Лабораторные методы исследования в клинике (Меньшиков В.В.) - часть 21

 

  Главная      Учебники - Медицина     Лабораторные методы исследования в клинике: справочник (Меньшиков В.В.) - 1987 год

 

поиск по сайту            правообладателям  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

содержание   ..  19  20  21  22   ..

 

 

Лабораторные методы исследования в клинике (Меньшиков В.В.) - часть 21

 

 

С п е ц и а л ь н о е  о б о р у д о в а н и е :

микроскоп.

Х о д  и с с л е д о в а н и я . Кусочек кала

наносят на предметное стекло, покрывают пластин-

кой Като и придавливают так, чтобы кал разма-

зывался по стеклу в пределах пластинки. Мазок

оставляют при комнатной температуре для

осветления, затем микроскопируют его. Время

просветления должно быть не более 1 ч. В жар-

кое время года мазок мнкроскопируют через

30 мин. Чтобы избежать резкого высыхания

препарата, на пластинку в некоторых случаях

кладут влажную губку.

О ц е н к а  р е з у л ь т а т о в . Подсчиты-

вают обнаруженные яйца гельминтов во всем

мазке с учетом их видовой принадлежности.

Метод выявляет заражение аскаридами, власо-

главами, трематодами, тениидами и другими

видами, иногда анкилостомами и карликовым

цепнем.

Обнаружение яиц гельминтов методом обога-

щения.  П р и н ц и п . Используемый для подго-

товки суспензии каловых масс флотационный

раствор имеет большую относительную плот-

ность, чем яйца гельминтов. Яйца всплывают на

поверхность, из образующейся пленки делают

препараты и микроскопируют.

Р е а к т и в ы . 1. Флотационный раствор по

Калантарян: водный раствор нитрата натрия

(на 1 л воды 1 кг вещества) кипятят до

образования пленки и, не фильтруя, помещают

в сухие бутылки. Относительная плотность

раствора 1,38. 2. Возможно использование

флотационного раствора по Брудастову и Крас-

ноносу: 900 г нитрата натрия и 400 г нитра-

та калия при подогревании растворяют в 1 л

воды. Относительная плотность раствора

1.47—1,48.

С п е ц и а л ь н о е  о б о р у д о в а н и е .

I. Микроскоп. 2. Химические стаканы вмести-

мостью 200 мл.

Х о д  и с с л е д о в а н и я . В 100—200 мл

одного из флотационных растворов размеши-

вают 5—10 г кала. Удаляют стеклянной пало-

чкой с поверхности всплывшие крупные частицы.

К поверхности солевого раствора прикладывают

предметное стекло. Предметное стекло должно

полностью соприкасаться с поверхностью раст-

вора. Раствор отстаивают 20—30 мин, затем

предметное стекло снимают и просматривают

под микроскопом без покровного стекла всю

пленку, прилипшую к поверхности предметного

стекла. Чтобы избежать высыхания препарата,

пленку можно смешать с 2 каплями 50 % раст-

вора глицерина.

О ц е н к а  р е з у л ь т а т о в . Отмечают

все яйца гельминтов, найденные в препарате.

Можно обнаружить яйца аскарид, власоглавов,

анкилостомид, тениид, трематод.

Обнаружение яиц гельминтов методом Кра-

сильиикова (применение детергентов).  П р и н -

ц и п . Поверхностно-активные вещества, кото-

рые находятся в составе детергентов, осво-

бождают яйца гельминтов от каловых масс

и концентрируют яйца в осадке.

Р е а к т и в . 1 % раствор стирального поро-

шка «Лотос" (порошок высушивают в сушиль-

ном шкафу при 100 °С в течение 1—2 ч; 10 г

порошка растворяют в 1 л воды).

С п е ц и а л ь н о е  о б о р у д о в а н и е .

1. Сушильный шкаф. 2. Микроскоп. 3. Склянки

с крышками вместимостью 30—50 мл. 4. Целло-

фановая пластинка по Като. 5. Пастеровские

пипетки.

Х о д  и с с л е д о в а н и я . Метод 1: в склян-

ку к 20—30 мл раствора детергента добавляют

порцию кала, так чтобы соотношение раствора

и кала было примерно 1 : 20. Кал держат в

растворе не менее суток. В образовавшийся на

дне склянки осадок, состоящий из трех слоев,

где средний слой составляют яйца гельминтов,

вводят пастеровскую пипетку и набирают 1—3

капли жидкости из среднего слоя, переносят

на предметное стекло. Каплю покрывают пла-

стинкой Като и препарат микроскопируют. На

одном стекле должно быть не менее 2 препара-

тов.

Метод 2: кал суспендируют в растворе детер-

гента (соотношение по массе 1 ; 10). Через

30. мин содержимое пробирки перемешивают в

течение 1—2 мин и центрифугируют при 1000—

1500 об/мин. На одном стекле готовят два

препарата из осадка.

О ц е н к а  р е з у л ь т а т о в . При исследо-

вании учитывают все яйца гельминтов, обна-

руженные в препаратах. Метод позволяет

диагностировать заражение всеми видами гель-

минтов.

П р и м е ч а н и я . 1. Кроме «Лотоса», мож-

но использовать и другие порошки, но при

условии подбора соответствующей концен-

трации раствора, для чего берут максималь-

ную навеску, растворяющуюся без осадка. 2.

Кал следует помещать в раствор детергента

не более чем через 1 ч после дефекации.

Обнаружение яиц гельминтов в перианально-

ректальных соскобах с помощью деревянного

шпателя.  П р и н ц и п . Яйца гельминтов счи-

щают деревянным шпателем с перианальных

складок.

Р е а к т и в ы . 1. 50% раствор глицерина.

2. 1 % раствор гидрокарбоната натрия (NaHCO

3

).

С п е ц и а л ь н о е  о б о р у д о в а н и е :

микроскоп.

Х о д  и с с л е д о в а н и я . Соскоб произво-

дят с поверхности перианальных складок у ануса

и в нижних отделах прямой кишки шпателем.

Соскоб делают до дефекации утром или вечером

(через 2—3 ч после того, как больной лег

спать). Шпатель перед соскабливанием смачи-

вают в 50 % растворе глицерина или в 1 %

растворе гидрокарбоната натрия. Материал со

шпателя помещают с помощью покровного

стекла на предметное стекло в каплю 50 %

глицерина и, накрыв покровным стеклом, микро-

скопируют. Шпатель после взятия соскоба сжи-

гают.

О ц е н к а  р е з у л ь т а т о в . Метод приме-

няют для диагностики тениаринхоза и энтеро-

биоза.

Обнаружение личинок гельминтов по методу

Бермана.  П р и н ц и п . Метод основан на спо-

собности личинок гельминтов мигрировать по

направлению к теплу.

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

Р е а к т и в ы не требуются.

С п е ц и а л ь н о е  о б о р у д о в а н и е .  1 .

Микроскоп. 2. Металлическая сетка. 3. Штатив.

4. Зажимы. 5. Резиновые трубки. 6. Центри-

фуга.

Т е х н и к а  и с с л е д о в а н и я . Стеклян-

ную воронку с резиновой трубкой на узком

конце укрепляют в штативе (трубка зажата

зажимом). Металлическую сетку с 5—10 г кала

помещают в воронку, заполняют воронку водой

(40—50 °С) так, чтобы вода касалась нижней

части сетки. Через 4 ч, когда личинки перейдут

в теплую воду и скопятся в нижней части

трубки, зажим открывают и сливают воду в

центрифужные пробирки. Центрифигируют 2—3

мин, надосадочную жидкость сливают, а осадок

помещают на предметное стекло и микроскопи-

руют.

О ц е н к а р е з у л ьт а т о в. Метод приме-

няют при диагностике стронгилоидоза.

Обнаружение личинок гельминтов при куль-

тивировании их на фильтровальной бумаге

(метод Харада и Мори).  П р и н ц и п . В тепле

на влажной фильтровальной бумаге из

яиц анкилостом развиваются филяриевидные

личинки.

С п е ц и а л ь н о е  о б о р у д о в а н и е :

микроскоп.

Х о д  и с с л е д о в а н и я .  Н а фильтроваль-

ную бумагу (15 X 1,5 см) наносят 0,5 г кала.

Бумагу помещают в пробирку, на 1/4 заполнен-

ную водой так, чтобы свободный от кала конец

был под водой, а другой выступал из пробирки

и был зажат пробкой. Пробирка 5—6 дней

стоит в термостате при 28°С. Личинки, появив-

шиеся из яиц, оседают на дне пробирки. Бума-

гу извлекают из пробирки и уничтожают, жид-

кость исследуют с помощью лупы. Для уточне-

ния можно центрифугировать жидкость и

микроскопировать осадок.

О ц е н к а  р е з у л ь т а т о в . Под лупой

выявляют филяриевидные личинки анкилостомы

или некаторов.

П р и м е ч а н и я . 1. В теплое время года

пробирки можно держать при комнатной

температуре, время инкубации в этих

условиях 8—10 дней. 2. Кал для исследова-

ния нужно брать не более чем через 1 ч после

дефекации.

О ш и б к и ,  в о з м о ж н ы е  п р и  о п р е -

д е л е н и и  я и ц  г е л ь м и н т о в . - Н е о п ы т н ы й

микроскопист может при исследовании кала на

яйца гельминтов быть введен в заблуждение

присутствием в препарате элементов, близко их

напоминающих. Это растительные клетки, ка-

пельки жира, пузырьки воздуха и т. д. Отличи-

тельными признаками яиц гельминтов являются

правильная, большей частью овальная или

округлая форма, наличие ясно выраженной

оболочки, определенный размер, характерное

внутреннее содержимое. Пузырьки воздуха отли-

чаются от яиц гельминтов очень резкими

контурами и прозрачной серединой. Капли

жира при легком прижатии покровного стекла

меняют свою форму, в то время как яйца гель-

минтов при этом не изменяются.

Растительные клетки иногда по величине

и наличию двухконтурной оболочки могут напо-

минать яйца гельминтов, но контуры их обычно

неправильные, а отдельные клетки, встречаю-

щиеся в одном препарате, имеют различные

величину и форму. Одинаковыми по размеру

и форме, похожими на яйца гельминтов оказы-

ваются споры некоторых грибов, хорошо

сохраняющиеся в кале. Споры сморчка по форме

очень похожи на яйца власоглава, споры под-

березовика и подосиновика напоминают яйца

острицы, крупные споры некоторых растений

похожи на онкосферы цепней. Но все они значи-

тельно меньшего размера, чем яйца гельминтов,

н не имеют характерного содержимого (напри-

,мер, крючьев в онкосферах цепней).

Из элементов, еще более похожих на яйца

паразитических червей человека, следует упомя-

нуть яйца Hetetodera marioni — мелкой немато-

ды, паразитирующей на корнеплодах. Они

похожи на яйца трихостронгилид, но отличаются

бобовидной формой, а также тем, что на по-

люсах между оболочкой и содержимым яйца

(шарами дробления) расположены бесцветные

образования неправильно овальной формы.

Эти яйца являются «транзитными». Встречают-

ся в кале и крупные яйца мучного клеща, по

размерам приближающиеся к яйцам печеночной

двуустки. Они овальные, светло-желтые с тонкой

оболочкой и без крышечки.

Некоторое сходство с личинками червей

(например, строигилоида) могут иметь расти-

тельные волоски.

Сравнительные данные о яйцах гельминтов

см. в табл. 18.

Л и т е р а т у р а . Бурдасов А. Н., Руста-

мов Б. Р., Краснонос Л. Я.— В кн.: Актуальные

проблемы медицинской паразитологии и тропи-

ческой медицины. Тбилиси, 1970, с. 185; Калап-

тарян Е. В.—Мед. паразитол., 1938, № 1,

е. 142; Красильников А. А.— Мед. паразитол.,

1970, № 3, с. 318; № 6, с. 678; Майорова Л. А.,

Москвитина М. Г. Предложения по унификации

методов лаб. диагн. гельминтозов.— В кн.: Уни-

фицированные методы клин. лаб. исследований/

/Под ред. В. В. Меньшикова. М., 1972, вып. 4,

с. 275; Махмудова Ш. А.— Мед. паразитол.,

1968, № 2, с. 180; Михайлова Н, Д. Пособие

по копрологическнм исследованиям.— Л., 1962;

Подъяпольская В. П., Капустин В. Ф. Глистные

болезни человека.— М., 1958; Сафаралиев Р. С.

Медицинская паразитология и паразитарные

болезни.— М., 1963; Соловьев М. М., Москви-

тина М. Г. Предложения по унификации методов

лаб. диагностики простейших кишечника.—

В кн.: Унифицированные методы клин. лаб.

исследований/Под ред. В. В. Меньшикова. М.,

1974, вып. 5, с. 275; Katoh Katsuya.— Мед.

паразитол., 1970, № 6, с. 733.

84

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

2.3. ЖЕЛУДОЧНАЯ СЕКРЕЦИЯ

Исследование желудочной секреции склады-

вается из двух основных этапов — желудочного

зондирования, проводимого с использованием

стимуляторов секреции желудка, результатом

которого является получение желудочного со-

держимого в различные периоды секреторной

деятельности желудка, и исследования получен-

ного желудочного содержимого. Результатом

правильного проведения обоих этапов исследо-

вания являются данные, позволяющие досто-

верно оценивать секреторную деятельность

желудка.

Общие требования к зондовому исследова-

нию желудочной секреции: получение чистого

желудочного сока, максимально достоверное

изучение работы желез желудка в различные

периоды секреторного цикла, применение аде-

кватного поставленным целям стимулятора

желудочной секреции, изучение качественного

и количественного состава желудочного сока,

простота выполнения и правильная оценка

противопоказаний к данному исследованию.

2.3.1. Методы желудочного зондирования

Метод исследования толстым зондом надо

расценивать как устаревший, так как одномо-

ментность получения желудочного содержимого

не позволяет достоверно оценить желудочную

секрецию ни с качественной, ни с количествен-

ной стороны. Преимущество многомоментного

исследования желудочной секреции тонким

зондом заключается в получении чистого же-

лудочного сока на протяжении длительного вре-

мени, т. е. на различных этапах секреторной

деятельности желудка.

Унифицированная методика зондирования

желудка при многомоментном исследовании

желудочной секреции (1974).  П р и н ц и п

з о н д и р о в а н и я  т о н к и м  з о н д о м . По-

лучение чистого желудочного секрета путем

активной аспирации на различных этапах сек-

реторной деятельности желудка.

О б о р у д о в а н и е . 1. Тонкий зонд (полая

резиновая трубка диаметром 4—5 мм, длиной

около 1,5 м с метками на расстоянии 50—55 см

и 70—75 см от слепого конца зонда. 2 Пробир-

ки. 3. Штативы для пробирок. 4. Лоток. 5. Ворон-

ка. 6. Шприц вместимостью 20 мм или водо-

струйный насос стандартной конструкции, или

аспирационный вакуум-отсос. 7. Один из актив-

ных стимуляторов желудочной секреции.

Х о д  з о н д и р о в а н и я . Зондирование

лучше проводить в специальном помещении.

Исследование начинают утром натощак после

14-часового голодания. Конец тонкого зонда

помещают в глубине глотки на корень языка

н предлагают пациенту сделать несколько не-

торопливых глотательных движений, благодаря

чему зонд продвигается по пищеводу. Введение

зонда до первой метки свидетельствует о том,

что внутренний конец его находится в области

дна желудка, а продвижение зонда до второй

метки указывает на то, что он достиг привратни-

ка желудка. Необходимым условием полного

извлечения желудочного содержимого является

введение зонда на глубину, рассчитанную

следующим образом: рост пациента в санти-

метрах минус 100. В случае необходимости

положение зонда можно контролировать рентге-

нологически. После введения зонда полностью

извлекают содержимое желудка натощак, что

составляет отдельную порцию для исследова-

ния. Надо стремиться, чтобы от введения зонда

до извлечения порции натощак прошло не более

5 мин, т. е. длительности латентного периода

возбуждения желудочных желез. Затем в тече

кие часа собирают секрет желудка, выделяю-

щийся в результате стимулирующего влияния

зонда и аспирации (базальный секрет), а потом

уже начинают активную стимуляцию работы

слизистой оболочки желудка, после чего желу-

дочный сок собирают также в течение часа.

Аспирацию базалыюго и стимулированного сока

проводят по 5 мин через 10-минутные интервалы

или непрерывно, отмечая при этом 15-минутные

порции желудочного секрета. Таким образом,

за каждый час получают 4 порции желудочного

сока, которые составляют так называемое

часовое напряжение соответствующего периода

желудочной секреции. Полученные порции

желудочного сока подвергают физико-хими-

ческому исследованию.

Метод зондирования желудка по Н. И. Ле-

порскому.  П р и н ц и п . Получение чистого

желудочного сока натощак и после стимуляции

секреции введением в желудок капустного сока

или 7 % отвара сухой капусты. Влияние их на

желудочную секрецию одинаково. В практи-

ческой медицине чаще пользуются 7 % отваром

сухой капусты.

П р и г о т о в л е н и е у н и ф и ц и р о в а н -

н о г о  с т и м у л я т о р а  ж е л у д о ч н о й

с е к р е ц и и  о т в а р а  и з  с у х о й  к а п у -

с т ы (1974): 21 г сухой капусты заливают 500 мл

воды и кипятят 30—40 мин, пока не останется

приблизительно 300 мл жидкости. Отвар проце-

живают через 2 слоя марли и хранят в холо-

дильнике. Окончательная стандартизация сти-

мулятора достигается последующим титрова-

нием. 10 мл отвара титруют 0,1 н. раствором

едкого натра в присутствии 1—2 капель 1 %

спиртового раствора фенолфталеина до легкого

потемнения, в качестве контроля используют

исходный отвар сухой капусты. Количество

щелочи, пошедшей на титрование, умножают

на 10. Полученная величина является титром

приготовленного отвара. Титр отвара для сти-

муляции желудочной секреции должен быть 20;

если он больше, то отвар разбавляют кипяче-

ной водой, если меньше, то кипятят до получения

нужной концентрации.

Х о д  и с с л е д о в а н и я . После аспирации

содержимого желудка натощак через зонд при

помощи воронки в желудок вводят 200 мл отвара

капусты, подогретого до 37°С, через 10 мин

извлекают 10 мл содержимого (контрольная

порция), а еще через 15 мин аспирируют из

желудка все содержимое, затем в течение часа

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

с интервалами 15 мин собирают чистый желу-

дочный сок, который наряду с порцией натощак

подвергают исследованию (всего 5 порций же-

лудочного сока).

Субмаксимальный гистаминовый тест (моди-

фицированный метод Лямблеиа).  П р и н ц и п .

Получение чистого желудочного сока до и после

стимуляции секреции введением раствора гиста-

мина.

Х о д  и с с л е д о в а н и я . После аспирации

желудочного содержимого натощак в течение

часа собирают базальный секрет с интервалами

15 мин, затем пациенту вводят подкожно гиста-

мнна дигидрохлорид 0,008 мг/кг (0,08 мг на

10 кг) или гистамина фосфат 0,01 мг/кг, далее

на протяжении часа получают четыре 15-минут-

ные порции желудочного сока, отделяющегося

в ответ на введение гистамина.

Максимальный гистамнновый тест Кейя в

модификации Е. С. Рысса и А. Р. Лужис.

П р и н ц и п . Получение чистого желудочного

сока до и после стимуляции секреции макси-

мальной дозой гистамина на фоне антигистамин-

ных препаратов.

Х о д  и с с л е д о в а н и я . После аспирации

желудочного сока натощак в течение 30 мии

собирают базальный секрет, затем внутри-

мышечно вводят 2 мл 2 % раствора супрастина

(или другого блокатора Hi-рецепторов гистами-

на) и продолжают еще 30 мин собирать базаль-

ный секрет. Далее вводят подкожно дигидро-

хлорид гистамина 0,025 мг/кг и после этого в

течение часа продолжают собирать желудочный

сок, отмечая 15-минутные интервалы.

П р и м е ч а н и е . Как эффективные сти-

муляторы секреции, позволяющие получить

чистый желудочный сок и не дающие по-

бочных эффектов, применяют также гастрии

(2 мкг/кг) и его синтетический аналог пента-

гастрин (6 мкг/кг) подкожно.

2.3.2. Исследование

желудочного содержимого

Исследование желудочного сока включает

определение физических свойств, химическое и

микроскопическое исследование.

Физические свойства. Количество. Измеряют

каждую порцию желудочного сока и высчиты-

вают ,его объем во все фазы секреторного цикла.

Объем сока натощак не должен превышать

50 мл, в условиях базальной секреции объем

сока за час может быть 50—100 мл, при иссле-

довании по Лепорскому после стимуляции часо-

вой объем секреции 50—110 мл, при субмакси-

мальной стимуляции гистамином — 100—140 мл

за час, а в ответ на максимальную стимуляцию

за час выделяется 180—220 мл желудочного

сока.

Цвет. Обычно желудочное содержимое бес-

цветное, желтая или зеленоватая окраска желу-

дочного сока говорит о примеси желчи, а красно-

ватая или коричневатая — о примеси крови.

Запах. Нормальный желудочный сок запаха

практически не имеет, появление неприятного

гнилостного запаха свидетельствует о наруше-

нии эвакуации из желудка.

Примеси. Обычно в желудочном соке при-

месей практически нет, за исключением неболь-

шого количества слизи. Остатки пищевых масс,

которые могут быть обнаружены, говорят о

нарушении эвакуации из желудка, а примесь

большого количества слизи — о поражении его

слизистой оболочки.

Химическое исследование. Определение кис-

лотности.  П р и н ц и п . Определение концен-

трации свободной, связанной НС1 и общей кис-

лотности методом нейтрализации при титрова-

нии щелочью в присутствии индикаторов,

меняющих окраску в зависимости от рН среды.

Диметиламиноазобензол меняет окраску с крас-

ной на желтую в диапазоне рН от 2,4 до 4,0,

ализаринсульфоновокислый натр — с желтой на

фиолетовую в зоне рН от 5,0 до 6,8, а фенол-

фталеин приобретает красную окраску при

рН более 8,2.

П о с у д а и  о б о р у д о в а н и е . 1. Бю-

ретки вместимостью 20; 25 или 50 мл. 2. Штатив

Бунзеиа. 3. Химические стаканы вместимостью

50 мл. 4. Пипетки Мора или градуированные

на 5 мл. 5. Воронки. 6. Пробирки. 7. Фильтры

бумажные.

Метод Михаэлиса.  Р е а к т и в ы . 1. 1%

спиртовой раствор фенолфталеина. 2. 0,5 %

спиртовой раствор диметиламиноазобензола,

3. 0,1 н. раствор едкого натра.

Х о д  и с с л е д о в а н и я . В химический

стакан отмеривают 5 мл профильтрованного

желудочного сока, затем вносят каплю раствора

диметиламиноазобензола и каплю раствора

фенолфталеина. Титруют из бюретки раствором

едкого натра, предварительно отметив уровень

реактива в бюретке (1 уровень). При появлении

желто-оранжевой окраски (цвет семги) отме-

чают II уровень, а при первом появлении

лимонно-желтой окраски — III уровень, затем

продолжают титровать до перехода окраски

в стойко розовый цвет — IV уровень.

Р а с ч е т . Количество щелочи, пошедшей на

титрование до первого изменения окраски (раз-

ница между II и I уровнем), определяет концен-

трацию свободной HCI в желудочном соке.

Количество щелочи, пошедшей на все титрова-

ние, от красной окраски диметиламиноазобензо-

ла в резко кислой среде до красной окраски

фенолфталеина в щелочной среде, т. е. разница

между IV и I уровнем, соответствует общей

кислотности. Количество щелочи, пошедшей на

титрование до уровня, означающего среднее

арифметическое между III и IV уровнем, со-

ответствует концентрации всей HCI (т. е. сумме

свободной и связанной), а концентрацию свя-

занной HCI находят по разности между всей

HCI и свободной НС1. Разность между общей

кислотностью и всей НС1 называют кислотным

остатком, который определяется содержанием в

желудочном соке органических кислот и кислых

солей фосфорной кислоты. Таким образом, все

кислореагирующие вещества определяют в

одной порции.

П р и м е р  р а с ч е т а . Уровень I в бюрет-

ке — 4, уровень II — 5,4 (желто-оранжевая

86

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

 

 

 

 

 

 

 

содержание   ..  19  20  21  22   ..