б. К технике получения химер

  Главная     Книги - Виноделие    Химеры растений   Н.П. Кренке

 поиск по сайту  

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

содержание   ..  1  2  3  4  5  6  7  8  9  10    ..

 

 

 

б. К технике получения химер

Перед дальнейшим изложением вопроса мы хотим дать некоторые пояснения к тем небольшим отличиям в технике получения химер, которые мы применяли в своих работах (Кренке, 1930) и о которых не упоминают другие исследователи. Повторим их здесь.

После среза на химеру обыкновенной прививки клином мы следим за тем, чтобы этот поперечный срез прошел через возможно большее сечение окон истинного соприкосновения (Кренке, 1928, стр. 331—384). Следовательно, если положение среза оказалось  неудовлетворительным, мы бритвой снова срезаем тонкий слои до нужного сечения.

Указанные окна, или перемычки, нередко видны даже простым глазом. Далее, мы наблюдаем каллюсообразование, начиная с ранних его стадий.

 

Рис. 1. Начало химерного каллюса в прививке Solarium memphiticuin (s\ m.) .на Solanum lycopersi-cum (s. I.)
От середины вниз — черная по лоска изолирующей прослойки, прерванной окнами срастания. От середины вверх — большое окно срастания, давшее начало каллюсу, химерное строение которого видно прямо из того, что в его состав входят меристемы как справа, так и слева от изолирующей прослойки. Срез поперечный — в районе одной поверхности срастания прививки клином.
 

 

 

 

Через 10—20-кратную ручную лупу прекрасно видно, как в местах будущих каллюсов поверхность среза тургоризируется, причем подсохшая внешняя корочка трескается и сквозь эти трещинки видна молодая ткань начинающегося каллюса. Как правило, уже в этой стадии можно определить химерный каллюс, который, конечно, только и может образоваться из смешанной ткани перемычек, или окон срастания, т. е. из тех их районов, где смешиваются ткани обоих компонентов прививки: (рис. 1). Отсюда вытекает, что вообще в районе действительного срастания всякой прививки мы фактически имеем химерные гистологические образования с присущими химерам коррелятивными отношениями (ср. Кренке, 1928, стр. 369 и 458). Наше указание на химерные каллюсы полезно тем, что облегчает своевременный отбор обещающих химеры прививок и своевременное повторение среза пеньков прививок, не давших химерных каллюсов, а также своевременное удаление нехимерных каллюсов. Таким образом сильно повышается число полученных химер. Мы их получили 35% от числа удавшихся прививок (в числах: 21 из 60). Кроме того, весьма важен анализ самих химерных каллюсов. Конечно, наличие химерного каллюса еще не гарантирует химеры, так как для последней придаточный побег должен заложиться опять-таки только из смешанных тканей химерного каллюса, тогда как в нем всегда имеются значительные разобщенные области тканей чистых компонентов, и отсюда происходят чистые побеги.


 

 

Рис. 2. Заложение придаточной меристемы в каллюсе Solanum lycopersicum. Видна- концентрация- заложений вокруг отдельных клеток, как: бы стимулирующих деление.

 

 

 



При изучении заложения придаточных меристем в каллюсе мы, помимо ранее описанных нами (Кренке, 1928, стр. 194— 199), наблюдали следующее достойное внимания явление: в
каллюсовой паренхиме оказываются отдельные клетки или группы их, вокруг которых, как вокруг некоторых стимулирующих центров, начинается образование меристемы (рис. 2). Сначала эти клетки морфологически не отличимы от окружающих, но постепенно они гипертрофируются, оболочка их утолщается и как бы разрыхляется, красится сильнее, а иногда буреет, и постепенно клетка или, что чаще, группа из нескольких клеток разлагается, образуя сильно красящуюся и буроватую массу.

Именно с началом изменения и затем разложения указанных клеток вокруг них энергично образуется меристема, при чем сила новообразования постепенно затухает с удалением от стимулирующего центра. Подобными же центрами для придаточной меристемы оказываются иногда образовавшиеся в каллюсе изолированные сосудистые клетки, трахеиды или, что чаще, группы их. Насколько пока прослежено, эти группы, оставаясь изолированными от последующей организованной проводящей системы в каллюсе, в конце концов разлагаются подобно описанным выше клеткам. Но во всяком случае меристема вокруг них образуется ранее, чем разложение обнаруживается морфологически. Интересно здесь еще нередкое образование как бы «перераздраженных» клеток (Кренке, 1928, стр. 333 и 357), отделяющих указанные группы от прилегающей к ним меристемы (рис. 3). Неспособность этих перераздраженных клеток к делению понятна прямо из названия их; отсюда же понятно, что дальнейшие клетки, получая нормальное раздражение, показывают оптимальное деление, далее затухающее постепенно, с уменьшением раздражающего действия на расстоянии. Хочется напомнить (Кренке, 1928, стр. 335— 336) подобные же слои перераздраженных клеток, часто образующиеся и на поверхностях ранения, причем в случае открытого среза под ними начинается образование обыкновенного каллюса, а в случае прививки — образование раневой меристемы. При этом замечательно, что иногда (например рис. 4) на границе прививки перераздраженный слой с прилегающей к нему меристемой оказывается только у одного компонента прививки. Это еще раз (Кренке, 1928, стр. 383) показывает, что по -своему действию раневые раздражители могут быть различны как в разных видах растений, так и в разных тканях одного индивидуума. Я позволю здесь не сопоставлять описанных картин с теорией Габерландта (Haber-landt, 1921), развитой рядом авторов, так как в нашей прошлой работе (Кренке, 1928, стр. 138—155, 383) мы уже высказались на эту тему. Приведенное же только усиливает наши симпатии к этой теории. Напомним, однако, принципиальную схожесть описанного явления с тем, на которое имеется случайное указание Чемберлена (Chamberlain, 1921, стр. 299). Согласно с этим указанием можно наблюдать деление клеток паренхимы, окружающей концентрические сосудисто-волокнистые пучки
в стебле Aloe ferox при естественном разрушении и разложении флоэмы этих пучков.
 

 

 

 

Рис. 3. Образование придаточной меристемы в каллюсе Solatium lycopeisicum вокруг группы локализованных: сосудистых элементов (темно-окрашенные оболочки). В большинстве Случаев меристема отделена от означенных элементов (стимулирующих центров) рядом «перераздражённых» клеток.

 

 

 



Таким образом, придаточная меристема в каллюсах, дающая затем конусы нарастания придаточных побегов, в наших опытах образуется двумя путями: под поверхностью среза, видимо под влиянием раневых раздражителей среза, и вокруг описанных центров. Первое положение встречалось у нас чаще, второе же изолированно вообще не встречалось, но всегда наряду в первым, что, конечно, понятно, ибо раневые раздражители всегда были налицо.

 

 

Из дальнейших особенностей нашей методики отметим подтверждение нашего указания (Кренке, 1928, стр. 473) о частом образовании химер из каллюса, развивающегося в районе срастания нижнего конца узкого клина привоя (рис; 5 и 6). Наконец, для успеха их развития оказалось не безразличным, как выращивать дальше выявившиеся химеры. Обычно другие авторы черенковали химерные побеги, мы же наряду с этим составляли часть их на материнском каллюсе. Разница этих положений очевидна: при черенковании, как правило, в периклинальных химерах корни, вследствие их эндогенного заложения, оказываются принадлежащими внутреннему партнеру и, таким образом, внешний компонент питается чужими корнями. При оставлении же химеры на каллюсе мы можем любым образом комбинировать эти соотношения.

 

 

Так, при желании питать внешний компонент его же корнями мы получаем эту химеру на подвое, принадлежащем внешнему компоненту. Конечно, можно бы просто прививать полученную химеру на подвой соответственного вида, но здесь вносится новый фактор — срастание. При этом срастание может оказаться весьма различным в смысле участия в нем компонентов химеры. Этот способ прививки химерных черенков на некоторый третий вид или на химеру из других видов мы пытаемся применить для получения искусственных три- и тетрахимер, а теоретически и более сложных, т. е. таких, где в химеро участвовало бы более чем два разных вида растений. О таких искусственных химерах литературных указаний мы не встретили, о естественнных же немного говорит Читтондотт (Chit loud он, 1927).
 

 

 

Рис. 6. Образование химер 1 из ближнего каллюса прививки (Деталь рис. 5).
Параллельно белому пупктиру в середине подвоя (Я — Solatium mem-phiticum) виден нижний конец клина привоя (томата). Внизу его образовался маленький каллюс с таким же побегом (с). Срез прививки на химеру был сделан по направлению линии а —Ь. ch и ch1— химерные побеги, вышедшие из каллюса, соответственного каллюст с, но находящегося внизу клина с задней стороны иллюстрации. ch — периклинальная химера с местным выходом наружу вложения томат), развивающегося более мощно, чем покров (Solarium memphiticum). ch1 — такая же химера, внизу которой нарушу вышел один лист томата, s. I. — основание черешка названное листа; пластинка же его находится сзади иллюстрации и поэтому не видна. О — остаток пенька прививки, из которой срезом  был взят материал для фиксирования верхнего каллюса.
 


 

 

 

А, В  - стрелками указаны плазыодезмы между клетками различных слоев (I, II, III) молодого стебля Solanum lycopersieum — Socanum meraphitictim (II) (см. Л. Meyer, 1914). С — схема поперечного среза обычной прививки клином. О — Я — поперечные срезы прививок перекрещивающимися клиньями (получение трихимер). F—поперечный срез секториальной прививки (для той ше цели). О—схема механизма развития перикпинаяьной химеры непосредственно из каллюса.

 

 

 

Рис. 8. Прививка перекрещивающимися клиньями Solanum spinosum (5. sp.), Solarium lycopersicum (S\ L.), Solanum gainense (S. g.). В месте соединения трех трансплантосимбионтов, в центре, растущая клетка Solanum spinosum прободала пассивную клетку Solanum lycopersicum, ло последняя образовала защитную перегородку перпендикулярно к направлению внедрения атакующей клетки.
 

 

 

 

Помимо этого способа мы применяем и другой. И хотя пока мы не получили желаемого, но нет никаких сомнений, что мы или другой исследователь, который пожелал бы воспользоваться нашими методами, получит трихимеры при достаточно большом число прививок. У нас их было очень мало.

Предлагаемый способ прививки очень прост и заключается в следующем (рис. 7): после срастания обыкновенной прививки
клином (С) двух видов, эта прививка, как обычно для получения химер, срезается поперек приблизительно в верхней трети клина. Затем получившийся пенек надкалывается перпендикулярно к надколу при первой прививке и в этот расщеп прививается третий вид растения. Тогда в четырех точках: получается соприкосновение тканей трех трансплантосимбионтов (В). И именно в этих четырех точках могут образоваться трихимерные каллюсы, а затем таковые же химеры. Факт же истинного срастания в указанных точках трех компонентов нами проверен анатомически (например рис. 8). Этот способ прививки мы называем прививкой перекрещивающимися клиньями. Конечно, этот метод может быть несколько модифицирован и распространен для сведения в одном пункте более чем трех транплантасимбиотов.

 


Рис. 9. Гаплохламидная периклинальная химера: наружный компонент — Solanum memphiticum, внутренний — Solanum lycopersicum; Точка роста побега. Клетки зпидеомиса крупнее, ядра их более темно-окрашены.