ГОСУДАРСТВЕННАЯ ФАРМАКОПЕЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ. Том III Контроль качества фармацевтических субстанций (2009 год) - часть 15

153

Ампициллин

Проявление

: пластинку обрабатывают 

парами йода до проявления пятен. Просма-
тривают при дневном свете.

Пригодность хроматографической си-

стемы

: раствор сравнения (b):

 

– на хроматограмме обнаруживаются два 

полностью разделенных пятна.

Результаты

: на хроматограмме испыту-

емого раствора обнаруживается пятно, соот-
ветствующее по расположению, цвету и раз-
меру основному пятну на хроматограмме 
раствора сравнения (а).

С. 

2 мг испытуемого образца помеща-

ют в пробирку длиной около 150 мм и диаме-
тром около 15 мм, увлажняют 0,05 мл 

воды Р

, 

прибавляют 2 мл 

раствора формальдегида 

в серной кислоте Р

 и встряхивают. Раствор 

практически бесцветный. Пробирку выдержи-
вают в водяной бане в течение 1 мин. Появля-
ется темно-желтое окрашивание.

D.

 Испытуемый образец выдерживает ис-

пытание «Вода» как указано в разделе «Ис-
пытания».

ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность 

(

2.2.1

). 1,0 г испытуемо-

го образца растворяют в 10 мл 

1 М

 

раст-

вора

 

кислоты хлористоводородной

 (раствор 

А). 1,0 г испытуемого образца растворяют в 
10 мл 

раствора аммиака разведенного Р2

 

(раствор В). Сразу после приготовления рас-
творы А и В по степени мутности не должны 
превышать эталон II.

рН

 (

2.2.3

). От 3,5 до 5,5. 0,1 г испытуемо-

го образца растворяют в 

воде, свободной от 

углерода диоксида, Р 

и доводят до объема 

40 мл этим же растворителем. 

Удельное оптическое вращение

 (

2.2.7

). 

От +280 до +305 в пересчете на безводное ве-
щество. 62,5 мг испытуемого образца раство-
ряют в 

воде Р

 и доводят до объема 25,0 мл 

этим же растворителем.

Сопутствующие примеси

. Жидкостная 

хроматография (

2.2.29

).

Испытуемый раствор (а)

. 27,0 мг испы-

туемого образца растворяют в подвижной 
фазе А и доводят до объема 50,0 мл этим же 
растворителем.

Испытуемый раствор (b)

. 

Раствор го-

товят непосредственно перед использо-
ванием.

 27,0 мг испытуемого образца раст-

воряют в подвижной фазе А и доводят до 
объема 10,0 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (а).

 27,0 мг 

ФСО ам-

пициллина безводного

 растворяют в подвиж-

ной фазе А и доводят до объема 50,0 мл этим 
же растворителем.

Раствор сравнения (b).

 2,0 мг 

ФСО цеф-

радина

 растворяют в подвижной фазе А и до-

водят до объема 50 мл этим же растворите-
лем. К 5,0 мл полученного раствора прибав-
ляют 5,0 мл раствора сравнения (а). 

Раствор сравнения (с).

 1,0 мл раствора 

сравнения (а) доводят подвижной фазой А до 
объема 20,0 мл.

Условия хроматографирования:

 

–

колонка

 длиной 0,25 м и внутренним ди-

аметром 4,6 мм, заполненная 

силикагелем 

октадецилсилильным для хроматографии Р

 

с размером частиц 5 мкм;

 

–

подвижная фаза

: 

 

– подвижная фаза А: к 0,5 мл 

кислоты 

уксусной разведенной Р

 прибавляют 50 мл 

0,2 М раствора калия дигидрофосфата 
Р

, 50 мл 

ацетонитрила Р

 и доводят 

водой 

Р

 до объема 1000 мл;

 

– подвижная фаза В: к 0,5 мл 

кислоты 

уксусной разведенной Р

 прибавляют 50 мл 

0,2 М раствора калия дигидрофосфа-
та Р

, 400 мл 

ацетонитрила Р

 и доводят 

водой Р

 до объема 1000 мл;

Время (мин)

Подвижная 

фаза А

(%, 

об/об

)

Подвижная 

фаза В

(%, 

об/об

)

0 — 

t

R

85

15

t

R

 

—

 

(

t

R

 + 30)

85 → 0

15 → 100

(

t

R

 + 30) — (

t

R

 + 45)

0

100

(

t

R

 + 45) — (

t

R

 + 60)

85

15

t

R

 — 

время удерживания ампициллина на хроматограмме 

раствора сравнения (с).

Если для достижения необходимого раз-

решения изменялось соотношение подвиж-
ных фаз А и В, то подвижную фазу получен-
ного состава используют в начальном време-
ни градиента и для количественного опреде-
ления.

 

–

скорость подвижной фазы

: 1,0 мл/мин;

 

–

спектрофотометрический детектор

, 

длина волны 254 нм;

 

–

объем вводимой пробы

: по 50 мкл рас-

творов сравнения (b) и (с) хроматографируют 
изократически, используя соотношение под-
вижных фаз А и В начального времени гради-
ента; 50 мкл испытуемого раствора (b) хрома-
тографируют согласно программе градиента; 
50 мкл подвижной фазы А хроматографиру-
ют согласно программе градиента в качестве 
контрольного опыта.

Пригодность хроматографической си-

стемы

: раствор сравнения (b):

 

–

разрешение

: не менее 3,0 между 

пиками ампициллина и цефрадина; при не-
обходимости изменяют соотношение под-
вижных фаз А и В;

Предельное содержание примесей

:

 

–

любая примесь

 (не более 1,0 

%): на 

хроматограмме испытуемого раствора (b

)

 

площадь любого пика, кроме основного, не 
должна превышать площадь основного пика 
на хроматограмме раствора сравнения (с).

154

N,N

-Диметиланилин

  (

2.4.26, метод В

). 

Не более 0,002 % (20 ppm).

Вода 

(

2.5.12

). Не более 2,0 %. Определе-

ние проводят из 0,300 г испытуемого образца.

Сульфатная зола

  (

2.4.14, метод А

). Не 

более 0,5 %. Определение проводят из 1,0 г 
испытуемого образца.

#

 

Остаточные количества органиче-

ских растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый 

образец должен выдерживать требования 
статьи (

5.4

).

# Микробиологическая чистота 

(

2.6.12, 

2.6.13, 5.1.4

). Ампициллин в условиях испы-

тания обладает антимикробным действием. 
Для устранения антимикробного действия 
посев на питательные среды проводят мето-
дом мембранной фильтрации.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Жидкостная хроматография (

2.2.29

), как 

указано в испытании «Сопутствующие приме-
си», со следующими изменениями.

Условия хроматографирования:

 

–

подвижная фаза

: соотношение подвиж-

ных фаз А и В начального времени градиен-
та в соответствии с параметрами пригодности 
хроматографической системы;

 

–

объем вводимой пробы

: по 50 мкл ис-

пытуемого раствора (а) и раствора сравне-
ния (а). 

Пригодность хроматографической си-

стемы

: раствор сравнения (а):

 

–

относительное стандартное откло-

нение

: не более 1,0 % для площадей пиков 

при шести повторных вводах пробы.

Содержание C

16

H

19

N

3

O

4

S рассчитывают в 

процентах с учетом содержания ампициллина 
в 

ФСО ампициллина безводного.

ХРАНЕНИЕ

В воздухонепроницаемом контейнере при 

температуре не выше 30°С. 

ПРИМЕСИ

H

2

N

N

S

CH

3

CH

3

CO

2

H

H

H

H

O

A. (2

S

,5

R

,6

R

)-6-Амино-3,3-диметил-7-оксо-

4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая 
кислота (6-аминопенициллановая кислота).

O

H

N

N

S

CH

3

CH

3

NH

2

CO

2

H

H

H

H

H

O

B. (2

S

,5

R

,6

R

)-6-[[(2

S

)-2-Амино-2-фенил-

ацетил]амино]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-аза-
бицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота (L-ампи-
циллин).

*

N

H

*

H

N

*

S

HN

O

O

CH

3

CH

3

H

CO

2

H

C. (4

S

)-2-(3,6-Диоксо-5-фенилпиперазин-2-

ил)-5,5-диметилтиазолидин-4-карбоновая кис-
лота (дикетопиперазины ампициллина).

O

H

N

HN

∗

S

CH

3

CH

3

NH

2

CO

2

H

H

H

∗

R

D. R = CO

2

H: (4

S

)-2-[[[(2

R

)-2-Амино-2-фенил-

ацетил]амино]карбоксиметил]-5,5-диметил-
тиазолидин-4-карбоновая кислота (пеницилла-
новые кислоты ампициллина).

F. R = H: (2

RS

,4

S

)-2-[[[(2

R

)-2-Амино-2-фенил-

ацетил]амино]метил]-5,5-диметилтиазолидин-4-
карбоновая кислота (пенициллановые кислоты 
ампициллина).

O

H

N

N

S

NH

2

H

H

H

H

O

CH

3

CH

3

N

H

O

H

CO

2

H

E. (2

R

)-2-[[[(2

S

,5

R

,6

R

)-6-[[(2

R

)-2-Амино-2-фенил-

ацетил]амино]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-
азабицикло[3.2.0]гепт-2-ил]карбонил]амино]-
2-фенилуксусная кислота (ампициллинил-D-
фенилглицин).

HN

NH

O

O

H

H

G. (3

R

,6

R

)-3,6-Дифенилпиперазин-2,5-дион.

N

N

OH

H. 3-Фенилпиразин-2-ол.

O

H

N

N

S

CH

3

CH

3

NH

CO

2

H

H

H

H

H

O

NH

2

H

O

I. (2

S

,5

R

,6

R

)-6-[[(2

R

)-2-[[(2

R

)-2-Амино-2-фенил-

ацетил]амино]-2-фенилацетил]амино]-3,3-
диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]-
гептан-2-карбоновая кислота (D-фенилглицил-
ампициллин).

155

Ампициллин натрия

H

3

C

O

H

N

N

S

CH

3

CH

3

CO

2

H

H

H

H

H

3

C

O

CH

3

J. (2

S

,5

R

,6

R

)-6-[(2,2-Диметилпропаноил)-

амино]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азаби-
цикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота.

CO

2

H

NH

H

O

CH

3

H

3

C

H

3

C

K. (2

R

)-2-[(2,2-Диметилпропаноил)амино]-2-

фенилуксусная кислота.

CO

2

H

NH

2

H

L. (2

R

)-2-Амино-2-фенилуксусная кислота 

(D-фенилглицин).

O

H

N

N

S

CH

3

CH

3

CO

2

H

H

H

H

O

HN

H

O

H

N

HN

*

S

CH

3

CH

3

CO

2

H

H

*

H

HN

O

H

n

M. Со-олигомеры ампициллина и пеницил-

лановых кислот ампициллина.

 АМПИЦИЛЛИН НАТРИЯ

Ampicillinum natrium

AMPICILLIN SODIUM

O

H

N

N

S

CH

3

CH

3

NH

2

CO

2

Na

H

H

H

H

O

C

16

H

18

N

3

NaO

4

S М.м. 

371,4

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Ампициллин натрия содержит не менее 91,0 % 

и не более 102,0 % натрия (2

S

,5

R

,6

R

)-6[[(2

R

)-2-

амино-2-фенилацетил]амино]-3,3-диметил-7-оксо-
4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоксилата в 
пересчете на безводное вещество.

Полусинтетический продукт, полученный из 

продукта ферментации.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Белый или почти белый порошок. Гигроско-

пичен. 

Легкорастворим в воде, умеренно рас-

творим в ацетоне, практически нерастворим в 
жирных маслах и вазелиновом масле.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Первая идентификация: А, D.
Вторая идентификация: B, C, D.

А.

 Абсорбционная спектрофотометрия в ин-

фракрасной области (

2.2.24

).

Приготовление

: 0,250 г испытуемого образ-

ца растворяют в 5 мл 

воды Р

, прибавляют 0,5 мл 

кислоты уксусной

 

разведенной Р

, перемеши-

вают, выдерживают в течение 10 мин в ледя-
ной бане и фильтруют через стеклянный фильтр 
(ПОР 40) (

2.1.2

) под вакуумом. Кристаллы на 

фильтре промывают 2—3 мл смеси 

вода Р

 — 

ацетон Р

 (1:9, 

об/об

), и сушат при температуре 

60°С в течение 30 мин.

Сравнение

: 

ФСО ампициллина тригидрата

 

# или спектр, представленный на рисунке 1.

В.

 Тонкослойная хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор

. 25 мг испытуемого 

образца растворяют в 10 мл 

раствора натрия 

гидрокарбоната Р

.

Раствор сравнения (а).

 25 мг 

ФСО ампи-

циллина тригидрата

 растворяют в 10 мл 

раст-

вора натрия гидрокарбоната Р

.

Раствор сравнения (b).

 25 мг 

ФСО амокси-

циллина тригидрата

 и 25 мг 

ФСО ампицилли-

на тригидрата

 растворяют в 10 мл 

раствора 

натрия гидрокарбоната Р

.

Пластинка

: 

ТСХ пластинка со слоем

 

сили-

кагеля силанизированного Р.

Подвижная фаза

: смесь из 10 объемов 

аце-

тона Р

 и 90 объемов раствора 154 г/л 

аммония 

ацетата Р

, доведенного до рН 5,0 

кислотой ук-

сусной ледяной Р

.

Наносимый объем пробы

: 1 мкл.

Фронт подвижной фазы

: не менее 15 см от 

линии старта.

Высушивание

: на воздухе.

Проявление

: пластинку обрабатывают 

парами йода до проявления пятен. Просматри-
вают при дневном свете.

Пригодность хроматографической систе-

мы

: раствор сравнения (b):

 

– на хроматограмме обнаруживаются два 

полностью разделенных пятна.

Результаты

: на хроматограмме испытуемо-

го раствора обнаруживается пятно, соответствую-
щее по расположению, размеру и цвету основному 
пятну на хроматограмме раствора сравнения (а).

С. 

2 мг испытуемого образца помещают 

в пробирку длиной около 150 мм и диаметром 
около 15 мм. Увлажняют 0,05 мл 

воды Р

, прибав-

156

ляют 2 мл 

раствора формальдегида в серной 

кислоте Р

 и встряхивают. Раствор практически 

бесцветный. Пробирку выдерживают в водяной 
бане в течение 1 мин. Появляется темно-желтое 
окрашивание.

D. 

Испытуемый образец дает реакцию (а) на 

натрий (

2.3.1

).

ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность 

(

2.2.1

). 1,0 г испытуемого об-

разца помещают в коническую колбу и медлен-
но прибавляют при постоянном перемешивании 
10 мл 

1 М

 

раствора

 

кислоты хлористоводород-

ной

 (раствор А). 1,0 г испытуемого образца раст-

воряют в 

воде Р

 и доводят до объема 10,0 мл 

этим же растворителем (раствор В). Сразу после 
приготовления растворы А и В по степени мутно-
сти не должны превышать эталон II.

Оптическая плотность 

(

2.2.25

). Не более 

0,15 при 430 нм. Измеряют оптическую плот-
ность раствора В сразу после приготовления, 
как указано в испытании «Прозрачность».

рН

 (

2.2.3

). От 8,0 до 10,0. 2,0 г испытуемого 

образца растворяют в 

воде, свободной от угле-

рода диоксида, Р 

и доводят до объема 20 мл этим 

же растворителем. Через 10 мин после раство-
рения измеряют рН полученного раствора. 

Удельное оптическое вращение

 (

2.2.7

). От 

+258 до +287 в пересчете на безводное веще-
ство. 62,5 мг испытуемого образца растворяют 
в растворе 4 г/л 

калия гидрофталата Р

 и дово-

дят до объема 25,0 мл этим же растворителем.

Сопутствующие примеси

. Жидкостная 

хроматография (

2.2.29

).

Испытуемый раствор (а)

. 31,0 мг испытуемо-

го образца растворяют в подвижной фазе А и до-
водят до объема 50,0 мл этим же растворителем.

Испытуемый раствор (b)

. 

Раствор гото-

вят непосредственно перед использованием.

 

31,0 мг испытуемого образца растворяют в под-
вижной фазе А и доводят до объема 10,0 мл 
этим же растворителем.

Раствор сравнения (а).

 27,0 мг 

ФСО ампи-

циллина безводного

 растворяют в подвижной 

фазе А и доводят до объема 50,0 мл этим же раст-
ворителем.

Раствор сравнения (b).

 2,0 мг 

ФСО цефра-

дина

 растворяют в подвижной фазе А и дово-

дят до объема 50 мл этим же растворителем. 
К 5,0 мл полученного раствора прибавляют 
5,0 мл раствора сравнения (а). 

Раствор сравнения (с).

 1,0 мл раствора 

сравнения (а) доводят подвижной фазой А до 
объема 20,0 мл. 

Раствор сравнения (d). 

К 0,20 г испытуемого 

образца прибавляют 1,0 мл 

воды Р 

и нагревают 

при температуре 60°С в течение 1 ч. 0,5 мл по-
лученного раствора доводят подвижной фазой А 
до объема 50,0 мл.

Условия хроматографирования:

 

–

колонка

 длиной 0,25 м и внутренним диа-

метром 4,6 мм, заполненная 

силикагелем окта-

децилсилильным для хроматографии Р

 с раз-

мером частиц 5 мкм;

 

–

подвижная фаза

: 

 

– подвижная фаза А: к 0,5 мл 

кислоты ук-

сусной разведенной Р

 прибавляют 50 мл 

0,2 М раствора калия дигидрофосфата Р

, 

50 мл 

ацетонитрила Р

 и доводят 

водой Р

 

до объема 1000 мл;

 

– подвижная фаза В: к 0,5 мл 

кислоты ук-

сусной разведенной Р

 прибавляют 50 мл 

0,2 М раствора калия дигидрофосфата Р

, 

400 мл 

ацетонитрила Р

 и доводят 

водой Р

 

до объема 1000 мл;

Время (мин)

Подвижная 

фаза А

(%, 

об/об

)

Подвижная 

фаза В

(%, 

об/об

)

0 — 

t

R

85

15

t

R

 

—

 

(

t

R

 + 30)

85 → 0

15 → 100

(

t

R

 + 30) — (

t

R

 + 45)

0

100

(

t

R

 + 45) — (

t

R

 + 60)

85

15

t

R

 — 

время удерживания ампициллина на хроматограмме 

раствора сравнения (с).

Если для достижения необходимого раз-

решения изменялось соотношение подвижных 
фаз А и В, то подвижную фазу полученного со-
става используют в начальном времени гради-
ента и для количественного определения.

 

–

скорость подвижной фазы

: 1,0 мл/мин;

 

–

спектрофотометрический детектор

, 

длина волны 254 нм;

 

–

объем вводимой пробы

: по 50 мкл рас-

творов сравнения (b) и (с) хроматографиру-
ют изократически, используя соотношение 
подвижных фаз А и В начального времени гра-
диента; по 50 мкл испытуемого раствора (b) и 
раствора сравнения (d) хроматографируют со-
гласно программе градиента; 50 мкл подвижной 
фазы А хроматографируют согласно программе 
градиента в качестве контрольного опыта.

Идентификация пиков

: идентифициру-

ют пики ампициллина и димера ампициллина, 
используя хроматограмму раствора сравне-
ния (d).

Относительное удерживание

 (по отно-

шению к ампициллину): димер ампицилли-
на — около 2,8.

Пригодность хроматографической си-

стемы

: раствор сравнения (b):

 

–

разрешение

: не менее 3,0 между пиками 

ампициллина и цефрадина; при необходимости 
изменяют соотношение подвижных фаз А и В;

Предельное содержание примесей

:

 

–

димер ампициллина

 (не более 4,5 %): на 

хроматограмме испытуемого раствора (b) пло-
щадь пика, соответствующего димеру ампи-
циллина, не должна превышать 4,5-кратную 
площадь основного пика на хроматограмме 
раствора сравнения (с);

157

Ампициллин натрия

 

–

любая другая примесь

 (не более 2 %): на 

хроматограмме испытуемого раствора (b

)

 пло-

щадь любого пика, кроме основного и димера 
ампициллина, не должна превышать 2-крат-
ную площадь основного пика на хроматограмме 
раствора сравнения (с).

N,N

-Диметиланилин

  (

2.4.26, метод В

). Не 

более 0,002 % (20 ppm).

2-Этилгексановая кислота

  (

2.4.28

). Не 

более 0,8 % (

м/м

).

Метиленхлорид

. Не более 0,2 % (

м/м

). Га-

зовая хроматография (

2.2.28

).

Раствор внутреннего стандарта

. 1,0 мл 

этиленхлорида Р

 растворяют в 

воде

 

Р 

и дово-

дят до объема 500,0 мл этим же растворителем.

Испытуемый раствор (а)

. 1,0 г испытуемо-

го образца растворяют в 

воде Р

 и доводят до 

объема 10,0 мл этим же растворителем.

Испытуемый раствор (b)

. 1,0 г испытуе-

мого образца растворяют в 

воде Р

, прибавляют 

1,0 мл раствора внутреннего стандарта и дово-
дят 

водой Р

 до объема 10,0 мл.

Раствор сравнения

. 1,0 мл 

метиленхлори-

да Р

 растворяют в 

воде Р

 и доводят до объема 

500,0 мл этим же растворителем. К 1,0 мл по-
лученного раствора прибавляют 1,0 мл раст-
вора внутреннего стандарта и доводят 

водой Р

 

до объема 10,0 мл.

Условия хроматографирования:

 

–

колонка

 стеклянная длиной 1,5 м и диаме-

тром 4 мм, заполненная 

диатомитом для газо-

вой хроматографии Р

, импрегнированным 10 % 

(

м/м

) 

макрогола 1000 Р

;

 

–

детектор

: пламенно-ионизационный;

 

–

газ-носитель

: 

азот для хроматографии Р

;

 

–

скорость газа-носителя

: 40 мл/мин;

 

–

температура

: колонка — 60°С, блок 

ввода проб — 100°С, детектор — 150°С.

Содержание метиленхлорида рассчиты-

вают с учетом плотности метиленхлорида при 
20°С, равной 1,325 г/мл.

Тяжелые металлы

  (

2.4.8, метод С

). Не 

более 0,002 % (20 ppm). 1,0 г испытуемого образ-
ца должен выдерживать испытание на тяжелые 
металлы. Эталон готовят с использованием 2 мл 

эталонного раствора свинца (10 ppm Pb) Р.

Вода 

(

2.5.12

). Не более 2,0 %. Определение 

проводят из 0,300 г испытуемого образца.

Бактериальные эндотоксины

 

(

2.6.14

)

.

 

Менее 0,15 МЕ/мг, если субстанция предназна-
чена для производства лекарственных средств 
для парентерального применения без дальней-
шей подходящей процедуры удаления бактери-
альных эндотоксинов.

#

 

Пирогенность 

(

2.6.8

). Испытуемый об-

разец должен быть апирогенным. Тест-доза — 
20 мг испытуемого образца в 1 мл 

воды для инъ-

екций Р

 на 1,0 кг массы тела кролика.

Испытание «Пирогенность» проводят в ка-

честве альтернативного испытанию «Бактери-
альные эндотоксины».

#

 

Стерильность 

(

2.6.1

). Ампициллин 

натрия в условиях испытания обладает антими-
кробным действием. Для устранения антими-
кробного действия посев на питательные среды 
проводят методом мембранной фильтрации. 

#

 

Аномальная токсичность

  (

2.6.9

). Испы-

туемый образец должен быть нетоксичным. Тест-

 74

 76

 78

 80

 82

 84

 86

 88

 90

 92

 94

 96

 98

 100

Пропускание

 1000 

 1500 

 2000 

 2000 

 3000 

Волновое  число  (см

-1

)

Рисунок 1. 

Инфракрасный спектр пропускания ФСО ампициллина тригидрата.

158

доза — 20 мг испытуемого образца в 0,5 мл 

воды для 

инъекций Р

, внутривенно. Срок наблюдения — 24 ч.

#

 

Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Жидкостная хроматография (

2.2.29

), как ука-

зано в испытании «Сопутствующие примеси», со 
следующими изменениями.

Условия хроматографирования:

 

–

подвижная фаза

: соотношение подвижных 

фаз А и В начального времени градиента в со-
ответствии с параметрами пригодности хромато-
графической системы;

 

–

объем вводимой пробы

: по 50 мкл испы-

туемого раствора (а) и раствора сравнения (а). 

Пригодность хроматографической систе-

мы

: раствор сравнения (а):

 

–

относительное стандартное отклоне-

ние

: не более 1,0 % для площадей пиков при 

шести повторных вводах пробы.

Содержание ампициллина натрия в процен-

тах рассчитывают, умножая процентное содер-
жание ампициллина на 1,063.

ХРАНЕНИЕ

В воздухонепроницаемом контейнере. 
Стерильная субстанция — в стерильном 

воздухонепроницаемом контейнере с контролем 
первого вскрытия.

ПРИМЕСИ

H

2

N

N

S

CH

3

CH

3

CO

2

H

H

H

H

O

A. (2

S

,5

R

,6

R

)-6-Амино-3,3-диметил-7-оксо-

4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая 
кислота (6-аминопенициллановая кислота).

O

H

N

N

S

CH

3

CH

3

NH

2

CO

2

H

H

H

H

H

O

B. (2

S

,5

R

,6

R

)-6-[[(2

S

)-2-Амино-2-фенил-

ацетил]амино]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-
азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота 
(L-ампициллин).

*

N

H

*

H

N

*

S

HN

O

O

CH

3

CH

3

H

CO

2

H

 

C. (4

S

)-2-(3,6-Диоксо-5-фенилпиперазин-2-

ил)-5,5-диметилтиазолидин-4-карбоновая кис-
лота (дикетопиперазины ампициллина).

O

H

N

HN

∗

S

CH

3

CH

3

NH

2

CO

2

H

H

H

∗

R

D. R = CO

2

H: (4

S

)-2-[[[(2

R

)-2-Амино-2-фенил-

ацетил]амино]карбоксиметил]-5,5-диметил-
тиазолидин-4-карбоновая кислота (пеницилла-
новые кислоты ампициллина).

F. R = H: (2

RS

,4

S

)-2-[[[(2

R

)-2-Амино-2-фенил-

ацетил]амино]метил]-5,5-диметилтиазолидин-4-
карбоновая кислота (пенициллановые кислоты 
ампициллина).

O

H

N

N

S

NH

2

H

H

H

H

O

CH

3

CH

3

N

H

O

H

CO

2

H

E. (2

R

)-2-[[[(2

S

,5

R

,6

R

)-6-[[(2

R

)-2-Амино-2-фенил-

ацетил]амино]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-
азабицикло[3.2.0]гепт-2-ил]карбонил]амино]-
2-фенилуксусная кислота (ампициллинил-D-
фенилглицин).

HN

NH

O

O

H

H

G. (3

R

,6

R

)-3,6-Дифенилпиперазин-2,5-дион.

N

N

OH

H. 3-Фенилпиразин-2-ол.

O

H

N

N

S

CH

3

CH

3

NH

CO

2

H

H

H

H

H

O

NH

2

H

O

I. (2

S

,5

R

,6

R

)-6-[[(2

R

)-2-[[(2

R

)-2-Амино-2-фени-

лацетил]амино]-2-фенилацетил]амино]-3,3-диме-
тил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-кар-
боновая кислота (D-фенилглицилампициллин).

H

3

C

O

H

N

N

S

CH

3

CH

3

CO

2

H

H

H

H

H

3

C

O

CH

3

J. (2

S

,5

R

,6

R

)-6-[(2,2-Диметилпропаноил)

амино]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азаби-
цикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота.

159

Ампициллин тригидрат

CO

2

H

NH

H

O

CH

3

H

3

C

H

3

C

K. (2

R

)-2-[(2,2-Диметилпропаноил)амино]-2-

фенилуксусная кислота.

CO

2

H

NH

2

H

L. (2

R

)-2-Амино-2-фенилуксусная кислота 

(D-фенилглицин).

O

H

N

N

S

CH

3

CH

3

CO

2

H

H

H

H

O

HN

H

O

H

N

HN

*

S

CH

3

CH

3

CO

2

H

H

*

H

HN

O

H

n

M. Со-олигомеры ампициллина и пеницил-

лановых кислот ампициллина.

HO

O

H

N

HN

*

S

CH

3

CH

3

CO

2

H

H

*

H

HN

O

H

n

N. Олигомеры пенициллановых кислот ам-

пициллина.

 АМПИЦИЛЛИН ТРИГИДРАТ

Ampicillinum trihydricum

AMPICILLIN TRIHYDRATE

O

H

N

N

S

CH

3

CH

3

NH

2

CO

2

H

H

H

H

H

O

3H

2

O

C

16

H

19

N

3

O

4

S · 3H

2

O 

 М.м. 403,5

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Ампициллин тригидрат содержит не 

менее 96,0 % и не более 102,0 % (2

S

,5

R

,6

R

)-

6[[(2

R

)-2-амино-2-фенилацетил]амино]-3,3-

диметил-7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]-
гептан-2-карбоновой кислоты в пересчете на 
безводное вещество.

Полусинтетический продукт, полученный из 

продукта ферментации.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Белый или почти белый кристаллический 

порошок. 

Малорастворим в воде, практически нераст-

ворим в 96 % спирте и в жирных маслах. Рас-
творяется в разведенных растворах кислот и ги-
дроксидов щелочных металлов.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Первая идентификация: А, D.
Вторая идентификация: B, C, D.

А.

 Абсорбционная спектрофотометрия в 

инфракрасной области (

2.2.24

).

Сравнение

: 

ФСО ампициллина тригидра-

та 

# или спектр, представленный на рисунке 1.

В.

 Тонкослойная хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор

. 25 мг испытуе-

мого образца растворяют в 10 мл 

раствора 

натрия гидрокарбоната Р

.

Раствор сравнения (а).

 25 мг 

ФСО ам-

пициллина тригидрата

 растворяют в 10 мл 

раствора натрия гидрокарбоната Р

.

Раствор сравнения (b).

 25 мг 

ФСО амок-

сициллина тригидрата

 и 25 мг 

ФСО ампи-

циллина тригидрата

 растворяют в 10 мл 

раствора натрия гидрокарбоната Р

.

Пластинка

: ТСХ пластинка со слоем 

си-

ликагеля Н силанизированного Р.

Подвижная фаза

: смесь из 10 объемов 

ацетона Р

 и 90 объемов раствора 154 г/л 

ам-

мония ацетата Р

, доведенного до рН 5,0 

кис-

лотой уксусной ледяной Р

.

Наносимый объем пробы

: 1 мкл.

Фронт подвижной фазы

: не менее 15 см 

от линии старта.

Высушивание

: на воздухе.

Проявление

: пластинку обрабатывают 

парами йода до проявления пятен. Просма-
тривают при дневном свете.

Пригодность хроматографической си-

стемы

: раствор сравнения (b):

 

– на хроматограмме обнаруживаются два 

полностью разделенных пятна.

Результаты

: на хроматограмме испыту-

емого раствора обнаруживается пятно, соот-
ветствующее по расположению, цвету и раз-
меру основному пятну на хроматограмме 
раствора сравнения (а).

С. 

2 мг испытуемого образца помеща-

ют в пробирку длиной около 150 мм и диаме-
тром около 15 мм, увлажняют 0,05 мл 

воды Р

, 

прибавляют 2 мл 

раствора формальдегида 

в серной кислоте Р

 и встряхивают. Раствор 

практически бесцветный. Пробирку выдержи-

160

вают в водяной бане в течение 1 мин. Появля-
ется темно-желтое окрашивание.

D.

 Испытуемый образец выдерживает ис-

пытание «Вода» как указано в разделе «Ис-
пытания».

ИСПЫТАНИЯ

Прозрачность 

(

2.2.1

). 1,0 г испытуемо-

го образца растворяют в 10 мл 

1 М

 

раст-

вора

 

кислоты хлористоводородной

 (раствор 

А). 1,0 г испытуемого образца растворяют в 
10 мл 

раствора аммиака разведенного Р2

 

(раствор В). Сразу после приготовления рас-
творы А и В по степени мутности не должны 
превышать эталон II.

рН

 (

2.2.3

). От 3,5 до 5,5. 0,1 г испытуемо-

го образца растворяют в 

воде, свободной от 

углерода диоксида, Р 

и доводят до объема 

40 мл этим же растворителем. 

Удельное оптическое вращение

 (

2.2.7

). 

От +280 до +305 в пересчете на безводное ве-
щество. 62,5 мг испытуемого образца раство-
ряют в 

воде Р

 и доводят до объема 25,0 мл 

этим же растворителем.

Сопутствующие примеси

. Жидкостная 

хроматография (

2.2.29

).

Испытуемый раствор (а)

. 31,0 мг испы-

туемого образца растворяют в подвижной 
фазе А и доводят до объема 50,0 мл этим же 
растворителем.

Испытуемый раствор (b)

. 

Раствор го-

товят непосредственно перед использо-
ванием.

 31,0 мг испытуемого образца раст-

воряют в по-движной фазе А и доводят до 
объема 10,0 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (а).

 27,0 мг 

ФСО ам-

пициллина безводного

 растворяют в подвиж-

ной фазе А и доводят до объема 50,0 мл этим 
же растворителем.

Раствор сравнения (b).

 2 мг 

ФСО цефра-

дина

 растворяют в подвижной фазе А и до-

водят до объема 50 мл этим же растворите-
лем. К 5 мл полученного раствора прибавля-
ют 5 мл раствора сравнения (а). 

Раствор сравнения (с).

 1,0 мл раствора 

сравнения (а) доводят подвижной фазой А до 
объема 20,0 мл. 

Условия хроматографирования:

 

–

колонка

 длиной 0,25 м и внутренним 

диаметром 4,6 мм, заполненная 

силикагелем 

октадецилсилильным для хроматографии Р

 

с размером частиц 5 мкм;

 

–

подвижная фаза

: 

 

– подвижная фаза А: к 0,5 мл 

кисло-

ты уксусной разведенной Р

 прибавляют 

50 мл 

0,2 М раствора калия дигидрофос-

фата Р

, 50 мл 

ацетонитрила Р

 и дово-

дят 

водой Р

 до объема 1000 мл;

 

– подвижная фаза В: к 0,5 мл 

кисло-

ты уксусной разведенной Р

 прибавляют 

50 мл 

0,2 М раствора калия дигидрофос-

фата Р

, 400 мл 

ацетонитрила Р

 и дово-

дят 

водой Р

 до объема 1000 мл;

Время (мин)

Подвижная 

фаза А

(%, 

об/об

)

Подвижная 

фаза В

(%, 

об/об

)

0 — 

t

R

85

15

t

R

 

—

 

(

t

R

 + 30)

85 → 0

15 → 100

(

t

R

 + 30) — (

t

R

 + 45)

0

100

(

t

R

 + 45) — (

t

R

 + 60)

85

15

t

R

 — 

время удерживания ампициллина на хроматограмме 

раствора сравнения (с).

Если для достижения необходимого разре-

шения изменялось соотношение подвижных фаз 
А и В, то подвижную фазу полученного состава 
используют в начальном времени градиента и 
для количественного определения.

 

–

скорость подвижной фазы

: 1,0 мл/мин;

 

–

спектрофотометрический детектор

, 

длина волны 254 нм;

 

–

объем вводимой пробы

: по 50 мкл раство-

ров сравнения (b) и (с) хроматографируют изо-
кратически, используя соотношение подвижных 
фаз А и В начального времени градиента; 50 мкл 
испытуемого раствора (b) хроматографируют со-
гласно программе градиента; 50 мкл подвижной 
фазы А хроматографируют согласно программе 
градиента в качестве контрольного опыта.

Пригодность хроматографической систе-

мы

: раствор сравнения (b):

 

–

разрешение

: не менее 3,0 между пиками 

ампициллина и цефрадина; при необходимости 
изменяют соотношение подвижных фаз А и В;

Предельное содержание примесей

:

 

–

любая примесь

 (не более 1,0 %): на хро-

матограмме испытуемого раствора (b

)

 площадь 

любого пика, кроме основного, не должна пре-
вышать площадь основного пика на хромато-
грамме раствора сравнения (с).

N,N

-Диметиланилин

  (

2.4.26, метод В

). Не 

более 0,002 % (20 ppm).

Вода 

(

2.5.12

). Не менее 12,0 % и не более 

15,0 %. Определение проводят из 0,100 г испы-
туемого образца.

Сульфатная зола

  (

2.4.14, метод А

). Не 

более 0,5 %. Определение проводят из 1,0 г ис-
пытуемого образца.

#

 

Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

#

 

Микробиологическая чистота 

(

2.6.12, 

2.6.13, 5.1.4

). Ампициллин тригидрат в условиях 

испытания обладает антимикробным действи-
ем. Для устранения антимикробного действия 
посев на питательные среды проводят методом 
мембранной фильтрации.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Жидкостная хроматография (

2.2.29

), как 

указано в испытании «Сопутствующие приме-
си», со следующими изменениями:

Условия хроматографирования:

 

–

подвижная фаза

: соотношение подвиж-

ных фаз А и В начального времени градиен-
та в соответствии с параметрами пригодности 
хроматографической системы;

161

Ампициллин тригидрат

 

–

объем вводимой пробы

: по 50 мкл испы-

туемого раствора (а) и раствора сравнения (а). 

Пригодность хроматографической си-

стемы

: раствор сравнения (а):

 

–

относительное стандартное откло-

нение

: не более 1,0 % для площадей пиков 

при шести повторных вводах пробы.

Содержание C

16

H

19

N

3

O

4

S рассчитывают в 

процентах с учетом содержания ампициллина 
в 

ФСО ампициллина безводного

.

ХРАНЕНИЕ

В воздухонепроницаемом контейнере. 

ПРИМЕСИ

H

2

N

N

S

CH

3

CH

3

CO

2

H

H

H

H

O

A .   ( 2

S

, 5

R

, 6

R

) - 6 - А м и н о - 3 , 3 - д и м ет и л -

7-ок с о-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-
карбоновая кислота (6-аминопенициллановая 
кислота).

O

H

N

N

S

CH

3

CH

3

NH

2

CO

2

H

H

H

H

H

O

B. (2

S

,5

R

,6

R

)-6-[[(2

S

)-2-Амино-2-фенил-

ацетил]амино]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-
азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кисло-
та (L-ампициллин).

*

N

H

*

H

N

*

S

HN

O

O

CH

3

CH

3

H

CO

2

H

 

C. (4

S

)-2-(3,6-Диоксо-5-фенилпиперазин-2-

ил)-5,5-диметилтиазолидин-4-карбоновая кисло-
та (дикетопиперазины ампициллина).

O

H

N

HN

∗

S

CH

3

CH

3

NH

2

CO

2

H

H

H

∗

R

D. R = CO

2

H: (4

S

)-2-[[[(2

R

)-2-Амино-2-фенил-

ацетил]амино]карбоксиметил]-5,5-диметил-
тиазолидин-4-карбоновая кислота (пеницилла-
новые кислоты ампициллина);

F. R = H: (2

RS

,4

S

)-2-[[[(2

R

)-2-Амино-2-фенил-

ацетил]амино]метил]-5,5-диметилтиазолидин-4-
карбоновая кислота (пенициллановые кислоты 
ампициллина).

O

H

N

N

S

NH

2

H

H

H

H

O

CH

3

CH

3

N

H

O

H

CO

2

H

E. (2

R

)-2-[[[(2

S

,5

R

,6

R

)-6-[[(2

R

)-2-Амино-2-фе-

нилацетил]амино]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-
азабицикло[3.2.0]гепт-2-ил]карбонил]амино]-

 74

 76

 78

 80

 82

 84

 86

 88

 90

 92

 94

 96

 98

 100

Пропускание

 1000 

 1500 

 2000 

 2000 

 3000 

Волновое  число  (см

-1

)

Рисунок 1. 

Инфракрасный спектр пропускания ФСО ампициллина тригидрата.

162

2-фенилуксусная кислота (ампициллинил-D-
фенилглицин).

HN

NH

O

O

H

H

G. (3

R

,6

R

)-3,6-Дифенилпиперазин-2,5-дион.

N

N

OH

H. 3-Фенилпиразин-2-ол.

O

H

N

N

S

CH

3

CH

3

NH

CO

2

H

H

H

H

H

O

NH

2

H

O

I. (2

S

,5

R

,6

R

)-6-[[(2

R

)-2-[[(2

R

)-2-Амино-2-фенил-

ацетил]амино]-2-фенилацетил]амино]-3,3-диметил-
7-оксо-4-тиа-1-азабицикло[3.2.0]гептан-2-карбоно-
вая кислота (D-фенилглицилампициллин).

H

3

C

O

H

N

N

S

CH

3

CH

3

CO

2

H

H

H

H

H

3

C

O

CH

3

J. (2

S

,5

R

,6

R

)-6-[(2,2-Диметилпропаноил)

амино]-3,3-диметил-7-оксо-4-тиа-1-азаби-
цикло[3.2.0]гептан-2-карбоновая кислота.

CO

2

H

NH

H

O

CH

3

H

3

C

H

3

C

K. (2

R

)-2-[(2,2-Диметилпропаноил)амино]-2-

фенилуксусная кислота.

CO

2

H

NH

2

H

L. (2

R

)-2-Амино-2-фенилуксусная кислота 

(D-фенилглицин).

O

H

N

N

S

CH

3

CH

3

CO

2

H

H

H

H

O

HN

H

O

H

N

HN

*

S

CH

3

CH

3

CO

2

H

H

*

H

HN

O

H

n

M. Со-олигомеры ампициллина и пеницил-

лановых кислот ампициллина.

H

N

O

S

NH

O

CH

3

CH

3

H

CO

2

H

NH

2

H

N. (3

S

)-6-[[(2

R

)-2-амино-2-фенилацетил]-

амино]-2,2-диметил-7-оксо-2,3,4,7-тетрагидро-
1,4-тиазепин-3-карбоновая кислота.

 АРГИНИНА АСПАРТАТ

Arginini aspartas

ARGININE ASPARTATE

H

N

H

2

N

NH

CO

2

H

H

NH

2

HO

2

C

CO

2

H

H

NH

2

C

6

H

14

N

4

O

2

 · C

4

H

7

NO

4

 

 M.м. 307,3

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Аргинина аспартат содержит не менее 

99,0 

% и не более 101,0 

% (2

S

)-2-амино-5-

гуанидинпентановой кислоты (2

S

)-2-аминобутан-

диоата в пересчете на сухое вещество.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Белые или почти белые гранулы либо порошок.
Очень легко растворим в воде, практически 

нерастворим в 96 % спирте и в метиленхлориде.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

A.

 Испытуемый образец выдерживает испы-

тание «Удельное оптическое вращение» как ука-
зано в разделе «Испытания».

B.

 Абсорбционная спектрофотометрия в ин-

фракрасной области (

2.2.24

).

Сравнение

: 

ФСО аргинина аспартата

 # 

или спектр, представленный на рисунке 1.

С. 

Просматривают хроматограммы, получен-

ные в испытании «Нингидрин-положительные 
вещества». На хроматограмме испытуемого 
раствора (b) обнаруживаются два пятна, соот-
ветствующие по расположению, цвету и размеру 
двум основным пятнам на хроматограмме раст-
вора сравнения (а).

ИСПЫТАНИЯ

Раствор S

. 5,0 г испытуемого образца раст-

воряют в 

воде, свободной от углерода диокси-

да, Р

 и доводят до объема 50 мл этим же раст-

ворителем.

Прозрачность

  (

2.2.1

). Раствор S должен 

быть прозрачным.

Цветность 

(

2.2.2, метод II

). Окраска раст-

вора S должна быть не интенсивнее эталона 
Y(Ж)

7

.

163

Аргинина аспартат

pH 

(

2.2.3

). От 6,0 до 7,0. Измеряют 

рН раствора S.

Удельное оптическое вращение

  (

2.2.7

). 

От +25 до +27 в пересчете на сухое вещество. 
2,50 г испытуемого образца растворяют в 

кисло-

те хлористоводородной разведенной Р

 и дово-

дят до объема 25,0 мл этим же растворителем.

Нингидрин-положительные вещества

. 

Тонкослойная хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор (а).

 0,20 г испыту-

емого образца растворяют в

 воде Р 

и доводят 

до объема 10 мл этим же растворителем.

Испытуемый раствор (b). 

1 мл испытуемого 

раствора (а) доводят 

водой Р

 до объема 10 мл

.

Раствор сравнения (а). 

25 мг 

аргинина Р

 

и 25 мг 

кислоты аспарагиновой Р

 растворяют 

в 

воде Р 

и доводят до объема 25 мл этим же 

растворителем.

 

Раствор сравнения (b). 2 мл раствора срав-

нения (а) доводят 

водой Р

 до объема 50 мл

.

Пластинка

: 

ТСХ пластинка со слоем си-

ликагеля G Р

.

Подвижная фаза

: 

раствор аммиака Р 

— 

пропанол Р

 (36:64, 

об/об).

Наносимый объем пробы

: 5 мкл.

Фронт подвижной фазы

: не менее 2/3 

высоты пластинки.

Высушивание

: при температуре от 100°С 

до 105°С в течение 10 мин.

Проявление

: пластинку опрыскивают 

рас-

твором нингидрина Р

 и нагревают при темпе-

ратуре от 100°С до 105°C в течение 10 мин.

Пригодность хроматографической си-

стемы

: раствор сравнения (b):

 

– на хроматограмме обнаруживаются два 

полностью разделенных основных пятна.

Предельное содержание примесей

:

 

–

любая примесь

 (не более 0,2 %): на хро-

матограмме испытуемого раствора (а) любое 
пятно, кроме двух основных пятен, должно 
быть не интенсивнее каждого из двух основ-
ных пятен на хроматограмме раствора срав-
нения (b).

Хлориды

 

(

2.4.4

). Не более 0,02 

% 

(200 ppm). 2,5 мл раствора S доводят 

водой Р

 

до объема 15 мл.

Сульфаты

  (

2.4.13

). Не более 0,03 

% 

(300 ppm). К 0,5 г испытуемого образца при-
бавляют 2,5 мл 

кислоты хлористоводород-

ной разведенной Р

 и доводят 

водой дистил-

лированной Р

 до объема 15 мл

. 

Испытание 

проводят через 30 мин после приготовления 
раствора.

Аммония соли

  (

2.4.1

). Не более 0,01 % 

(100 ppm). Определение проводят из 100 мг 
испытуе-мого образца.

Тяжелые металлы

  (

2.4.8, метод А

). Не 

более 0,002 % (20 ppm). 12 мл раствора S 
должны выдерживать испытание на тяжелые 
металлы. Эталон готовят с использованием 

эталонного раствора свинца (2 ppm

 

Pb) Р

.

Потеря в массе при высушивании 

(

2.2.32

). Не более 0,5 %. 1,000 г испытуемо-

го образца сушат при температуре 60°С в те-
чение 24 ч.

Сульфатная зола 

(

2.4.14, метод А

). Не 

более 0,1 %. Определение проводят из 1,0 г 
испытуемого образца.

 64

 66

 68

 70

 72

 74

 76

 78

 80

 82

 84

 86

 88

 90

 92

 94

 96

 98

 100

Пропускание

 1000 

 1500 

 2000 

 2000 

 3000 

Волновое  число  (см

-1

)

Рисунок 1. 

Инфракрасный спектр пропускания ФСО аргинина аспартата.

164

#

 

Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

#

 

Микробиологическая чистота 

(

2.6.12, 

2.6.13, 5.1.4

). Аргинина аспартат в условиях ис-

пытания не обладает антимикробным действием.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ 

80,0 мг испытуемого образца растворяют в 

2 мл 

кислоты муравьиной безводной Р

, прибав-

ляют 50 мл 

кислоты уксусной безводной Р

 и ти-

труют 

0,1 М раствором кислоты хлорной

 потен-

циометрически (

2.2.20

).

1 мл 

0,1 М раствора кислоты хлорной

 соот-

ветствует 10,24 мг C

6

H

14

N

4

O

2

·C

4

H

7

NO

4

.

 АРГИНИНА ГИДРОХЛОРИД

Arginini hydrochloridum

AR G ININE HYDROCHLORIDE

H

N

H

2

N

NH

CO

2

H

H

NH

2

HCl

 C 

6

H

14

N

4

O

2

 · HCl 

 М.м. 210,7

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Аргинина гидрохлорид содержит не менее 

98,5 

% и не более 101,0 

% (

S

)-2-амино-5-

гуанидинпентановой кислоты гидрохлорида в 
пересчете на сухое вещество.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Белый или почти белый кристаллический 

порошок либо бесцветные кристаллы.

Легкорастворим в воде, очень мало раство-

рим в 96 % спирте.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Первая идентификация: А, В, Е.
Вторая идентификация: А, С, D, E.

А.

 Испытуемый образец выдерживает испы-

тание «Удельное оптическое вращение» как ука-
зано в разделе «Испытания».

В.

 Абсорбционная спектрофотометрия в ин-

фракрасной области (

2.2.24

).

Приготовление

: в дисках.

Сравнение: ФСО аргинина гидрохлорида # 

или спектр, представленный на рисунке 1

С.

 Просматривают хроматограммы, получен-

ные в испытании «Нингидрин-положительные ве-
щества». На хроматограмме испытуемого раст-
вора (b) обнаруживается пятно, соответствующее 
по расположению, цвету и размеру основному 
пятну на хроматограмме раствора сравнения (а).

D.

 25 мг испытуемого образца раство-

ряют в 2 мл 

воды Р

, прибавляют 1 мл 

раствора 

α-нафтола Р 

и 2 мл смеси из равных объемов 

раствора натрия гипохлорита концентрирован-
ного

 

Р

 и 

воды Р

. Появляется красное окрашивание.

Е.

 Испытуемый образец дает реакцию (а) на 

хлориды (

2.3.1

).

ИСПЫТАНИЯ

Раствор S

. 2,5 г испытуемого образца раст-

воряют в 

воде дистиллированной Р

 и доводят 

до объема 50 мл этим же растворителем.

Прозрачность 

(

2.2.1

). Раствор S должен 

быть прозрачным.

Цветность 

(

2.2.2, метод II

). Окраска раст-

вора S должна быть не интенсивнее эталона 
BY(КЖ)

6

.

Удельное оптическое вращение

  (

2.2.7

). 

От +21,0 до +23,5 в пересчете на сухое веще-
ство. 2,00 г испытуемого образца растворяют в 

кислоте хлористоводородной Р1

 и доводят до 

объема 25,0 мл этим же растворителем.

Нингидрин-положительные вещества

. 

Тонкослойная хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор (а)

. 0,10 г испытуе-

мого образца растворяют в 

воде Р 

и доводят до 

объема 10 мл этим же растворителем.

Испытуемый раствор (b)

. 1 мл испытуе-

мого раствора (а) доводят 

водой Р

 до объема 

50 мл.

Раствор сравнения (a).

 10 мг 

ФСО аргини-

на гидрохлорида

 растворяют в 

воде Р 

и дово-

дят до объема 50 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (b). 

5 мл испытуемого 

раствора (b) доводят 

водой Р

 до объема 20 мл.

Раствор сравнения (с)

. 10 мг

 ФСО аргинина 

гидрохлорида

 и 10 мг

 ФСО лизина гидрохлорида

 

растворяют в 

воде Р 

и доводят до объема 25 мл 

этим же растворителем.

Пластинка

: 

ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля Р

.

Подвижная фаза

: 

аммиака раствор концен-

трированный Р — 2-пропанол Р 

(30:70, 

об/об

).

Наносимый объем пробы

: 5 мкл.

Фронт подвижной фазы

: не менее 15 см от 

линии старта.

Высушивание

: при температуре от 100°С до 

105°С до полного удаления аммиака.

Проявление

: пластинку опрыскивают 

рас-

твором нингидрина Р

 и нагревают при темпера-

туре от 100°С до 105°C в течение 15 мин.

Пригодность хроматографической систе-

мы

: раствор сравнения (с):

 

– на хроматограмме обнаруживаются два 

полностью разделенных пятна.

Предельное содержание примесей

:

 

–

любая примесь

 (не более 0,5 %): на хрома-

тограмме испытуемого раствора (а) любое пятно, 
кроме основного, должно быть не интенсивнее 
основного пятна на хроматограмме раствора срав-
нения (b).

Сульфаты 

(

2.4.13

). Не более 0,03 

% 

(300 ppm). 10 мл раствора S доводят 

водой 

дистиллированной Р

 до 15 мл

. 

Полученный 

165

Артикаина гидрохлорид

раствор должен выдерживать испытание на 
сульфаты.

Аммония соли 

(

2.4.1, метод В

). Не более 

0,02 % (200 ppm). 50 мг испытуемого образца 
должны выдерживать испытание на соли аммо-
ния. Эталон готовят с использованием 0,1 мл 

эталонного раствора аммония (100 ppm

 

NH

4

) Р

.

Железо 

(

2.4.9

). Не более 0,001 % (10 ppm). 

1,0 г испытуемого образца помещают в дели-
тельную воронку, растворяют в 10 мл 

кислоты 

хлористоводородной разведенной Р

, встряхива-

ют трижды, каждый раз в течение 3 мин, с 

ме-

тилизобутилкетоном Р1

 порциями по 10 мл. 

Объединенные органические слои встряхивают 
с 10 мл 

воды Р

 в течение 3 мин. Водный слой 

должен выдерживать испытание на железо.

Тяжелые металлы 

(

2.4.8, метод А

). Не 

более 0,001 % (10 ррm). 2,0 г испытуемого об-
разца растворяют в 

воде Р

 и доводят до объема 

20 мл этим же растворителем. 12 мл получен-
ного раствора должны выдерживать испытание 
на тяжелые металлы. Эталон готовят с исполь-
зованием 

эталонного раствора свинца (1 ppm

 

Pb) Р

.

Потеря в массе при высушивании 

(

2.2.32

). 

Не более 0,5 %. 1,000 г испытуемого образца 
сушат при температуре 105°С.

Сульфатная зола 

(

2.4.14, метод А

)

. Не 

более 0,1 %. Определение проводят из 1,0 г ис-
пытуемого образца.

#

 

Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

#

 

Микробиологическая чистота 

(

2.6.12, 

2.6.13,

 

5.1.4

)

. Аргинина гидрохлорид в услови-

ях испытания не обладает антимикробным дей-
ствием.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ 
0,180 г испытуемого образца растворяют в 

3 мл 

кислоты муравьиной безводной Р

, прибав-

ляют 30 мл 

кислоты уксусной безводной Р

 и ти-

труют 

0,1 М раствором кислоты хлорной

 до пе-

рехода окраски от коричневато-желтой до зе-
леной, используя в качестве индикатора 0,1 мл 

раствора нафтолбензеина Р

.

1 мл 

0,1 М раствора кислоты хлорной

 соот-

ветствует 21,07 мг C

6

H

14

N

4

O

2

·HCl.

ХРАНЕНИЕ
В защищенном от света месте.

 АРТИКАИНА ГИДРОХЛОРИД

Articaini hydrochloridum

ARTICAINE HYDROCHLORIDE

CH

3

N

H

H

N

S

O

O

H

3

C

CH

3

O

CH

3

H

HCl

и энантиомер

C

13

H

20

N

2

O

3

S · HCl 

 М.м. 320,8

 40

 45

 50

 55

 60

 65

 70

 75

 80

 85

 90

 95

 100

Пропускание

 1000 

 1500 

 2000 

 2000 

 3000 

Волновое  число  (см

-1

)

Рисунок 1. 

Инфракрасный спектр пропускания ФСО 

аргинина гидрохлорида в дисках с калия бромидом Р.

166

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Артикаина гидрохлорид содержит не 

менее 98,5 

% и не более 101,0 

% метил-4-

метил-3-[[(2

RS

)-2-(пропиламино)пропаноил]-

амино]тиофен-2-карбоксилата гидрохлорида в 
пересчете на сухое вещество.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Белый или почти белый кристаллический 

порошок.

Легкорастворим в воде и в 96 % спирте.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Первая идентификация: B, D.
Вторая идентификация: A, C, D.

А.

 Абсорбционная спектрофотометрия в 

ультрафиолетовой и видимой областях (

2.2.25

).

Испытуемый раствор

. 50,0 мг испытуемо-

го образца растворяют в растворе 1 г/л 

кисло-

ты хлористоводородной Р

 и доводят до объема 

100,0 мл этим же растворителем. 5,0 мл полу-
ченного раствора доводят раствором

 

1 г/л 

кисло-

ты хлористоводородной Р

 до объема 100,0 мл.

Диапазон длин волн

: от 200 нм до 350 нм.

Максимум поглощения

: при 272 нм.

Удельный показатель поглощения в макси-

муме

: от 290 до 320.

В. 

Абсорбционная спектрофотометрия в ин-

фракрасной области (

2.2.24

).

Приготовление

: # в дисках.

Сравнение

: 

ФСО артикаина гидрохлорида 

# 

или спектр, представленный на рисунке 1.

Если полученные спектры отличаются, то 

0,1 г испытуемого образца и 0,1 г 

ФСО арти-

каина гидрохлорида

 по отдельности растворяют 

в 5 мл 

воды Р

, прибавляют 3 мл насыщенного 

раствора 

натрия гидрокарбоната Р

 и дважды 

встряхивают с 

метиленхлоридом Р

 порциями 

по 2 мл. Метиленхлоридные слои объединяют, 
доводят 

метиленхлоридом Р

 до объема 5,0 мл 

и высушивают с помощью 

натрия сульфата 

безводного Р

. По 20 мкл полученных раство-

ров по каплям наносят на диски массой 300 мг и 
снимают новые спектры.

С.

 Тонкослойная хроматография (

2.2.27

).

Испытуемый раствор

. 20 мг испытуемого 

образца растворяют в 5 мл 

96 % спирта Р

.

Раствор сравнения

. 20 мг 

ФСО арти-

каина гидрохлорида

 растворяют в 5 мл 

96 % 

спирта Р

.

Пластинка

: 

ТСХ пластинка со слоем сили-

кагеля F

254

 Р

.

Подвижная фаза

: 

триэтиламин Р

 — 

эти-

лацетат Р

 — 

гептан Р

 (10:35:65, 

об/об/об

).

Наносимый объем пробы

: 5 мкл.

Фронт подвижной фазы

: не менее 15 см от 

линии старта.

Высушивание

: на воздухе.

Проявление

: пластинку просматривают 

в ультрафиолетовом свете при длине волны 
254 нм.

Результаты

: на хроматограмме испытуе-

мого раствора обнаруживается основное пятно, 
соответствующее по расположению и размеру 
основному пятну на хроматограмме раствора 
сравнения.

D.

 Испытуемый образец дает реакцию (а)

 

на хлориды (

2.3.1

).

ИСПЫТАНИЯ

Раствор S

. 0,50 г испытуемого образца 

растворяют в 

воде Р

 и доводят до объема 10 мл 

этим же растворителем.

Прозрачность 

(

2.2.1

). Раствор S должен 

быть прозрачным

.

Цветность 

(

2.2.2, метод I

). Окраска раст-

вора S должна быть не интенсивнее эталона 
BY(КЖ)

6

.

рН 

(

2.2.3

). От 4,2 до 5,2. 0,20 г испытуемого 

образца растворяют в 

воде, свободной от угле-

рода диоксида, Р

 и доводят до объема 20,0 мл 

этим же растворителем.

Сопутствующие примеси

. Жидкостная 

хроматография (

2.2.29

).

Испытуемый раствор.

 10,0 мг испытуе-

мого образца растворяют в подвижной фазе и 
доводят до объема 10,0 мл этим же раствори-
телем.

Раствор сравнения (а).

 1,0 мл испытуемого 

раствора доводят подвижной фазой до объема 
100,0 мл. 1,0 мл полученного раствора доводят 
подвижной фазой до объема 10,0 мл.

Раствор сравнения (b).

 10,0 мг 

ФСО

 

арти-

каина примеси А 

и 5,0 мг 

ФСО артикаина при-

меси Е 

растворяют в подвижной фазе и доводят 

до объема 50,0 мл этим же растворителем.

Раствор сравнения (с).

 К 50,0

 

мг

 ФСО ар-

тикаина гидрохлорида

 прибавляют 1,0 мл раст-

вора сравнения (b) и доводят подвижной фазой 
до объема 50 мл.

Раствор сравнения (d).

 1,0 мл раствора 

сравнения (b) доводят подвижной фазой до 
объема 50,0 мл.

Условия хроматографирования:

 

–

колонка

 длиной 0,25 м и внутренним ди-

аметром 4,6 мм, заполненная сферическим 

си-

ликагелем октадецилсилильным эндкепиро-
ванным для хроматографии Р

 (размер частиц 

5 мкм) с удельной площадью поверхности 
335 м

2

/г и содержанием углерода 19 %;

 

–

температура

: 45°С;

 

–

подвижная фаза

: смешивают 25 объемов 

ацетонитрила Р

 и 75 объемов раствора, приго-

товленного следующим образом: 2,02 г 

натрия 

гептансульфоната Р

 и 4,08 г 

калия дигидро-

фосфата Р

 растворяют в 

воде Р

 и доводят до 

объема 1000 мл этим же растворителем; дово-
дят 

кислотой фосфорной Р

 до рН 2,0;

 

–

скорость подвижной фазы

: 1 мл/мин;

 

–

спектрофотометрический детектор

, 

длина волны 276 нм;

 

–

объем вводимой пробы

: по 10 мкл испытуе-

мого раствора и растворов сравнения (a), (c) и (d);

167

Артикаина гидрохлорид

 

–

время хроматографирования

: 5-крат-

ное время удерживания артикаина.

Относительное удерживание

 (по отно-

шению к артикаину; время удерживания — 
около 9,3 мин): примесь В — около 0,6; при-
месь D — около 0,7; примесь А — около 0,8; 
примесь Е — около 0,86; примесь F — около 
0,9; примесь G — около 1,7; примесь Н — 
около 2,1, примесь I — около 2,6; примесь 
С — около 3,6; примесь J — около 4,0.

Пригодность хроматографической си-

стемы

: раствор сравнения (с):

 

–

разрешение

: не менее 1,2 между пиками 

примеси А и примеси Е.

Предельное содержание примесей

:

 

–

примесь А

 (не более 0,2 %): на хромато-

грамме испытуемого раствора площадь пика, 
соответствующего примеси А, не должна пре-
вышать площадь соответствующего пика на 
хроматограмме раствора сравнения (d);

 

–

любая другая примесь

 (не более 0,1 %): на 

хроматограмме испытуемого раствора площадь 
любого пика, кроме основного и пика примеси А, 
не должна превышать площадь основного пика 
на хроматограмме раствора сравнения (а);

 

–

сумма других примесей

 (не более 0,5 %): 

на хроматограмме испытуемого раствора 
сумма площадей всех пиков, кроме основно-
го и пика примеси А, не должна превышать 
5-кратную площадь основного пика на хрома-
тограмме раствора сравнения (а).

На хроматограмме испытуемого раствора 

не учитывают пики с площадью менее 0,5 пло-

щади основного пика на хроматограмме раст-
вора сравнения (а) (0,05 %).

Тяжелые металлы 

(

2.4.8, метод А

). Не 

более 0,0005 % (5 ррm). 4,0 г испытуемого об-
разца растворяют в 20,0 мл 

воды Р

. 12 мл по-

лученного раствора должны выдерживать ис-
пытание на тяжелые металлы. Эталон гото-
вят с использованием 

эталонного раствора 

свинца (1 ррm Рb) Р.

Потеря в массе при высушивании

 

(

2.2.32

). Не более 0,5 %. 1,000 г испытуемо-

го образца сушат при температуре 105°С в те-
чение 5 ч

.

Сульфатная зола

 (

2.4.14, # метод С

). Не 

более 0,1 %. Определение проводят из 1,0 г 
испытуемого образца и с использованием 
платинового тигля.

#

 

Остаточные количества органических 

растворителей 

(

2.4.24

). Испытуемый образец 

должен выдерживать требования статьи (

5.4

).

# Микробиологическая чистота 

(

2.6.12, 

2.6.13, 5.1.4

)

. Артикаина гидрохлорид в усло-

виях испытания обладает антимикробным дей-
ствием. Посев на питательные среды № 1, № 2 
и № 11 проводят из разведения 1:20, на пита-
тельную среду № 8 — из разведения 1:100.

КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ

0,250 г испытуемого образца растворяют в 

смеси из 5,0 мл 

0,01 М раствора кислоты хло-

ристоводородной

 и 50 мл 

96 % спирта Р

 и ти-

труют 

0,1 М раствором натрия гидроксида

 по-

тенциометрически (

2.2.20

). Отмечают объем ти-

Рисунок 1. 

Инфракрасный спектр пропускания ФСО 

артикаина гидрохлорида в дисках с калия бромидом Р.

 25

 30

 35

 40

 45

 50

 55

 60

 65

 70

 75

 80

 85

 90

 95

 100

Пропускание

 1000 

 1500 

 2000 

 2000 

 3000 

Волновое  число  (см

-1

)

168

транта между двумя точками перегиба на кривой 
титрования.

1 мл 

0,1 М раствора натрия гидроксида

 со-

ответствует 32,08 мг C

13

H

20

N

2

O

3

S·HCl.

ХРАНЕНИЕ

В защищенном от света месте.

ПРИМЕСИ

Специфицированные примеси: A, B, C.
Другие обнаруживаемые примеси 

(следую-

щие вещества, если они присутствуют в значи-
тельных количествах, следует определять тем или 
иным испытанием, описанным в частной статье. Их 
содержание лимитируется общим критерием при-
емлемости для других/неспе-цифицированных 
примесей и/или общей статьей 

Субстанции для 

фармацевтического использования

. Вследствие 

этого нет необходимости идентифицировать эти 
примеси для доказательства соответствия требо-
ваниям. См. также статью 

5.10. Контроль приме-

сей в субстанциях для фармацевтического ис-
пользования

)

: D, E, F, G, H, I, J.

CH

3

N

H

H

N

S

O

O

R

CH

3

O

R'

H

и энантиомер

 

A. R = CH

3

, R’ = H: Метил-3-[[2-(пропиламино)-

ацетил]амино]-4-метилтиофен-2-карбоксилат 
(ацетамидоартикаин).

B. R = H, R’ = CH

3

: 4-Метил-3-[[(2

RS

)-2-(пропил-

амино)пропаноил]амино]тиофен-2-карбоновая 
кислота (артикаиновая кислота).

C. R = CH(CH

3

)

2

, R’ = CH

3

: 1-Метилэтил-4-ме-

тил-3-[[(2

RS

)-2-(пропиламино)пропаноил]амино]

тиофен-2-карбоксилат (артикаина изопропило-
вый эфир).

R1

N

H

N

S

O

R3

CH

3

O

CH

3

H

и энантиомер

 

R2

D. R1 = CH

2

-CH

3

, R2 = H, R3 = OCH

3

: Метил-

3-[[(2

RS

)-2-(этиламино)пропаноил]амино]-4-

метилтиофен-2-карбоксилат (этилартикаин).

E. R1 = CH(CH

3

)

2

, R2 = H, R3 = OCH

3

: Метил-

4-метил-3-[[(2

RS

)-2-[(1-метилэтил)амино]пропа-

ноил]амино]тиофен-2-карбоксилат (изопропил-
артикаин).

F. R1 = CH

2

-CH

2

-CH

3

, R2 = H, R3 = NH-CH

2

-

CH

2

-CH

3

: 4-Метил-

N

-пропил-3-[[(2

RS

)-2-(пропил-

амино)пропаноил]амино]тиофен-2-карбоксамид 
(артикаиновой кислоты пропионамид).

G. R1 = (CH

2

)

3

-CH

3

, R2 = H, R3 = OCH

3

: Ме-

тил-3-[[(2

RS

)-2-(бутиламино)пропаноил]амино]-

4-метилтиофен-2-карбоксилат (бутилартикаин).

H. R1 = R2 = CH

2

-CH

2

-CH

3

, R3 = OCH

3

: 

Метил-3-[[(2

RS

)-2-(дипропиламино)пропаноил]-

амино]-4-метилтиофен-2-карбоксилат (дипропи-
лартикаин).

NH

2

S

O

O

H

3

C

CH

3

I. Метил-3-амино-4-метилтиофен-2-карбо-

ксилат (3-аминоартикаин).

CH

3

H

N

S

O

O

H

3

C

CH

3

O

H

Br

и энантиомер

J. Метил-3-[[(2

RS

)-2-бромпропаноил]амино]

4-метитиофен-2-карбоксилат (бром-производное).

 АСКОРБИНОВАЯ КИСЛОТА 
(# ВИТАМИН  С)

 Acidum ascorbicum

ASCORBIC ACID

O

O

OH

HO

HO

OH

H

C

6

H

8

O

6

 

 М.м. 176,1

ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Аскорбиновая кислота содержит не менее 

99,0 

% и не более 100,5 

% (5

R

)-5-[(1

S

)-1,2-диги-

дроксиэтил]-3,4-дигидроксифуран-2(5

H

)-она.

ОПИСАНИЕ (СВОЙСТВА)

Белый или почти белый кристаллический 

порошок либо бесцветные кристаллы.

Легкорастворим в воде, растворим в 96 % 

спирте.

Температура плавления

:

 около 190°С с раз-

ложением.

ПОДЛИННОСТЬ (ИДЕНТИФИКАЦИЯ)

Первая идентификация: B, C. 
Вторая идентификация: A, C, D.

А.

 

Абсорбционная спектрофотометрия в 

ультрафиолетовой и видимой областях (

2.2.25

). 

Испытуемый раствор

. 0,10 г испытуемого 

образца растворяют в 

воде Р

 и немедленно дово-

дят до объема 100,0 мл этим же растворителем. 
К 10 мл 

0,1 М раствора кислоты

 

хлористоводо-

родной

 прибавляют 1,0 мл полученного раствора 

и доводят 

водой Р

 до объема 100,0 мл.