Лабораторные методы исследования в клинике (Меньшиков В.В.) - часть 41

 

  Главная      Учебники - Медицина     Лабораторные методы исследования в клинике: справочник (Меньшиков В.В.) - 1987 год

 

поиск по сайту            правообладателям  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

содержание   ..  39  40  41  42   ..

 

 

Лабораторные методы исследования в клинике (Меньшиков В.В.) - часть 41

 

 

субстратная. Смесь равных количеств 5—10 об-

разцов бестромбоцитной плазмы здоровых лю-

дей (готовят заранее и хранят небольшими

порциями при —20 °С). 5. Плазменный компо-

нент здорового человека. Смешивают 3 г геля

гидроокиси алюминия фабричного производства

с 4 мл дистиллированной воды, а затем разводят

буфером (см. 4.3.5) в соотношении 1 : 4 (разве-

дение в 5 раз). После этого к 4,5 мл цитратной

нормальной бестромбоцитной плазмы добав-

ляют 0,5 мл приготовленной суспензии гидро-

окиси алюминия, ставят смесь в водяную баню

при 37 °С и помешивают стеклянной палочкой

в течение 3 мин. Далее смесь центрифугируют

при 3000 об/мин в течение 5—10 мин, отсасы-

вают адсорбированную плазму (протромбиновое

время такой плазмы должно быть не менее

2—2'/2 мин; если оно короче, то процедуру ад-

сорбции повторяют), разливают небольшими

порциями в пластиковые или стеклянные сили-

коновые пробирки, укупоривают и заморажи-

вают при —20 °С. В адсорбированной плазме

сохраняются факторы I, V,  V I I I , XI и  X I I , но

отсутствуют факторы II,  V I I , IX и X. Адсорби-

рованную плазму (алюминиевую) перед работой

размораживают и разводят 0,85 % раствором

хлорида натрия в соотношении 1 : 4 (разведение

в 5 раз). 6. Сывороточный компонент здорового

человека. Готовят заранее сыворотку крови здо-

рового человека (см. 4.1), расфасовывают ее по

1—2 мл и замораживают при — 20 °С. В ней

сохраняются факторы  V I I , IX, X, XI и XII, но

отсутствуют факторы II, V и  V I I I . Перед работой

нормальную сыворотку размораживают и раз-

водят 0,85 % раствором хлорида натрия в соот-

ношении 1 : 9 (разведение в 10 раз). 7. Тромбо-

цитарный компонент здорового человека. Оса-

док тромбоцитов, получаемый после центрифу-

гирования 5—6 мл тромбоцитной плазмы при

4 °С в течение 15—20 мин при 3000—4000

об/мин и отсасывания бестромбоцитной плазмы,

заливают 5—6 мл охлажденного (4 °С) 0,85 %

раствора хлорида натрия, взбалтывают и цент-

рифугируют на холоде при том же режиме. Над-

осадочную жидкость отбрасывают, еще дважды

повторяют процедуру отмывания тромбоцитов,

а затем к осадку тромбоцитов добавляют 0,85 %

раствор хлорида натрия в объеме, равном объ-

ему взятой тромбоцитной плазмы, и с помощью

стеклянной палочки готовят суспензию тромбо-

цитов.

О б о р у д о в а н и е . 1. Водяная баня на

37 °С. 2. Секундомеры.

М а т е р и а л  д л я  и с с л е д о в а н и я .

Плазменный, сывороточный и тромбоцитарный

компоненты обследуемого (готовят так же, как

соответствующие компоненты здорового чело-

века).

Х о д  о п р е д е л е н и я . Составляют сле-

дующие 5 рядов смесей: 1-й ряд (плазмен-

ный) — адсорбированная плазма больного +

+ сыворотка здорового + суспензия тромбо-

цитов здорового; 2-й ряд (сывороточный) —

адсорбированная плазма здорового + сыво-

ротка больного + суспензия тромбоцитов здо-

рового; 3-й ряд (плазменно-сывороточный) —

адсорбированная плазма больного + сыворот-

ка больного + суспензия тромбоцитов здоро-

вого; 4-й ряд (тромбоцитарный) — адсорбиро-

ванная плазма здорового + сыворотка здоро-

вого + суспензия тромбоцитов больного; 5-й

ряд (контрольный) — адсорбированная плазма

здорового + сыворотка здорового + суспензия

тромбоцитов здорового.

Т е с т и р о в а н и е всех рядов проводят

одинаково, начиная с контрольного ряда. В 5—

6 пробирок разливают по 0,1 мл раствора хло-

рида кальция и устанавливают пробирки в во-

дяную баню. Ставят туда же пробирку с 0,6—

0,8 мл субстратной плазмы (пул-плазмы). В но-

вую пробирку набирают 0,2 мл адсорбированной

нормальной плазмы, 0,2 мл нормальной сыво-

ротки и 0,2 мл нормальной суспензии тромбо-

цитов. Компоненты перемешивают, ставят про-

бирку в водяную баню, добавляют 0,2 мл раст-

вора хлорида кальция и немедленно включают

секундомер. Через 2 мин 0,1 мл смеси переносят

в одну из пробирок, содержащую 0,1 мл раст-

вора хлорида кальция, и вводят туда же 0,1 мл

прогретой субстратной плазмы. В момент добав-

ления субстратной плазмы включают второй

секундомер и отмечают время образования

сгустка. Исследование повторяют через 4; 6;

8; 10 и 12 мин инкубации смеси (результат обыч-

но регистрируется на 4-й и 6-й минуте). Подоб-

ным образом исследуют и все остальные ряды.

Н о р м а л ь н ы е  в е л и ч и н ы . Наиболее

короткое время варьирует в пределах 7—11 с

и регистрируется на 4-й или 6-й минуте инку-

бации.

К л и н и ч е с к о е  з н а ч е н и е . Возмож-

ные результаты теста в зависимости от недоста-

точности охватываемых им факторов (включая

формы, обусловленные появлением ингибиторов

факторов) представлены в табл. 37.

Т а б л и ц а 37. Результаты теста генерации

тромбопластина при различных нарушениях

свертывания крови

сле-

дуе-

мые

ряды

1-й

2-й

3-й

4-й

Показания теста при различных наруше-

ниях свертывания крови

дефицит факторов

V I I I

Нару-

шение

Нор-

ма

Нару-

шение

Нор-

ма

IX

Нор-

ма

Нару-

шение

»

Нор-

ма

XI + XII

Нор-

ма

»

Наруше-

ние

Норма

фактор

3 тром-

боци-

тов

Нор-

ма

»

»

Нару-

шение

ингибито-

ры факто-

ров свер-

тывания

Наруше-

ние

»

»

Норма

П р и м е ч а н и е . Тест генерации тромбо-

пластина чувствительнее к нарушениям

тромбопластинообразования, чем АЧТВ (см.

4.4.3) и основанные на его определении кор-

рекционные пробы, но и он выявляет лишь

163

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

значительный дефицит факторов  V I I I , IX,

XI +  X I I и фактора 3 тромбоцитов.  П р и

легких формах недостаточности факторов

свертывания крови решающее значение мо-

жет иметь их количественное определение

с применением специфических «дефицитных»

плазм. Принимая во внимание частоту раз-

личных форм гемофилии, количественное оп-

ределение факторов свертывания крови сле-

дует проводить,  н а ч и н а я с фактора  V I I I ,

а затем факторов IX, XI и  X I I . Вопрос о

количественном определении фактора X ре-

ш а е г с я в зависимости от результатов опреде-

ления протромбинового и лебетокс-времени

(стипвен-времени) (см. 4.4.4 и 4.4.5).

Л и т е р а т у р а . Балуда В. П., Барка-

гаи 3. С., Гольдберг Е. Д. и др. Лабораторные

методы исследования системы гемостаза.—

Томск, 1980, с. 146—152.

С п е ц и ф и ч е с к и е  м е т о д ы  и с с л е -

д о в а н и я  к о а г у л я ц и о н н о г о  г е м о -

с т а з а . К числу специфических относят мето-

ды, характеризующие концентрацию и/или ак-

тивность отдельных факторов свертывания кро-

ви, их ингибиторов и дериватов фибриногена.

В клинической практике эти методы применяются

реже (исключение составляют методы опреде-

ления фибриногена, некоторых его производ-

н ы х и фибринстабилизирующего фактора), по-

скольку для этого необходимы моноспецифиче-

ские антисыворотки (для определения концен-

трации специфического антигена) или плазмы

с изолированной недостаточностью известных

факторов (для определения специфической коа-

гуляционной активности).

В последние годы для определения актив-

ности отдельных факторов свертывания кропи,

антикоагулянтов и компонентов фибринолити-

ческой системы начинают применять также

амидолитические методы, основанные на исполь-

зовании относительно специфических пептидных
субстратов. Эти субстраты представляют собой

синтетические три- или тетрапептиды, имити-

рующие структуры естественных субстратов не-

которых факторов свертывания крови и плаз-

мина, к которым посредством амидной связи

присоединяется индикаторное вещество, хромо-

ген или флюороген. Под действием соответст-

вующих факторов индикаторное соединение от-

щепляется от пептида и изменяет окраску  и л и

флюоресценцию исследуемого образца пропор-

ционально активности определяемого фактора.

Ряд иностранных фирм выпускает субстраты и

целые наборы реактивов для амидолитического

определения плазменных факторов свертывания

II,  V I I I , X и XII, тромбоцитарных факторов
3 и 4, гепарина,  а н т и т р о м б и н а  I I I и отдельных

компонентов фибринолитической системы (акти-

ватора плазминогена, плазминогена, плазмина,

антиплазминов).

Л и т е р а т у р а . Бокарев И. //., Кузне-

цов В. А., Буторов В. Н., Семушин Б. В.

Применение хромогенных пептидных субстратов

в .лабораторной диагностике.— Лаб. дело, 1981,

№ 8. с. 481 --485.

4.4.11. Одностадийное

определение факторов  V I I I , IX, XI и  X I I

Методы основаны на определении АЧТВ

(см. 4.4.3) разведенной исследуемой плазмы при

компенсации возможного дефицита всех фак-

торов, влияющих на этот показатель, кроме

определяемого. В качестве примера описывается

определение активности фактора  V I I I (антиге-

мофильного глобулина, антигемофильного фак-

тора А), поскольку дефицит этого фактора (ге-

мофилия А) является наиболее частой формой

наследственной коагулопатии.

Унифицированный метод определения актив-

ности фактора  V I I I (1974).  П р и н ц и п . Оп-

ределяется АЧТВ (см. 4.4.3) исследуемой раз-

веденной плазмы при компенсации субстратной

плазмой возможного дефицита всех факторов,

кроме фактора  V I I I .

Р е а к т и в ы . 1. 3,8 % раствор цитрата нат-

р и я (см.  4 . 1 ) . 2. 0,9% (0,85%) раствор хло-

рида натрия. 3. Барбиталово-солевой буфер

рН 7,5: хлорид натрия — 7,3 г, диэтилбарбиту-

ровая кислота — 2,76 г, диэтилбарбитуровокис-

лый натрий — 2,06 г, бидистиллированная во-

да — до 1 л. 4. 2 % раствор двузамещенного

цитрата натрия. Растворяют 2 г двузамещенного

цитрата натрия в 100 мл дистиллированной воды.

5. Взвесь каолина в эмульсии эритрофосфатида

(см. 4.4.3). 6. 0,033 моль/л (0,366%) раствор хло-

рида кальция. Растворяют 366 мг высушенного

до постоянной массы хлорида кальция в 100 мл

дистиллированной воды или разводят 5 % раст-

вор хлорида кальция (см. 4.4.2) в 13,66 раза

дистиллированной водой. 7. Цитратная нормаль-

ная бестромбоцитарная пул-плазма (см. 4.4.10).

Отличие заключается  л и ш ь в том, что нитратную

кровь здоровых людей центрифугируют в рефри-

жераторной центрифуге (4°С). 8. Субстратная

плазма. Получают из крови больного тяжелой

формой гемофилии А; содержание фактора  V I I I

колеблется в пределах 1—3 %. Критерием при-

годности плазмы является время ее свертывания

в описываемых ниже условиях опыта. Оно долж-

но быть в пределах 120—135 с. Кровь стабили-

зируют 2 % раствором двузамещенного цитрата

натрия в соотношении 4 : 1, центрифугируют при

4 °С в течение 20 мин при 2500 об/мин, отсасы-

вают надосадочную жидкость и подвергают ее

повторному центрифугированию при тех же ус-

ловиях. Бестромбоцитарную плазму отсасы-

вают, разливают по 3—4 мл в пенициллиновые

флаконы, укупоривают их и хранят при —30 °С.

Субстратная плазма пригодна для определения

фактора  V I I I при хранении 2—3 мес.

О б о р у д о в а н и е .  1 . Рефрижераторная

центрифуга. 2. Водяная баня на 37 °С. 3. Се-

кундомеры.

М а т е р и а л  д л я  и с с л е д о в а н и я .

Бестромбоцитарная плазма, которую получают

путем центрифугирования цитратной крови

(см.  4 . 1 ) в рефрижераторной центрифуге  п р и

4 °С. Во время работы взвесь каолина в эмуль-

сии эритрофосфатида, пул-плазму, исследуемую

и субстратную плазмы сохраняют в ледяной

бане, а раствор хлорида кальция — в бане при

37 °С.

164

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Х о д  о п р е д е л е н и я . В пробирку вносят

0,1 мл взвеси каолина в эмульсии эритрофосфа-

тида, 0,1 мл субстратной плазмы и 0,1 мл раз-

веденной стандартной или исследуемой плазмы

и ставят в водяную баню. Через 6  м и н в пробирку

добавляют 0,1 мл раствора хлорида кальция,

перемешивают содержимое и определяют время

образования сгустка. Опыт повторяют еще

дважды и вычисляют средний результат.

Расчет концентрации (активности) фактора

ведетсятю таблице или графику, которые состав-

ляются на основании данных, получаемых при

исследовании  р а з л и ч н ы х разведений нормаль-

ной плазмы с известным содержанием  ( а к т и в -

ностью) фактора  V I I I .

Начинают с исследования нормальной плаз-

мы. Для этого ее разводят барбиталовым буфе

ром в соотношениях  1 : 4 ,  1 : 9 ,  1 : 1 9 , 1 : 39,

1 : 79, 1 : 159 и 1 : 319 (т. е. последовательно в 5;

10; 20; 40; 80; 160 и 320 раз) и, как описано вы-

ше, определяют время свертывания  п л а з м ы , раз-

веденной в 10 раз. Если оно отличается от 65 с,

то путем уменьшения или увеличения концентра-

ции эмульсии эритрофосфатида добиваются то-

го, чтобы оно стало равно 65 с. После этого опре-

деляют время свертывания во всех остальных раз-

ведениях плазмы и на основании полученных

данных строят в билогарифмическом масштабе

кривую разведения, откладывая на вертикаль-

ной оси время свертывания исследуемых образ-

цов, а на горизонтальной оси — процент актив-

ногти фактора  V I I I (за 100 %  п р и н и м а ю т актив-

ность фактора  V I I I в стандартной плазме, раз-

веденной в 10 раз).

Затем определяют время свертывания иссле-

дуемой плазмы, разведенной в 10 раз барбита-

ловым буфером, и находят по кривой разведения

соответствующую ему активность фактора  V I I I .

Содержание фактора  V I I I можно рассчитать

не только в процентах, но и в единицах актив-

ности. Для этого применяют формулу:

V I I I в процентах; V— объем исследуемой

плазмы.

За единицу активности фактора  V I I I при-

нимают количество фактора  V I I I в плазме, со-

держащей 100% активности фактора  V I I I .

К л и н и ч е с к о е  з н а ч е н и е . Уменьше-

ние активности фактора  V I I I наблюдается при

его врожденном дефиците или дефекте (гемо-

филия  А ) , диссеминированном внутрисосуди-

стом свертывании крови (вследствие «потреб-

ления») и остром фибринолизе (вследствие рас-

щепления). Повышение активности фактора

V I I I описано при предтромботических состоя-

ниях и эндотелиопатиях.

П р и м е ч а н и е . Подобным образом с при-

менением соответствующих «дефицитных»

плазм может быть определена активность

фактора свертывания IX (антнгемофильного

глобулина В, фактора Кристмаса), XI (плаз-

менного предшественника тромбопластина)

и фактора  X I I (фактора Хагемана, контакт-

ного фактора).
Наряду с коагуляционными (коагулологиче-

скими) методами в литературе описаны иммуно-

логические и амидолитические (см. введение

перед 4.4.11) методы определения факторов

свертывания, участвующих во внутреннем пути

образования протромбиназы.

4.4.12. Одностадийное определение

фактора X (фактора Стюарта—Прауэра)

Метод Денсона.  П р и н ц и п . Определяется

лебетокс-эритрофосфатидное (лебетокс-кефали-

новое, стипвен-кефалиновое) время свертыва-

ния исследуемой  п л а з м ы при компенсации воз-

можного дефицита всех факторов, участвующих

в реакции, кроме фактора X.

Р е а к т и в ы  т е же, которые применяют

для определения лебетокс-эритрофосфатидного

времени (см. 4.4.5), и дополнительно субстрат-

н а я плазма — цитратная бестромбоцитарная

плазма больного с тяжелой недостаточностью

фактора свертывания X. Субстратная плазма

может быть приготовлена и искусственно. Для

этого венозную бычью кровь смешивают с реак-

тивом Винтроба (получают растворением 1,2 г

оксалата аммония и 0,8 г оксалата калия в

100 мл дистиллированной воды) или 1,34 %

раствором оксалата натрия в соотношении  9 : 1 .

Стабилизированную кровь центрифугируют 7 мин

при 1500  о б / м и н и 4 °С, собирают тромбоцитар-

ную плазму и центрифугируют ее 30 мин при
4500 об/мин и 4 "С. Полученную бедную тромбо-

цитами плазму с помощью воронки фильтруют

через два асбестовых фильтра: верхний, содер-

жащий 20 % асбеста, и  н и ж н и й , содержащий

30 % асбеста (диаметр фильтров должен быть

около 14  с м ) . Фильтрацию ведут при комнат-

ной температуре со скоростью 1 капля в 1 с.

Одномоментно фильтруют 1 —1,5 л бычьей

плазмы. Первые 200 мл профильтрованной плаз-

мы выбрасывают, остальной фильтрат собирают

п о р ц и я м и по 50 мл. В каждой порции опреде-

ляют протромбиновое и лебетокс-эритрофосфа-

тидное время. Те порции, в которых протромби-

новое время равно 120 с и более, а лебетокс-

эритрофосфатидное — 80 с и более, пригодны

для употребления. В этой плазме отсутствуют

факторы  V I I и X. Отобранную профильтрован-

ную плазму расфасовывают по 3 мл, укупори-

вают и хранят  п р и —20—30 °С.

О б о р у д о в а н и е .  I . Водяная баня  н а

37 "С. 2. Секундомеры.

М а т е р и а л  д л я  и с с л е д о в а н и я .

Бестромбоцитарная плазма обследуемого и нор-

м а л ь н а я пул-плазма (см. 4.4.10).

Х о д  о п р е д е л е н и я . Исследование про-

водят так же, как при определении лебетокс-

эритрофосфатидного времени (см. 4.4.5). Отличие

заключается только в том, что нормальную пул-

п л а з м у и исследуемую плазму перед работой

разводят буфером, а перед добавлением эритро-

фосфатида смешивают с субстратной плазмой

165

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

в соотношении ! : 1 (0,1 мл плазмы обследуе-

мого или пул-плазмы +0,1 мл субстратной

плазмы). Испытуемую плазму перед исследо-

ванием разводят буфером Михаэлиса в соотно-

шении 1 : 9, а нормальную пул-плазму — в со-

отношениях от 1 : 9 до 1 : 999 (в 10; 20; 40; 80;

100; 200 и 1000 раз). По данным исследования

различных разведений нормальной пул-плазмы

строят в билогарифмическом масштабе кривую

зависимости лебетокс-эритрофосфатидного вре-

мени свертывания нормальной пул-плазмы от

активности фактора X (за 100 % принимают

активность пул-плазмы, разведенной буфером в

10 раз). По этой кривой находят активность

фактора X в исследуемой плазме, соответствую-

щую ее лебетокс-эритрофосфатидному времени.

К л и н и ч е с к о е  з н а ч е н и е . Уменьше-

ние активности фактора X наблюдается при его

врожденной недостаточности (болезнь Стюар-

та— Прауэра), тяжелых поражениях паренхимы

печени, механической желтухе, нарушениях вса-

сывания в кишечнике, лечении антивитамина-

ми К, внутрисосудистом свертывании и фибри-

нолизе.

П р и м е ч а н и е . Для определения содер-

жания (активности) фактора X разработаны

также иммунологические и простые амидоли-

тические методы (см. введение перед 4.4.11).
Л и т е р а т у р а . Баркаган 3. С. Исследо-

вание системы гемостаза в клинике (методи-

ческие указания) — Барнаул, 1975, с. 134—136;

Caen I. Larrieu M. J., Samama M. L'hemostase.

Methodes d'exploration et diagnostic pratique.—

Paris, 1968, p. 127-129.

4.4.13. Одностадийное определение

фактора II

Метод Сулье—Ларье.  П р и н ц и п . Опре-

деляется протромбиновое время свертывания

разведенной исследуемой плазмы при компенса-

ции возможного дефицита всех факторов про-

тромбинового комплекса, кроме фактора II.

Р е а к т и в ы . 1. 3,8 % раствор цитрата нат-

рия (см.  4 . 1 ) . 2. 0,025 моль/л раствор хлорида

кальция (см. 4.4.2). 3. Тромбопластин-кальцие-

вая смесь (см. 4.4.4). 4. Адсорбированная бычья

плазма. Венозную бычью кровь смешивают с

реактивом Винтроба (см. 4.4.12) в соотношении

9 : 1 и центрифугируют при 4500—6000 об/мин

в течение 30 мин. Супернатант собирают и под-

вергают повторному центрифугированию при

6000 об/мин в течение 30 мин. Полученную бед-

ную тромбоцитами плазму переносят в другую

пробирку и добавляют к ней чистый сульфат

бария из расчета 10 г на 100 мл плазмы. Смесь

постоянно взбалтывают при комнатной тем-

пературе в течение 20 мин, а затем центри-

фугируют при 6000 об/мин в течение 20 мин.

Собирают надосадочный слой плазмы и опреде-

ляют в нем протромбиновое время. Если оно

составляет менее 3 мин, процедуру адсорбции

повторяют, добиваясь того, чтобы протромбино-

вое время адсорбированной плазмы превышало

3 мин. Готовую плазму, в которой сохраняется

166

фактор V, но отсутствуют факторы II, VII и X,

разливают небольшими (1—3 мл) порциями

в пенициллиновые флаконы, укупоривают их

и хранят при —20 °С. 5. Нормальная челове-

ческая сыворотка. В пробирки, предварительно

промытые смесью 4 объемов изотонического

раствора хлорида и 1 объема буфера Михаэлиса

(рН 7,35), набирают по 3 мл венозной крови

здорового человека. Добавляют в каждую про-

бирку по 1 капле суспензии тканевого тромбо-

пластина (см. 4.4.4), разведенной в 10 раз буфе-

ром Михаэлиса. После свертывания крови про-

бирки ставят на 4—6 ч при 37 °С, а затем остав-

ляют при комнатной температуре на 18—24 ч.

Далее кровь центрифугируют при 3500 об/мин

в течение 20 мин, отсасывают сыворотку и сме-

шивают ее с раствором Винтроба в соотношении

5 : 1 . Смесь инкубируют 48 ч при 4 °С, а затем

разливают небольшими порциями в пеницилли-

новые флаконы, укупоривают их и хранят при

— 20°С. В приготовленной таким образом сы-

воротке сохраняются факторы  V I I и X, но от-

сутствуют факторы II и V. 6. Буфер Михаэлиса

рН 7,35 (см. 4.3.5).

О б о р у д о в а н и е . 1. Водяная баня на

37 °С. 2. Секундомеры.

М а т е р и а л  д л я  и с с л е д о в а н и я .

Тромбоцитарная плазма.

Х о д  о п р е д е л е н и я . Исследуемую

плазму разводят буфером Михаэлиса в соотно-

шении 1 : 9; 0,1 мл разведенной плазмы перено-

сят в другую пробирку, добавляют в нее 0,1 мл

субстратного реактива, состоящего из смеси ад-

сорбированной бычьей плазмы и нормальной

сыворотки в соотношении  2 : 1 , и ставят про-

бирку в водяную баню. Через 1 мин в эту про-

бирку вносят 0,2 мл тромбопластин-кальциевой

смеси и отмечают время образования сгустка.

Исследование повторяют и вычисляют средний

результат. Точно так же определяют время свер-

тывания нормальной пул-плазмы, разведенной

буфером Михаэлиса в 10; 20; 40; 80; 100; 200

и 1000 раз. Строят кривую разведения на било-

гарифмической бумаге, откладывая на верти-

кальной оси время свертывания пробы, а на

горизонтальной — содержание фактора II в раз-

веденной нормальной пул-плазме (содержание

фактора II в пул-плазме, разведенной в 10 раз,

принимают за 100 %). Зная время образования

сгустка в исследуемой разведенной плазме,уста-

навливают по кривой содержание (активность)

в ней фактора II (в процентах).

К л и н и ч е с к о е  з н а ч е н и е . Уменьше-

ние активности фактора II отмечается при его

врожденной недостаточности и тех же патологи-

ческих состояниях, при которых наблюдается

приобретенный дефицит фактора X (см. 4.4.12).

П р и м е ч а н и е . Активность фактора  I I

может быть оценена также хромогенными ме-

тодами (см. введение перед 4.4.11).
Л и т е р а т у р а . Баркаган Э. С. Исследо-

вание системы гемостаза в клинике (методи-

ческие указания).— Барнаул, 1975, с. 125—127;
Саеп 1., Larrieu M. J., Samama M. L hemostase.

Methodes d'exploration et diagnostic pratique.—

Paris, 1968, p. 127—129.

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

 

 

 

 

 

 

 

содержание   ..  39  40  41  42   ..