Лабораторные методы исследования в клинике (Меньшиков В.В.) - часть 65

 

  Главная      Учебники - Медицина     Лабораторные методы исследования в клинике: справочник (Меньшиков В.В.) - 1987 год

 

поиск по сайту            правообладателям  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

содержание   ..  63  64  65  66   ..

 

 

Лабораторные методы исследования в клинике (Меньшиков В.В.) - часть 65

 

 

можно использовать серотонинкреатинсульфат,

2,312 мг которого эквивалентны 1 мг серотонина

основания.

Х о д  о п р е д е л е н и я . Кровь берут в про-

бирку, содержащую 1,34 % раствор оксалата

натрия в количестве, составляющем 1/10 от

предполагаемого количества крови. К 1 мл крови

приливают 1 мл воды и 1 мл н. хлорной кислоты,

перемешивают и через 30 мин центрифугируют.

К 2 мл надосадочной жидкости добавляют 0,2 мл

5 н. NaOH, 1 г порошка хлорида натрия и 4 мл

бутанол-хлороформенной смеси, встряхивают

3 мин, а затем центрифугируют для разделения

слоев. Водную фазу удаляют, а к органической

добавляют 2 мл 0,1 н. NaOH, насыщенного хло-

ридом натрия, встряхивают и центрифугируют,

3,5 мл органической фазы переносят в другие

пробирки, где экстрагируют 2,5 мл 0,1 н. НС1.

После разделения фаз из кислотной (верхней)

фазы отбирают порции по 1 мл, которые исполь-

зуют для определения гистамина и серотонина.

Д л я  о п р е д е л е н и я  г и с т а м и н а

к 1 мл кислотной фазы добавляют 0,2 мл 1 н.

NaOH и 0,1 мл раствора ортофталевого альде-

гида в метаноле. Через 4 мин приливают 0,1 мл

1,5 М фосфорной кислоты, доводят объем до

5 мл и измеряют флюоресценцию при длине

волны 470 нм при возбуждении светом с длиной

волны 360—365 нм.

Д л я  о п р е д е л е н и я  с е р о т о н и н а

к 1 мл кислотной фазы добавляют 1 мл фосфат-

ного буфера рН 8,0 (при этом в растворе должен

установиться рН 7,0) и 0,2 мл 0,1 М раствора

нингидрина. Смесь инкубируют 30 мин при

75 "С, затем еще 1 ч выдерживают при комнат-

ной температуре, доводят объем до 5 мл и изме-

ряют флюоресценцию в области 490 нм при

возбуждении светом с длиной волны 365 нм.

Для калибровки берут пробы, содержащие

по 0,05 и 0,1 мкг серотонина и гистамина соответ-

ственно, доводят водой до объема 1,5 мл и при-

ливают 0,5 мл 1 н. хлорной кислоты. В холостой

опыт берут 1,5 мл воды и 0,5 мл 1 н. хлорной кис-

лоты. Калибровочные и холостую пробы экстра-

гируют бутанол-хлороформенной смесью после

добавления 0,2 мл 5 н. NaOH и обрабатывают

так же, как и опытные пробы. Свечение холостой

пробы вычитают из результатов, полученных

для опытных и калибровочных проб.

Р а с ч е т проводят по калибровочному гра-

фику, по данным которого рассчитывают содер-

жание гистамина или серотонина в пробе. Чтобы

узнать содержание в 1 мл цельной крови, полу-

ченные результаты умножают на 3/2, так как

в опыт взято 2 мл хлорного экстракта крови из

общего объема 3 мл.

Определение гистамина в цельной крови,

унифицированный метод по реакции с ортофта-

левым альдегидом.  П р и н ц и п . Гистамин

содержится главным образом в лейкоцитах,

поэтому определение выполняется в цельной

крови, а не в сыворотке или плазме. Белки осаж-

дают хлорной кислотой, добавлением едкого

натра устанавливают щелочную реакцию, кото-

рая необходима для экстракции смесью бута-

нола и хлороформа. После промывания экст-

ракта гистамин реэкстрагируют кислотой и опре-

деляют в кислой фазе флюорометрическим мето-

дом после конденсации с ортофталевым альдеги-

дом.

Р е а к т и в ы . 1. Натрия оксалат, раствор

13,5 г/л. Растворяют 1,35 г натрия оксалата

в 100 мл воды. 2. Кислота хлорная, 1 моль/л,

имеет концентрацию 1 н. или 10 %. 3. Натр

едкий, растворы 1 н. и 5 н. Готовят, растворяя

соответственно 4 или 20 г NaOH в воде, объем

доводят до 100 мл. 4. Натрия хлорид в виде

сухого порошка. 5. НС1 0,1 н. 6. Натр едкий, 0,1 н

раствор, насыщенный поваренной солью. Добав-

ляют кристаллический NaCl в 0,1 н. NaOH в

таком количестве, чтобы на дне флакона все

время был осадок нерастворившейся соли.

7. Бутиловый спирт нормальный (н-бутанол).

8. Хлороформ, лучше использовать марки «для

наркоза». 9. Бутанол-хлороформенная смесь:

смешивают 150 мл н-бутанола и 100 мл хлоро-

форма. 10. Метиловый спирт (метанол), не

содержащий воды. 11. Ортофталевый альдегид,

раствор 1 г/л в абсолютном метаноле. Жела-

тельно использовать ампулированный препарат,

в случае необходимости ортофталевый альдегид

можно очистить перекристаллизацией из лиг-

роина. Для приготовления реактива используют

абсолютный (не содержащий воды) метиловый

спирт. 12. Ортофосфорная кислота, раствор

1,5 моль/л. 17,3 мл изготовляемой пром.ышлен-

ностью 85 % фосфорной кислоты (Н

3

РО

4

) плот-

ности 1,65 доводят водой до объема 100 мл.

13. Калибровочные растворы готовят на 0,4 н.

хлорной кислоте, растворяя 1,63 мг крис-

таллического гистаминхлорида или 1 мг гиста-

мина основания в 100 мл 0,4 н. НС1О4. И в том, и

в другом случае получается раствор, содержа-

щий 10 мг/л. Хранят в замороженном состоянии

в полиэтиленовом (стеклянный может лопнуть!)

флаконе. Из него готовят рабочий калибровоч-

ный раствор с концентрацией 1 мкг/мл в 0,4 н.

хлорной кислоте.

Х о д  о п р е д е л е н и я . Кровь берут в про-

бирку, содержащую раствор натрия оксалата

в количестве 1/10 от предполагаемого количе-

ства крови. К 4 мл оксалатной крови добавляют

равный объем 1 н. хлорной кислоты, перемеши-

вают и через 10 мин центрифугируют. К 4 мл

надосадочной жидкости добавляют 0,5 мл 5 н.

NaOH, 1,5 г сухого порошка поваренной соли и

хорошо перемешивают, затем приливают 10 мл

смеси бутанол — хлороформ, встряхивают 5 мин,

центрифугируют и водную фазу удаляют. К

органической фазе добавляют 5 мл 0,1 н. NaOH,

насыщенного хлоридом натрия, встряхивают,

центрифугируют и водную фазу удаляют. Точно

8 мл органической фазы переносят в пробирку,

содержащую 3 мл 0,1 н. НС1, и встряхивают

3 мин, при этом гистамин переходит в кислотную

фазу, которую и используют для дальнейшего

анализа.

К 2 мл кислотной фазы добавляют 0,4 мл

1 н. NaOH и 0,12 мл 0,1 % раствора ортофтале-

вого альдегида в метаноле, а через 4 мин еще

0,2 мл 1,5 М ортофосфорной кислоты. После

этого измеряют флюоресценцию при длине вол-

ны 460 нм при возбуждении светом с длиной

волны 360 нм. Из показателя опытной пробы

259

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

вычитают результаты измерения холостого опы-

та, в который вместо крови берут соответствую-

щее количество воды.

Р а с ч е т проводят по калибровочному гра-

фику, для построения которого пробы, содержа-

щие 0,1; 0,5 и 1 мкг гистамина в 4 мл 0,4 н. хлор-

ной кислоты, обрабатывают так же, как и кровь.

При окончательном расчете учитывают, что в

опыт взято 4 мл крови, поэтому в 1 мл содержа-

ние гистамина в 4 раза меньше.

5.7.8. 5-Оксииндолилуксусная кислота

Определение 5-оксииндолилуксусной кис-

лоты в моче. Унифицированный метод по реак-

ции с а-нитрозо-b-нафтолом.  П р и н ц и п . Диа-

зотированный а-нитрозо-b-нафтол реагирует с

5-оксииндолилуксусной кислотой (5-ОИУК) с

образованием окрашенных в сиреневый цвет

продуктов. Для повышения специфичности опре-

деления 5-ОИУК экстрагируют из подкисленной

мочи этилацетатом, определение ведут в высу-

шенном экстракте, повторную очистку экстрак-

цией этилацетатом проводят уже после проведе-

ния цветной реакции. В случае необходимости

может быть проведен еще третий этап очистки:

удаление мешающих веществ хлороформом.

Р е а к т и в ы . 1. HCI, 5 н. раствор. Для его

получения концентрированную НС1 осторожно

смешивают с равным объемом воды. 2. Кислота

серная 1 н. 3. Натрия хлорид, насыщенный

раствор. 4. а-Нитрозо-р-нафтол, раствор 1г/л в

абсолютном этаноле. 5. Натрия нитрит, водный

раствор 25 г/л. Растворяют 1 г NaNO2 в 40 мл

воды. 6. Нитрозокислотный реактив. Непосред-

ственно перед употреблением смешивают 0,2 мл

раствора натрия нитрита и 5 мл 1 н. серной

кислоты. 7. Этилацетат (уксусноэтиловый

эфир). 8. Абсолютный этиловый спирт. 9. Ка-

либровочный раствор ОИУК, содержащий

100 мкг вещества в 1 мл воды.

Х о д  о п р е д е л е н и я .  И з общего количе-

ства суточной мочи отбирают небольшую пор-

цию и подкисляют ее 5 н. НС1 до рН 1,0. 1,5 мл

подкисленной мочи смешивают с 1,5 мл насы-

щенного водного раствора хлорида натрия и

дважды экстрагируют этилацетатом порциями

по 4 мл. Оба экстракта смешивают и упаривают

на водяной бане при температуре не выше 47 °С

досуха. Сухой остаток растворяют в 0,15 мл

абсолютного этанола и из этого количества

0,1 мл переносят в чистую сухую пробирку, куда

добавляют также 2,9 мл воды, а затем 0,3 мл

спиртового раствора а-нитрозо-b-нафтола, а

затем 0,3 мл свежеприготовленного нитрозокис-

лотного реактива. Перемешивают и нагревают

на водяной бане при 47 °С в течение 7 мин. К

неостывшему раствору добавляют 3 мл этилаце-

тата и встряхивают. После разделения фаз ниж-

ний слой приобретает сиреневую окраску, его

отсасывают и фотометрируют при длине волны

526 нм в кювете с длиной оптического пути 1 см

против холостого опыта, в который берут вместо

мочи 1,5 мл воды.

Одновременно ставят калибровочный опыт, в

который берут пробы, содержащие 10—100 мкг

5-ОИУК; их подкисляют и обрабатывают так же,

как и опытные пробы. По результатам измерений

строят калибровочный график, который позво-

ляет непосредственно определить количество

микрограммов 5-ОИУК в 1 мл мочи.

П р и м е ч а н и е . При заболеваниях, сопро-

вождающихся нарушениями аминокислот-

ного обмена, необходима дополнительная

очистка, которая заключается в том, что

после упаривания этилацетатного экстракта

и растворения сухого остатка в этаноле отби-

рают 0,1 мл, к которым добавляют 3 мл воды

и 2 мл хлороформа, встряхивают и переносят

водную фазу в чистую пробирку, где прово-

дят цветную реакцию, как описано выше.

Н о р м а л ь н ы е  в е л и ч и н ы . Суточное

выведение 5-ОИУК у взрослых 10—

20 мкмоль/сут.

Л и т е р а т у р а . Лаб. дело, 1973, № 10,

с. 637—638.

Определение свободной и связанной 5-окси-

индолилуксусной кислоты в моче по реакции с

а-нитрозо-р-нафтолом.  П р и н ц и п . Парные

соединения 5-ОИУК с серной и глюкуроновой

кислотами гидролизуют нагреванием с хлорной

кислотой в присутствии унитиола, который пре-

дохраняет определяемые вещества от полного

разрушения. После нейтрализации свободную

оксииндолилуксусную кислоту экстрагируют

эфиром, экстракт выпаривают и проводят опре-

деление по цветной реакции диазотированным

а-нитрозо-р-нафтолом аналогично тому, как это

делается в унифицированном методе.

Р е а к т и в ы . 1. Хлорная кислота концент-

рированная, содержащая не менее 42 % НС1О4,

т. е. концентрация не менее 4,2 н. 2. Унитиол.

3. Кали едкое, 4 н. раствор: растворяют 22,4 г

КОН в 70—80 мл воды, добавляя гранулы щело-

чи мелкими порциями, объем доводят водой до

100 мл. 4. Натрия хлорид, сухой порошок. 5. Сер-

ная кислота 2 н. 6. Натрия нитрит (NaNO

2

),

раствор 25 г/л. 7. Нитрозокислотный реактив:

непосредственно перед употреблением смеши-

вают 0,2 мл раствора нитрита натрия и 5 мл 2 н.

серной кислоты. 8. а-Нитрозо-р-нафтол, раствор

1 г/л в абсолютном спирте. 9. Эфир (диэтиловый

эфир), лучше использовать марки «для нар-

коза». 10. Этилацетат (этилово-уксусный эфир).

11. Калибровочный раствор, содержащий 100 мг

5-оксииндолилуксусной кислоты в 1 л воды.

Х о д  о п р е д е л е н и я . Определение сум-

марной (свободной и связанной) оксииндоли-

луксусной кислоты. Из суточной мочи отбирают

порцию 5 мл, к которой добавляют 0,1 г уни-

тиола, 1 мл концентрированной хлорной кислоты

и нагревают 15 мин на кипящей водяной бане.

После охлаждения добавляют 4 н. КОН до тех

пор, пока рН не станет равным 2,0; выпавший

осадок отделяют фильтрованием. К фильтрату

добавляют 1 г хлорида натрия (примерно) и

экстрагируют 13 мл эфира в течение 30 мин на

аппарате для встряхивания. После разделения

фаз, для чего может потребоваться центрифуги-

рование, отбирают 8 мл эфирного экстракта

и переносят в чистую сухую пробирку, где выпа-

260

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

ривают досуха на водяной бане при 40 °С. Сухой

остаток растворяют в 2 мл воды, приливают 1 мл

раствора нитрозонафтола и 1 мл нитрозокислот-

ного реактива, перемешивают и ставят на 10 мин

на водяную баню при 37 °С. Для удаления

избытка нитрозонафтола приливают 10 мл эти-

лацетата и встряхивают. После разделения сло-

ев внизу оказываются хромогены синего цвета,

этот слой переносят в кювету с толщиной опти-

ческого слоя 1 см и фотометрируют при длине

волны 540 нм против холостой пробы. Холостую

пробу готовят так же, как и опытную, но вместо

эфирного экстракта мочи берут 8 мл эфира,

который выпаривают и сухой остаток обрабаты-

вают, как описано выше.

Определение свободной оксииндолилуксус-

ной кислоты. К 5 мл мочи из суточного количе-

ства добавляют 2 н. серную кислоту в таком

количестве, чтобы рН был 2,0, затем 1 г порошка

хлорида натрия и экстрагируют 13 мл эфира,

встряхивая пробу 30 мин на аппарате для встря-

хивания; 8 мл эфирного экстракта упаривают

досуха, так же как при определении общей

5-ОИУК. Дальнейшее определение проводят,

как описано выше в предыдущем разделе.

П о с т р о е н и е  к а л и б р о в о ч н о г о

г р а ф и к а и  р а с ч е т . Для построения

калибровочного графика 5 мл пробы, содержа-

щей 10—100 мкг 5-ОИУК в виде водного раст-

вора, обрабатывают так же, как опытные пробы,

включая гидролиз хлорной кислотой, ее удале-

ние в виде калиевой соли и экстракцию эфиром

и т. д. Линейность графика сохраняется до

70 мкг в пробе. Чтобы узнать содержание

5-ОИУК в 1 мл мочи, полученную по калибро-

вочному графику величину делят на 5 (так

как в пробу берется 5 мл мочи), чтобы узнать

суточное выведение, умножают на суточный

диурез.

Для определения свободной 5-ОИУК строят

отдельный калибровочный график, который

может несколько отличаться, так как не будет

потерь, связанных с кипячением с хлорной кис-

лотой. В остальном расчет аналогичен.

5.8.  Н Е О Р Г А Н И Ч Е С К И Е ВЕЩЕСТВА

В отличие от других разделов лабораторной

диагностики, где почти монопольно господствует

фотометрия, при определении неорганических

элементов и показателей КЩС широко исполь-

зуются и другие физико-химические методы.

В связи с тем что анализы выполняются на

приборах — пламенных фотометрах, потенцио-

метрах и т. д., заводские инструкции к которым

содержат подробные указания о том, как следует

работать, в настоящем разделе описывается

только химическая сторона методик, а принципы

устройства аппаратуры и советы о том, как ее

лучше использовать, вынесены в главу 1.6.

5.8.1. Натрий и калий

Несмотря на то что физиологические функ-

ции натрия и калия в организме различны, для

их определения используют одинаковые физиче-

ские принципы. Подавляющая часть калия в

организме находится внутри клеток, и его кон-

центрация в плазме, которая лишь очень при-

близительно отражает общее содержание эле-

мента в организме, может колебаться в значи-

тельных пределах, особенно у тяжелобольных.

Она тесно связана с состоянием кровообраще-

ния и кислотно-щелочного равновесия, поэтому

определение калия в плазме или сыворотке —

один из важнейших показателей в реанимацион-

ной клинике.

Натрий почти исключительно внеклеточный

элемент, его общее количество хорошо коррели-

рует с объемом межклеточной жидкости. У каж-

дого индивидуального человека концентрация

натрия в плазме поддерживается с большим

постоянством, физиологические колебания, как

правило, меньше, чем точность обычных лабора-

торных методов, но межиндивидуальные колеба-

ния гораздо выше. При получении сыворотки в

процессе формирования сгустка угольная кис-

лота теряется, при этом изменяются соотноше-

ния эритроцитарного и плазматического объе-

мов, что сказывается на концентрации натрия,

колебания которой в сыворотке больше, чем в

плазме. По этой причине для точного определе-

ния надо анализировать плазму, полученную

с гепарином, так как солевые антикоагулянты,

изменяя осмотическую концентрацию среды,

вызывают сморщивание эритроцитов и разведе-

ние плазмы. Некоторые препараты гепарина

содержат много натрия, тогда надо вводить на

него поправку. Результаты определения натрия

в плазме в целом имеют то же клиническое зна-

чение, что и результаты определения осмотиче-

ской концентрации.

Клинико-диагностическое значение опреде-

ления натрия и калия в эритроцитах невелико,

это скорее область научных исследований, а не

практической медицины.

Выведение натрия с мочой относительно

равномерно на протяжении суток, в то же время

экскреция калия имеет четкий пик в утренние

часы, соответственно возрастает и отношение

K/Na, которое коррелирует с активностью глю-

кокортикоидов. Минералокортикоид альдосте-

рон вызывает задержку натрия в организме,

увеличивая отношение K/Na мочи.

Унифицированный метод фотометрии пла-

мени. Определение в сыворотке и плазме крови.

П р и н ц и п . Разведенная водой плазма или

сыворотка крови распыляется и в виде мельчай-

ших капелек с током воздуха поступает в пламя

газовой горелки, которому калий придает слабое

красно-фиолетовое, а натрий ярко-желтое окра-

шивание. Интенсивность окраски измеряется

фотоэлементом. В связи с тем, что концентрация

калия в плазме невелика, при его определении

калибровочный раствор должен содержать

также соли натрия, а при некоторых конструк-

261

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

циях прибора и соли кальция. Натрия в плазме

много и он ярко окрашивает пламя, поэтому

калибровочный раствор может содержать толь-

ко соли натрия.

П р и г о т о в л е н и е  к а л и б р о в о ч -

н ы х  р а с т в о р о в . Есть два способа приго-

товления калибровочных растворов. В первом

случае сначала готовят серию основных калиб-

ровочных растворов, концентрации электроли-

тов в которых перекрывают возможный диапа-

зон колебаний состава плазмы, а затем эти

растворы разводят так же, как и исследуемая

плазма. Этот способ позволяет в максимальной

степени избежать погрешностей, связанных с

неточностями пипеток, используемых при разве-

дении, но необходим двойной набор посуды —

для основных и рабочих растворов. В другом

случае сразу готовят рабочие калибровочные

растворы, которые имитируют состав разведен-

ной для сжигания плазмы; такой раствор может

быть использован лишь в том случае, если плаз-

ма всегда разводится совершенно одинаково.

Ниже даются прописи и того, и другого способа,

считая, что первый более подходит для лабора-

торий, где электролиты определяются не очень

часто, второй — для лабораторий, где проводит-

ся много определений и методику можно счи-

тать хорошо налаженной.

При приготовлении калибровочных раство-

ров используют соли натрия, калия и кальция,

высушенные в сушильном шкафу при 100—

120 °С.

1. Натрия хлорид. Исходный калибровочный

раствор, содержащий 1000 ммоль/л. Готовят,

растворяя 11,69г NaCI (поваренной соли) вводе

и доводя объем до 200 мл.

2. Калия хлорид. Исходный калибровочный

раствор с концентрацией 100 ммоль/л. Готовят,

растворяя 0,746 г K.CI в воде и доводя объем до

100 мл.

3. Кальция карбонат. Исходный калибровоч-

ный раствор, содержащий 100 ммоль/л. Готовят,

растворяя 1,001 г СаСОз (кальция карбоната)

в 1 н. HCI и доводя объем до 100 мл той же кис-

лотой.

4. Основной калибровочный раствор для

определения калия готовят из исходных калиб-

ровочных растворов.

При построении калибровочного графика из

основного калибровочного раствора готовят

Исходный калибровочный

раствор, мл

KCI,

100

ммоль/л

6,0

5,5

5,0

4,5

4,0

3,5

3,0

NaCl,

1000

ммоль/л

14,0
14,0
14,0
14,0
14,0

14,0

14,0

СаСОз,

100

ммоль/л

2,5
2,5
2,5
2,5
2,5

2,5

2,5

Вода,

мл

До

 100

> 100

> 100

» 100

» 100

» 100

» 100

Концентрация,

ммоль/л

к

6,0

5,5

5,0

4,5

4,0

3,5

3,0

Na

140

140

140

140

140

140

140

Са

2,5
2,5
2,5

2,5

2,5

2,5

2,5

рабочие калибровочные растворы путем разве-

дения водой во столько же раз, во сколько разво-

дят и исследуемую плазму или сыворотку, жела-

тельно с использованием тех же пипеток, дозато-

ров и мерных колб.

5. Если чувствительность пламенного фото-

метра такова, что исследуемую плазму крови для

определения надо разводить в 20 раз, рабочие

калибровочные растворы для определения калия

могут быть приготовлены также более простым

способом. Для этого в мерную колбу вмести-

мостью 1 л вносят 7 мл исходного калибровоч-

ного раствора NaCl с концентрацией

1000 ммоль/л и 2,5 мл исходного раствора

СаСОз с концентрацией 100 ммоль/л и доводят

объем до 1 л водой. Получают фоновый раствор

с концентрацией натрия и кальция 7 и

0,25 ммоль/л. Готовят также калибровочный

раствор калия с содержанием 5 ммоль/л, для

чего исходный раствор с концентрацией

100 ммоль/л разводят водой в 20 раз в мерной

колбе вместимостью 100 мл. Смешивают оба

раствора, согласно приведенной ниже таблице.

Раст-

вор

КС1

5

ммоль/

6,0

5,0

4,0

3,0

Фоновый

раствор,

содержащий

7 ммоль/л

Na

 и

0,25 ммоль/л

Са, мл

До

 100

> 100

» 100

» 100

Если исследуемый материал,

разведенный 1:20, соответ-

ствует содержанию

в плазме, ммоль/л

К

6,0
5,0
4,0
3,0

Na

140,0

140,0

140,0

140,0

Са

2,5

2,5

2,5

2,5

6. Основной калибровочный раствор для

определения натрия готовят, помещая в мерную

колбу вместимостью 100 мл 12—18 мл исходного

раствора с концентрацией Na 1000 ммоль/л,

затем доводят водой до метки. Получается серия

основных калибровочных растворов, которые

содержат натрий в концентрациях от 120 до

180 ммоль/л. Для построения калибровочного

графика каждый из этих растворов разводят

в 100 раз, желательно с помощью тех же пипеток

или дозаторов и мерных колб, которые использу-

ются при разведении исследуемого материала.

7. Рабочий калибровочный раствор для опре-

деления натрия в плазме крови можно пригото-

вить также по следующей прописи: 2 мл исход-

ного калибровочного раствора с содержанием

натрия 1000 ммоль/л вносят в мерную колбу

вместимостью 200 мл и доводят до метки водой.

Из этого раствора, содержащего 10 ммоль/л,

берут по 12—18 мл и вносят в мерные колбы

вместимостью 100 мл и доводят водой, до метки.

Получается серия растворов, содержащих нат-

рий в концентрациях от 1,2 до 1,8 ммоль/л, т. е. в

таких, которые соответствуют содержанию нат-

рия в плазме крови от 120 до 180 ммоль/л, при

условии, что исследуемый материал разводился

перед определением в 100 раз.

262

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

 

 

 

 

 

 

 

содержание   ..  63  64  65  66   ..