содержание   ..  50  51  52  53  54  55  56  57  58  59  60  ..

СТЕРИЛИЗАЦИЯ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД

Жидкие и плотные питательные среды, содержащие сахара, стерилизуют в кипятильнике Коха ежедневно по 20 мин в течение трех дней, либо в автоклаве под давлением не выше 0,05 МПа в течение 20 мин. Среды, не содержащие сахаров, стерилизуют в автоклаве при давлении 0,1 МПа и температуре 121°С в течение 20 мин. Соотношения показаний манометра и температуры кипения воды приведены в табл. 52.

Таблица 52
 

Показания манометра, МПа	Температура кипения воды, °С	Показания манометра, МПа	Температура кипения воды, °С
0,00	100,0	0,05	112,5
0,01	102,5	0,06	114,5
0,02	105,0	0,10	121,0
0,03	107,5	0,15	127,0
0,04	110,0	0,20	132,0

Виноградное сусло является кислой средой, поэтому стерилизуют его однократным кипячением в течение 20—30 мин в кипятильнике Коха. Время стерилизации отсчитывают с момента закипания воды, что определяют по показанию термометра, вставленного в крышку кипятильника.

Вино как среду кислую и содержащую спирт стерилизуют путем пастеризации при температуре 70°С в течение 10—15 мин.

_____________________________________

Плотные питательные среды готовят на тех же жидких субстратах, добавляя к ним уплотнители — агар или желатин.

В питательные среды агар добавляют в количестве 2—2,5%. Для приготовления плотной среды (сусло-агара) смешивают расплавленный 4%-ный водный раствор агара и сусло в горячем виде при температуре 60—70°С в равных количествах над пламенем спиртовки. После перемешивания разливают в чашки Петри или в пробирки стерильно. Желатин добавляют в среды в количестве 10—15%.

Для лучшего прилипания агаровых сред к стеклу рекомендуется к сусло-агару добавлять желатин в количестве 5%.

______________________________

Сохраняют питательные среды в прохладном, защищенном от света и не слишком влажном помещении. В сыром помещении ватные пробки пропитываются влагой и через них прорастает мицелий плесневых грибов. На каждой склянке, колбе со средой или на колпачке указывают название среды и время приготовления. Надпись на стекле делают специальными чернилами, на бумажном колпачке — карандашом.

Состав чернил для записи по стеклу:

раствор 1: 2 г танина растворить в 15 мл дистиллированной воды, хорошо прокипятить, остудить;

раствор 2: 1 г основного фуксина или метиленового синего растворить в 15 мл спирта концентрацией 96% об.

Растворы соединяют и хранят в склянке с притертой пробкой.