают при температуре 4°С в течение 
30 мин и фильтруют.

Раствор сравнения

. 20,0 мг 

ФСО гликлази-

да примеси В

 растворяют в 

диметилсульфокси-

де Р

 и доводят до объема 100,0 мл этим же раст-

ворителем. К 1,0 мл полученного раствора при-
бавляют 12 мл 

диметилсульфоксида Р

 и дово-

дят 

водой Р

 до объема 50,0 мл. К 1,0 мл получен-

ного раствора прибавляют 12 мл 

диметилсуль-

фоксида Р

 и доводят 

водой Р

 до объема 50,0 мл.

Рисунок 1. 

Инфракрасный спектр пропускания ФСО гликлазида в дисках с калия бромидом Р.

 5

 10

 15

 20

 25

 30

 35

 40

 45

 50

 55

 60

 65

 70

 75

 80

 85

 90

 95

 100

Пропускание

 1000 

 1500 

 2000 

 2000 

 3000 

Волновое  число  (см

-1

)

240

Условия хроматографирования:

 

–

объем вводимой пробы

: 50 мкл.

Время удерживания

: примесь В — около 8 мин.

Предельное содержание примесей

:

 

–

примесь В

: на хроматограмме испытуемо-

го раствора площадь пика примеси В не должна 
превышать площадь соответствующего пика на 
хроматограмме раствора сравнения.

Тяжелые металлы 

(

2.4.8, метод F

). Не 

более 0,001 % (10 ppm). 1,5 г испытуемого об-
разца должны выдерживать испытание на тя-
желые металлы. Эталон готовят с использо-
ванием 1,5 мл 

эталонного раствора свинца 

(10 ppm Pb) Р

.

Потеря в массе при высушивании

 

(

2.2.32

). Не более 0,25 %. 1,000 г испытуемого 

образца сушат при температуре 105°С в тече-
ние 2 ч.

Сульфатная зола 

(

2.4.14, метод А

). Не 

более 0,1 %. Определение проводят из 1,0 г ис-
пытуемого образца.

#

 

Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

#

 

Микробиологическая чистота 

(

2.6.12,

 

2.6.13, 5.1.4

). Гликлазид в условиях испытаний 

не обладает антимикробным действием.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

0,250 г испытуемого образца растворяют в 

50 мл 

кислоты уксусной безводной Р

 и титру-

ют 

0,1 М раствором кислоты

 

хлорной 

потенци-

ометрически (

2.2.20

).

1 мл 

0,1 М раствора кислоты

 

хлорной 

со-

ответствует 32,34 мг C

15

H

21

N

3

O

3

S.

ПРИМЕСИ

Специфицированные примеси: B, F.
Другие обнаруживаемые примеси 

(следу-

ющие вещества, если они присутствуют в зна-
чительных количествах, следует определять 
тем или иным испытанием, описанным в част-
ной статье. Их содержание лимитируется общим 
критерием приемлемости для других/неспе-
цифицированных примесей и/или общей ста-
тьей 

Субстанции для фармацевтического ис-

пользования

. Вследствие этого нет необходимо-

сти идентифицировать эти примеси для доказа-
тельства соответствия требованиям. См. также 
статью 

5.10. Контроль примесей в субстанци-

ях для фармацевтического использования

)

: А, 

С, D, E, G.

R

=

H

3

C

S

N

H

O

O

A. R-H: 4-Метилбензолсульфонамид.

N

N

O

B. 2-Нитрозо-октагидроциклопента[

c

]пиррол.

C. R-CO-O-C

2

H

5

: Этил[(4-метилфенил)суль-

фонил]карбамат.

R

O

N

D. 

N

-[(4-Метилфенил)сульфонил]гексагидро-

циклопента[

c

]пиррол-2(1

H

)-карбоксамид.

N

H

N

O

R

E. 1-[(4-Метилфенил)сульфонил]-3-(3,3a,4,6a-

тетрагидроциклопента[

c

]пиррол-2(1

H

)-ил)мо-

чевина.

S

N

H

N

H

O

N

O

O

CH

3

F

. 1-(Гексагидроциклопента[

c

]пиррол-2(1

H

)-

ил)-3-[(2-метилфенил)сульфонил]мочевина.

R

O

N

N

G

.  

N

- [ ( 4 - М е т и л ф е н и л ) с у л ь ф о н и л ] -

1,4a,5,6,7,7a-гексагидро-2

H

-циклопента[

d

]пи-

ридазин-2-карбоксамид.

 ГЛИЦЕРИН

Glycerolum

GLYCEROL

OH

OH

HO

C

3

H

8

O

3

 

 М.м. 92,1

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Глицерин содержит не менее 98,0 % (

м/м

) и 

не более 101,0 % (

м/м

) пропан-1,2,3-триола в пе-

ресчете на безводное вещество.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Сиропообразная маслянистая на ощупь 

бесцветная или почти бесцветная прозрачная 
жидкость. Очень гигроскопичен.

Малорастворим в ацетоне, практически не-

растворим в жирных и эфирных маслах. Смеши-
вается с водой и с 96 % спиртом.

241

Глицерин

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Первая идентификация: А, В.
Вторая идентификация: А, С, D.

А.

 Испытуемый образец выдерживает испы-

тание «Показатель преломления» как указано в 
разделе «Испытания».

В.

 Абсорбционная спектрофотометрия в ин-

фракрасной области (

2.2.24

).

Приготовление

: к 5 мл испытуемого образ-

ца прибавляют 1 мл 

воды Р

 и тщательно пере-

мешивают.

Сравнение

: 

эталонный спектр пропуска-

ния глицерина 85 % по Европейской Фарма-
копее

 # или спектр, представленный на ри-

сунке 1.

С.

 1 мл испытуемого образца смешивают 

с 0,5 мл 

кислоты азотной Р

. На полученный 

раствор наслаивают 0,5 мл 

раствора калия 

дихромата Р

. На границе раздела жидкостей 

появляется синее кольцо. В течение 10 мин 
синее окрашивание не переходит в нижний 
слой.

D.

 В выпарительной чашке нагревают 1 мл 

испытуемого образца с 2 г 

калия гидросульфа-

та Р

. Выделяющиеся пары (акролеин) окра-

шивают фильтровальную бумагу, импрегниро-
ванную 

щелочным раствором калия тетрай-

одмеркурата Р

, в черный цвет.

ИСПЫТАНИЯ

Раствор S

. 100,0 г испытуемого образца 

доводят 

водой, свободной от углерода диок-

сида, Р

 до объема 200,0 мл.

Прозрачность

  (

2.2.1

). Раствор S должен 

быть прозрачным.

Цветность

  (

2.2.2, метод II

). 10 мл раст-

вора S доводят 

водой Р

 до объема 25 мл. По-

лученный раствор должен быть бесцветным.

Кислотность или щелочность

. К 50 мл 

раствора S прибавляют 0,5 мл 

раствора фе-

нолфталеина Р

. Раствор должен быть бес-

цветным. При прибавлении не более 0,2 мл 

0,1 М раствора натрия гидроксида

 должно 

появиться розовое окрашивание. # Раствор со-
храняют для испытания «Эфиры».

Показатель преломления

 (

2.2.6

). От 1,470 

до 1,475.

Альдегиды

. Не более 0,001 % (10 ppm). 

7,5 мл раствора S помещают в колбу со 
шлифом, прибавляют 7,5 мл 

воды Р

 и 1,0 мл 

обесцвеченного раствора парарозанилина Р

. 

Колбу укупоривают и выдерживают при тем-
пературе (25±1)°С в течение 1 ч. Оптическая 
плотность (

2.2.25

) полученного раствора, из-

меренная при 552 нм, не должна превышать 
оптическую плотность раствора сравнения, 
приготовленного аналогично и в то же самое 
время с использованием 7,5 мл 

эталонного 

раствора формальдегида (5 ppm СН

2

О) Р

 и 

7,5 мл 

воды Р

. Испытание считают недействи-

тельным, если раствор сравнения не имеет ро-
зового окрашивания.

Эфиры

. К конечному раствору, получен-

ному в испытании «Кислотность или щелоч-
ность», прибавляют 10,0 мл 

0,1 М раствора 

натрия гидроксида

, кипятят с обратным холо-

дильником в течение 5 мин, охлаждают и при-

 30

 35

 40

 45

 50

 55

 60

 65

 70

 75

 80

 85

 90

 95

 100

Пропускание

 1000 

 1500 

 2000 

 3000 

Волновое  число  (см

-1

)

Рисунок 1.

 Инфракрасный спектр пропускания глицерина 85 %.