Лабораторные методы исследования в клинике (Меньшиков В.В.) - часть 70

 

  Главная      Учебники - Медицина     Лабораторные методы исследования в клинике: справочник (Меньшиков В.В.) - 1987 год

 

поиск по сайту            правообладателям  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

содержание   ..  68  69  70  71   ..

 

 

Лабораторные методы исследования в клинике (Меньшиков В.В.) - часть 70

 

 

У ч е т  р е а к ц и и . Появление агглютина-

ции указывает на наличие неполных антител

на поверхности эритроцитов. Реакция может

быть проведена в пробирках. В этом случае

2 капли (0,1 мл) различного разведения

антиглобулиновой сыворотки (в зависимости от

титра преципитинов) помещают в пробирки и

добавляют каплю отмытых эритроцитов. Осто-

рожно встряхивают и инкубируют 30 мин

при 37 °С.

У ч е т  р е а к ц и и проводят после центри-

фугирования при 1500 об/мин в течение 1 мин

(центрифуга ЦЛК-1).

Непрямая реакция Кумбса.  Х о д  о п р е д е -

л е н и я . Из локтевой вены исследуемого берут

3 мл крови в чистую сухую пробирку.

Р е а к ц и я  и д е т в  д в а  э т а п а :

первый — сенсибилизация стандартных эритро-

цитов неполными антителами, предположитель-

но находящимися в исследуемой сыворотке;

второй — агглютинация сенсибилизированных

эритроцитов антиглобулиновой сывороткой.

Необходимо использовать троекратно отмы-

тую в изотоническом растворе смесь эритроцитов

различных аллотипов 0(1) группы резусположи-

тельных. Каплю этих эритроцитов вносят в про-

бирку и на них наслаивают 3 капли исследуемой

сыворотки. Пробирки энергично встряхивают

и помещают в термостат при 37 °С на 40 мин.

Параллельно опыту ставят контрольные пробы.

Первая: в пробирку с 2 каплями стандартных

отмытых резусположительных эритроцитов 0(1)

группы вносят 3 капли антирезусной сыворотки

АВ (IV); вторая: в пробирку с 2 каплями

отмытых стандартных резусотрицательных

эритроцитов 0(1) вносят 3 капли сыворотки

AB(IV). Контрольные пробирки помещают,

так же как и опытные, в термостат при 37 °С на

40 мин.

После термостатирования из пробирок

осторожно отсасывают сыворотку. Эритроциты

трижды отмывают в изотоническом растворе

натрия хлорида. На сухую чистую тарелку

наносят в 3 точках по 1 капле антиглобулиновой

сыворотки. В первую каплю добавляют эритро-

циты, сенсибилизированные сывороткой пациен-

та, во вторую и третью — эритроциты контроля

0(1) резусположительных с антирезусной сыво-

роткой  A B ( I V ) и 0(1) резусотрицательные с

антирезусной сывороткой  A B ( I V ) . Эритроциты

тщательно перемешивают стеклянной палочкой

с антиглобулиновой сывороткой. После этого

осторожно покачивают тарелку в течение 10 мин,

но не более.

У ч е т  р е а к ц и и . При наличии в сыворот-

ке пациента неполных антител в опытной смеси

будет наблюдаться агглютинация. Контроль с

резусположительными 0(1) эритроцитами дол-

жен дать агглютинацию. В контроле с резусот-

рицательными 0(1) эритроцитами агглютинации

не должно быть. В ряде случаев неполные анти-

тела вступают в реакцию при низкой температу-

ре (4 °С), о чем необходимо помнить в исследо-

ваниях при подозрении на холодовую иммунную

цитопению.

К л и н и ч е с к о е  з н а ч е н и е . Выявление

антител к эритроцитам играет ведущую роль

в диагностике аутоиммунных гемолитических

анемий, эссенциальных или вторичных.

При системных заболеваниях (системная

красная волчанка, хронический активный гепа-

тит, болезнь Шегрена) бывает чаще положи-

тельной непрямая реакция Кумбса.

6.2.2. Резус-фактор

Реакция конглютинации с применением же-

латина.  П р и н ц и п . Эритроциты с наличием

резус-антигена агглютинируют в среде с непол-

ным антирезус-антителами в присутствии анти-

глобулиновой сыворотки.

Р е а к т и в ы . 1. Групповые (по системе

АВО) антирезусные сыворотки. 2. Стандартные

эритроциты всех групп системы АВО. 3. 10 %

раствор желатина (ампулированный).

Х о д  о п р е д е л е н и я . Кровь из локтевой

вены необходимо брать в две пробирки. В одну

пробирку с предварительно внесенным 1 мл 5 %

раствора цитрата натрия — 3 мл, в другую —

только 3 мл крови. Пробирки должны быть

тщательно промаркированы. В сопроводитель-

ном направлении указывают полностью фами-

лию, имя, отчество и группу крови пациента.

Кровь, смешанная с цитратом натрия, слу-

жит источником эритроцитов. По одной капле

(0,05 мл) исследуемых эритроцитов вносят в

3 химические пробирки. В первые две добавляют

0,1 мл антирезусной сыворотки различной серии

соответствующей группы крови. Далее во все

три пробирки доливают 0,1 мл (2 капли) 10 %

раствора желатина, предварительно прогретого

на водяной бане температуры 40—45 °С. Таким

образом, 3-я пробирка, в которой находятся

.только эритроциты и желатин, служит контро-

лем на спонтанную агглютинацию в присутствии

желатина. В целях одновременного определения

резус-антител используются стандартные эрит-

роциты 0(1) группы резусположительные, в ко-

торые добавляют сыворотку крови из пробирки

без раствора цитрата и то же (что и в трех

предыдущих пробирках) количество желатина.

В качестве контроля необходимо использовать

стандартные резусположительные и отрица-

тельные эритроциты всех 0(1),  А ( I I ) , В(III),

AB(IV) групп крови. Содержимое всех пробирок

осторожно перемешивают, встряхивают и поме-

щают в термостат при 46—48 °С на 30 мин.

После термостатирования во все пробирки вно-

сят по 8 мл 0,85 % раствора хлорида натрия

и перемешивают осторожным ротированием.

У ч е т  р е з у л ь т а т о в . Результат можно

считать достоверным только при совпадении его

в обеих пробирках разных серий антирезусной

сыворотки и правильно прошедших контролях.

Агглютинация эритроцитов в первых двух про-

бирках, видимая в проходящем свете или под

микроскопом (в сомнительных случаях), указы-

вает на наличие резус-антигена. Склеивание

эритроцитов в 4-й пробирке документирует не-

полные резус-антитела в сыворотке исследуе-

мого. Если происходит агглютинация в 3-й

пробирке, содержащей только эритроциты и же-

латин, результат реакции в первых двух пробир-

279

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

ках не может быть учтен вследствие возмож-

ности неспецифической агглютинации.

Резус-антитела. Определение в грудном мо-

локе (молозиве). Грудное молоко в количестве

10—15 мл, взятое в пробирку, центрифугируют

10 мин при 1000 об/мин. Со дна пробирки отса-

сывают небольшое количество и 2—3 капли

наслаивают на стандартные эритроциты 0(1)

группы. Затем добавляют 0,1 мл 10 % раствора

желатина и ставят в термостат при 46 °С на 30

мин. Дальнейший ход реакции и учет результа-

тов уже описан выше.

И с т о ч н и к  о ш и б о к . Раствор желати-

на: наличие помутнения, хлопьев, утрата способ-

ности «застывать» при температуре 4—8 °С мо-

жет приводить к ложноположительным резуль-

татам. Антирезусные сыворотки: снижение титра

антител при длительном или неправильном

хранении (определяется в контрольных иссле-

дованиях каждый раз при использовании новой

серии). Ошибки при использовании иногруп-

пных сывороток.

К л и н и ч е с к о е  з н а ч е н и е . Определе-

ние резус-фактора обязательно при переливании

крови и у беременных. В последнем случае

необходимо исследование резус-фактора у отца

будущего ребенка.

Прогноз гемолитической болезни зависит от

д и н а м и к и резус-антител, которые необходимо

исследовать в течение беременности.

6.2.3. Антитела к лейкоцитам

П р и н ц и п  м е т о д а . При наличии в

исследуемой сыворотке антител к лейкоцитам

последние образуют агглютинаты, видимые под

микроскопом.

Р е а к т и в ы . 1. Гепарин кристаллический

(предпочтительнее) или готовый (во флаконах)

раствор (Гедеон Рихтер). 2. Среда 199 (или фос-

фатный буфер рН 7,4). 3. 0,35 % и 5 % растворы

хлорида натрия.

Х о д  о п р е д е л е н и я .  В ы д е л е н и е

л е й к о ц и т о в . В пробирку с предварительно

внесенным раствором гепарина (25 ЕД на 1 мл

крови) из локтевой вены донора вносят 10 мл

крови, перемешивают и помещают в термо-

стат при 37 °С в наклонном (45°) положении на

1 ч. После отстаивания плазму с прилегающим

к эритроцитам слоем лейкоцитов осторожно

отсасывают пастеровской пипеткой и переносят

в центрифужную пробирку. После 5 мин

центрифугирования при 1000 об/мин надосадоч-

ную жидкость удаляют. К клеточному осадку

для лизирования примеси эритроцитов добавля-

ют 5 мл 0,35 % раствора NaCl и осторожно

ресуспендируют клетки пастеровской пипеткой,

не допуская образования пены, в течение 30—

45 с. Вслед за этим немедленно добавляют

0,6 мл 5 % раствора NaCl и тщательно пере-

мешивают (раствор становится изотоничным).

Полученную взвесь лейкоцитов трижды отмы-
вают средой 199 или фосфатным буфером.

Проводят пробу на жизнеспособность выде-

ленных клеток (см. в разделе «Методы исследо-

вания клеточного иммунитета»).

280

П о с т а н о в к а  р е а к ц и и  л е й к о -

а г г л ю т и н а ц и и . Готовят ряд (кратных

двум) разведений исследуемой сыворотки (5—8

пробирок), которую предварительно инактиви-

руют 30 мин при 56 °С. К 0,1 мл (2 капли)

сыворотки добавляют по капле взвеси лейко-

цитов. Пробирки интенсивно встряхивают и тер-

мостатируют в течение полутора часов при 37 °С.

После извлечения из термостата пробирки

центрифугируют 10 мин при 1000 об/мин. Над-

осадок удаляют, а к клеточному слою добавляют

2 капли 3 % уксусной кислоты для удаления

примеси эритроцитов и осторожно перемеши-

вают. Каплю клеточной взвеси помещают на

предметное стекло и рассматривают под малым

увеличением микроскопа.

У ч е т  р е а к ц и и  п р о в о д я т  п о двум

критериям: выраженности агглютинации (ин-

тенсивная, т. е. крупные агломераты, значи-

тельная площадь свободной жидкости,— 4 плю-

са; выраженная агглютинация, когда наряду с

агломератами лейкоцитов в жидкости можно

видеть небольшое количество свободных кле-

ток,— 3 плюса; степень агглютинации, при

которой среди взвешенных клеток выявляются

островки агглютинатов,— 2 плюса и слабая

мелкоглыбчатая агглютинация, когда в поле

зрения преобладают свободные клетки, но встре-

чаются небольшие комочки склеившихся кле-

ток,— 1 плюс) и величина разведения сыворот-

ки, в которой еще отмечается агглютинация.

В о з м о ж н ы е  и с т о ч н и к и  о ш и б о к .

Часто встречается неспецифическая агглютина-

ция, особенно при крупноглыбчатой интенсивной

реакции. В каждом случае необходимы контроли

выделенных лейкоцитов с нормальной совмести-

мой референтной сывороткой. Спонтанная

агглютинация наблюдается при высокой кон-

центрации в выделенном клеточном осадке

нежизнеспособных лейкоцитов.

Более информативен в клинической практике

учет крайних разведений сыворотки с агглюти-

нацией.

Л и т е р а т у р а . Лимфоциты: выделение,

фракционирование и характеристика/Под ред.

Дж. Б. Натвича, П. Перлманна, X. Вигзелля.—

М.: Медицина, 1980; Руководство по иммуно-

логии/Под ред. О. Е. Вязова и Ш. К. Ходжае-

ва. — М.: Медицина, 1973; Тодоров Йордан.

Клинические лабораторные исследования в

педиатрии.— София, 1963.

6.2.4.  Д Н К и антитела к ДНК

Реакция пассивной гемагглютинации.

П р и н ц и п . Формалинизированные эритроци-

ты барана с присоединенными к их поверхности

прочной ковалентной связью ДНК агглютини-

руют в сывороточной среде с наличием антител

к ДНК. В зависимости от конформации моле-

кулы антигена, используемого в реакции (натив-

ная, высокополимерная ДНК, денатурирован-

ная кипячением в стандартном солевом

растворе — ССР, прогретая в присутствии

формальдегида), различают 3 типа антител

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

к ДНК. Антитела I  т и п а — к формалинизи-

рованной однотяжевой ДНК, антитела II ти-

па — к термоденатурированной ДНК, в которой

около 60 % нуклеотидов организовано в спира-

лизованные участки, антитела  I I I типа — анти-

тела к нативной высокополимерной ДНК.

Определение типов антител к ДНК более

информативно в клинической практике, так как

может быть использовано в целях дифферен-

циальной диагностики.

Р е а к т и в ы . 1. Препарат нативной ДНК

(«Реахим». Олайнский завод химреактивов.

«Реанал», Венгрия). 2. Препараты ДНК с мо-

дифицированной первичной и вторичной

структурой. Денатурированную ДНК получают

кипячением 50—200 мкг/мл ДНК в стандартном

солевом растворе (0,15 М NaCl и 0,015 М ра-

створ трехзамещенного цитрата натрия) в тече-

ние 10 мин с последующим охлаждением

в ледяной бане. Однотяжевую формалинизи-

рованную ДНК получают прогреванием раство-

ра ДНК 400 мкг/мл 10 мин при 100 °С в присут-

ствии 1,3 % формальдегида. Формальдегид

взаимодействует с освобождающимися при де-

натурации аминогруппами азотистых оснований,

препятствуя восстановлению разделившихся

при нагревании цепей ДНК. 3. Формалинизиро-

ванные и танированные бараньи эритроциты.

4. Фосфатно-цитратный буфер рН 5,2.

Х о д  о п р е д е л е н и я . В лунки полисти-

роловых титровочных пластин разливают 0,9 мл

в первую лунку, а в остальные — по 0,4 мл

и добавляют 0,1 мл исследуемой сыворотки,

предварительно инактивированной при 56 °С 30

мин.

Ф о р м а л и н и з а ц и я  б а р а н ь и х

э р и т р о ц и т о в . Эритроциты барана отделя-

ют от фибринового сгустка и несколько раз

промывают изотоническим раствором натрия

хлорида (0,15 М NaCl). 12,5 % взвесь эритро-

цитов в изотоническом растворе рН 7,0 помеща-

ют в сосуд, в который опускают целлофановый

мешок, содержащий нейтрализованный форма-

лин,— 1/4 объема взвеси эритроцитов. Диализ

проводят при 4 °С в течение 2 сут и далее при

комнатной температуре в течение 2—5 сут про-

тив изотонического раствора. Взвесь эритроци-

тов периодически встряхивают. После оконча-

ния диализа эритроциты отмывают в 10-кратном

объеме изотонического раствора хлорида натрия

с повторным центрифугированием. Отмытые

эритроциты суспендируют в равном объеме

изотонического раствора. 50 % взвесь эритроци-

тов при 4 °С сохраняется в течение года.

О б р а б о т к а  э р и т р о ц и т о в  т а н и -

н о м . Обработку формалинизированных эритро-

цитов танином проводят перед их использова-

нием. 2,5 % взвесь формалинизированных

эритроцитов с равным объемом танина, раство-

ренного в ССР в соотношении 1:200000. Смесь

инкубируют в течение 15 мин при 37 °С, после

чего эритроциты отмывают от избытка танина

10-кратным количеством ССР.

С е н с и б и л и з а ц и я  э р и т р о ц и т о в .

Формалинизированные и танированные эрит-

роциты сенсибилизируют ДНК, денатурирован-

ной в присутствии формальдегида. 2,5 % взвесь

свежетанированных эритроцитов в фосфатно-

цитратном буфере рН 5,2 смешивают с равным

объемом ДНК в концентрации 10—20 мкг/мл

в том же буфере. Смесь выдерживают в течение

30 мин при комнатной температуре, а затем

собранные центрифугированием эритроциты от-

мывают троекратно ССР в разведенной в нем

нормальной кроличьей сывороткой, предвари-

тельно инактивированной в соотношении 1:250.

Приготовленные эритроциты хранят при 4 °С

с добавлением 0,4 % раствора формальдегида

в ССР с разведенной в нем кроличьей сыворот-

кой. Срок годности — до 4 мес.

В каждом случае перед сенсибилизацией

серии эритроцитов необходимо определять коли-

чество ДНК, адсорбированной на эритроцитах.

М е т о д и к а  п о с т а н о в к и  Р П Г А .

Для постановки используют полистироловые

пластины с лунками. В каждую лунку разливают

по 0,4 мл, а в первую лунку 0,9 мл ССР и 0,1 мл

исследуемой сыворотки. Пассажем из лунки

в лунку равных объемов готовят двукратные

разведения, после чего во все лунки добавляют

по 0,05 мл 2,5 % взвеси эритроцитов, сенсиби-

лизированных ДНК. Пластинки энергично

встряхивают и оставляют при комнатной тем-

пературе на 4 ч.

Если эритроциты агглютинируют, то они

равномерно устилают все дно лунки. В отсут-

ствие агглютинации эритроциты собираются на

самом дне лунки, образуя компактный диск

или небольшое кольцо.

В качестве контроля одновременно с той

же самой сывороткой при тех же разведениях

закапывают формалинизированные эритроциты,

не сенсибилизированные ДНК.

К л и н и ч е с к о е  з н а ч е н и е . Выявле-

ние антител к ДНК может служить характе-

ристикой процессов аутоиммунитета. В сочета-

нии с определением типа антител исследова-

тель может оценить активность репаративных

процессов, способность организма к адаптивным

реакциям (например, нарастание антител

к ДНК I типа после оперативных вмешательств).

Антитела к ДНК I типа широко встречаются как

в норме, так и при различных инфекционных

процессах (например туберкулезе), вирусных

заболеваниях (грипп). Антитела II типа, осо-

бенно в титрах 1:160 и выше, отражают актив-

ность ревматических болезней. Антитела  I I I типа

преобладают при системной красной волчанке

и служат дифференциально-диагностическим

критерием.

В ряде случаев антитела к ДНК III типа

можно выявить при выраженной активности

хронического активного гепатита или болезни

Шегрена.

Л и т е р а т у р а . Поверенный А. М. и др.—

Вопр. мед.  х и м и и , 1966. № 12, с. 117—119. Пове-

ренный А. М. и др.— Вести. АМН СССР, 1967,

№ 2, с. 62—64. Белокриницкий Д. В. и др.—

Вопр. ревмат., 1971, № 12. с. 62—65. Гольд-

фарб Д. М., Замчук Л. А. Антитела к нуклеино-

вым кислотам.— М.: Наука, 1975.

281

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

6.2.5. Ревматоидный фактор

Унифицированный метод определения реак-

ции гемагглютинации.  П р и н ц и п . Ревматоид-

ный фактор, находящийся в сыворотке крови

больных, обладает свойством агглютинировать

эритроциты барана, предварительно сенсибили-

зированные кроличьим иммуноглобулином.

Р е а к т и в ы . 1. Кроличья гемолитическая

сыворотка (амбоцептор). Используют сухую или

жидкую прогретую гемолитическую сыворотку

с разными титрами, как готовую, так и получен-

ную в лаборатории путем иммунизации кроли-

ков эритроцитами барана. 2. Фосфатно-солевой

буфер рН 7,4. А. Натрия фосфат однозамещен-

ный — 24,6 г и до 1 л дистиллированной воды.

Б. Натрия фосфат двузамещенный — 22,4 г

и до 1 л дистиллированной воды. В. Хлорид

натрия — 8,5 г и до 1 л дистиллированной воды.

Перед опытом смешивают раствор А с раствором

Б в отношении 1:9, рН раствора доводят до 7,4.

Затем одну часть смеси добавляют к 9 частям

раствора В. 3. Эритроциты барана: а) свежая

дефибринированная кровь барана, срок

использования до 7 дней, хранение при 2—8 °С;

б) эритроциты, консервированные в растворе

Олсвера; срок хранения до 2 мес при температу-

ре 2—8 °С. 4. Раствор Олсвера: глюкоза —

20,5 г, натрия цитрат — 8 г, лимонная кисло-

та — 0,552 г, хлорид натрия — 4,2 г, дистилли-

рованная вода — до 1 л; рН раствора 6,1.

Раствор стерилизуют дробно (кипятят на водя-

ной бане 3 дня по 20 мин). Срок хранения до

1 мес при температуре 2—8 °С.

Х о д  о п р е д е л е н и я . Постановке основ-

ного опыта предшествует подготовительная ра-

бота.

1. Приготовление 1 % и 25 % взвеси барань-

их эритроцитов: дефибринированную кровь ба-

рана или бараньи эритроциты в растворе Олс-

вера центрифугируют и удаляют надосадочную

жидкость. Осадок трижды отмывают 5—6 объе-

мами изотонического раствора хлорида натрия.

200 —

300

400

500

600

700

800

900

1000

0,5 мл

0,5 То

0,5 »

0,5 »

0,5 »

0,5 »

0,5 »

0,5 »

0,5 »

гемолитической сыворотки

же

»

»

»

»

»

»

»

Надосадочная жидкость при последнем промы-

вании должна быть бесцветной. Из плотного

осадка готовят 1 % и 25 % взвесь эритроци-

тов в фосфатно-солевом буфере рН 7,4.

2. Обработка исследуемой сыворотки: кровь,

взятую из локтевой вены больных в коли-

честве 2—3 мл, ставят на 1 ч в термостат. Затем

сыворотку отделяют от сгустка (центрифугиру-

ют 20 мин при 1000 об/мин, отсасывают над-

осадочный слой) и инактивируют в водяной

бане при 56 °С в течение 30 мин. Хилезные и ге-

молизированные сыворотки непригодны для ис-

следования.

3. Разведение сывороток: сыворотки больных

разводят фосфатно-солевым буфером рН 7,4

в соотношении 1:5 (0,2 мл сыворотки и 0,8 мл

буфера).

4. Адсорбция исследуемой сыворотки: прово-

дят с целью устранения гетероагглютининов.

1 мл 25 % взвеси эритроцитов барана центри-

фугируют 15 мин при 1000 об/мин. Надосадоч-

ную жидкость удаляют и к осадку добавляют

0,75 мл исследуемой сыворотки, предварительно

разведенной в фосфатно-солевом буфере в со-

отношении 1:5. Пробирки со смесью встряхи-

вают и оставляют при комнатной температуре

на 1 ч, а затем на 1 ч в холодильнике при

4 °С. После этого центрифугируют 15 мин при

1000 об/мин и осторожно сливают находящуюся

сверху надосадочную жидкость. Далее эту над-

осадочную жидкость, которая является сыво-

роткой в разведении 1:5, используют для при-

готовления разведений при постановке реакции

гемагглютинации в основном опыте.

5. Титрование кроличьей гипериммунной сы-

воротки (амбоцептор): проводят для определе-

ния ее агглютинирующей способности к барань-

им эритроцитам. Готовят серию разведений

амбоцептора в фосфатно-солевом буфере. Для

этого первоначально готовят разведение сы-

воротки 1:100 (0,1 мл сыворотки и 9,9 мл

фосфатно-солевого буфера) и из него готовят

дальнейшие разведения:

1:100 + 0,5 мл фосфатно-солевого буфера

1:100+1,0 То же

1:100+1,5 » »

1:100 + 2,0 » »

1:100 + 2,5 » »

1:100 + 3,0 » »

1:100 + 3,5 » »

1:100 + 4,0 » »

1:100 + 4,5 » »

Из каждой пробирки с данным разведенцем

переносят в каждую пробирку второго ряда по

0,5 мл сыворотки, затем добавляют равный

объем 1 % бараньих эритроцитов (0,5 мл).

Пробирки оставляют при комнатной температу-

ре на 15 мин, затем встряхивают и оставляют

на 2 ч при 4 °С, после чего учитывают результат.

Агглютинационным титром гемолитической сы-

воротки считается наивысшее ее разведение,

при котором происходит агглютинация на 1+.

Для постановки основного опыта используют

кроличью гемолитическую сыворотку в разведе-

нии 1:4 от концентрации конечного разведе-

ния сыворотки, давшего положительную реак-

цию агглютинации.

6. Приготовление сенсибилизированных эри-

троцитов: к разведенной кроличьей сыворот-

ке прибавляют равный объем 1 % эритроци-

тов барана. После тщательного встряхивания

смесь оставляют при комнатной температуре

на 15 мин; так как при добавлении кроличьей

иммунной сыворотки взвесь эритроцитов разво-

дится вдвое, то конечная ее концентрация 0,5 %

и ее используют для основной реакции.

282

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

 

 

 

 

 

 

 

содержание   ..  68  69  70  71   ..